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番茄SlMAPK6基因克隆及其表达特性分析
引用本文:岳宁波,李云洲,李玉龙,潘鹏程,潘寅涛,王勇,须文,吴浪,闫见敏.番茄SlMAPK6基因克隆及其表达特性分析[J].南方农业学报,2020,51(7):1625-1633.
作者姓名:岳宁波  李云洲  李玉龙  潘鹏程  潘寅涛  王勇  须文  吴浪  闫见敏
作者单位:贵州大学农学院,贵阳 550025西北农林科技大学资源与环境学院,陕西杨凌 712100中国农业大学园艺学院,北京 100083
摘    要:目的]克隆番茄促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因SlMAPK6,并分析其在不同非生物胁迫及信号物质处理下的表达模式,为深入探究SlMAPK6基因在番茄逆境响应中调控机制提供理论参考.方法]采用同源克隆技术从矮番茄中克隆SlMAPK6基因cDNA全长序列,并进行生物信息学分析,采用实时荧光定量PCR检测矮番茄幼苗在干旱(20%PEG-6000)、盐(300 mmol/L NaCl)及信号物质0.50 mmol/L水杨酸(SA)和0.10 mmol/L 2,1,3-苯并噻二唑(BTH)]处理下SlMAPK6基因的表达模式.结果]克隆获得SlMAPK6基因cDNA全长序列为1360 bp,开放阅读框(ORF)为1131 bp,编码376个氨基酸残基,其编码蛋白理论等电点(pI)6.76,不稳定指数44.36,脂肪系数90.00,为不稳定的强脂溶性蛋白,亲水性平均值(GRAVY)-0.396,亲水性氨基酸均匀分布在整个肽链中,故该蛋白为亲水性蛋白;亚细胞定位于细胞核及胞浆质中,无跨膜区,含有36个磷酸化位点,其中丝氨酸(Ser)磷酸位点19个、苏氨酸(Thr)磷酸位点9个.SlMAPK6蛋白二级结构中,α-螺旋占38.03%,延伸链占10.37%,无规则卷曲占51.60%.SlMAPK6蛋白与马铃薯StMAPK4、风铃辣椒CbMAPK4和中华辣椒CcMAPK4蛋白同源性均为99.47%.SlMAPK6和SlMAPK5蛋白的亲缘关系最近,与拟南芥MAPK家族B亚族成员AtMAPK4、AtMPK5、AtMPK11、AtMPK12和AtMPK13蛋白的亲缘关系也较近.经SA、BTH、NaCl和PEG-6000处理后,SlMAPK6基因均出现抑制表达,说明SlMAPK6基因负向调控番茄植株的逆境响应.结论]SlMAPK6基因可能参与负调控番茄植株的抗病和抗逆胁迫机制.SlMAPK6蛋白通过Ser或Thr磷酸化识别细胞信号的传导功能,在矮番茄逆境胁迫响应中发挥重要作用.

关 键 词:番茄    促分裂原活化蛋白激酶6(MAPK6)    基因克隆    信号物质    非生物胁迫    表达特性

Cloning and expression analysis of SlMAPK6 gene in tomato
YUE Ning-bo,LI Yun-zhou,LI Yu-long,PAN Peng-cheng,PAN Yin-tao,WANG Yong,XU Wen,WU Lang,YAN Jian-min.Cloning and expression analysis of SlMAPK6 gene in tomato[J].Journal of Southern Agriculture,2020,51(7):1625-1633.
Authors:YUE Ning-bo  LI Yun-zhou  LI Yu-long  PAN Peng-cheng  PAN Yin-tao  WANG Yong  XU Wen  WU Lang  YAN Jian-min
Abstract:
Keywords:
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