| 新疆卡拉库尔羊Fas基因原核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 贾山岭,潘伊微,潘 辉,贺艳艳,李莲瑞.新疆卡拉库尔羊Fas基因原核表达载体的构建及表达[J].西北农业学报,2013,22(6):6-9. |
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| 作者姓名： | 贾山岭 潘伊微 潘 辉 贺艳艳 李莲瑞 |
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| 作者单位： | （1.塔里木大学 生命科学学院，新疆阿拉尔 843300;2.新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室，新疆阿拉尔 843300;3.塔里木大学 动物科学学院，新疆阿拉尔 843300） |
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| 基金项目： | 新疆建设兵团应用基础项目（07GC07）。 |
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| 摘 要： | 根据GenBank的羊Fas细胞凋亡因子序列设计1对特异性引物，将EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点引入到引物两端，同时加上保护性碱基。利用RT-PCR技术，从新疆卡拉库尔羊外周血淋巴细胞总RNA中扩增出特异性基因片段。将分离纯化后的PCR产物与pMD-18T载体进行连接，利用双酶切反应与菌液PCR对阳性重组克隆进行鉴定筛选，然后进行序列测定。使用原核表达载体pET28a来完成Fas的定向克隆，成功构建重组融合表达质粒pET-28a-Fas，然后将质粒转化至E.coli BL21感受态，设置不同IPTG浓度和诱导温度，选择最佳的表达条件，然后初步纯化重组融合蛋白。结果表明，在pET28a表达载体中，Fas基因的插入方向和读码框均正确；同时Fas基因也完成在E.coli BL21融合表达的目的，融合蛋白分子质量为39.7 ku。
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| 关 键 词： | 卡拉库尔羊 Fas基因 原核表达 |
Construction and Expression on Prokaryotic Expressing Vectors of Fas Gene from Xinjiang Karakul Sheep |
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| JIA Shanling,PAN Yiwei,PAN Hui,HE Yanyan and LI Lianrui.Construction and Expression on Prokaryotic Expressing Vectors of Fas Gene from Xinjiang Karakul Sheep[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2013,22(6):6-9. |
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| Authors: | JIA Shanling PAN Yiwei PAN Hui HE Yanyan and LI Lianrui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Karakul sheep Fas Gene Prokaryotic expression |
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