| 美国白蛾几丁质酶细菌表达的RNA干扰载体构建及其介导的RNA干扰 |
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| 引用本文： | 王越,张苏芳,徐瑶,方加兴,孔祥波,刘福,张真.美国白蛾几丁质酶细菌表达的RNA干扰载体构建及其介导的RNA干扰[J].林业科学研究,2019(2). |
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| 作者姓名： | 王越 张苏芳 徐瑶 方加兴 孔祥波 刘福 张真 |
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| 作者单位： | 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所 |
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| 摘 要： | 目的]探索细菌表达dsRNA介导的RNAi在美国白蛾中的可行性,为RNAi技术在美国白蛾等林业害虫上的应用提供依据。方法]选择几丁质酶HcChi基因作为靶标,设计有效的干扰片段,构建到L4440干扰载体上,并转入HT115大肠杆菌菌株。IPTG诱导HT115表达HcChi的干扰片段,用菌液持续饲喂美国白蛾幼虫,观察幼虫生长情况,定量PCR检测HcChi的转录水平。结果]构建了带有HcChi-L4440表达载体的HT115菌株,经IPTG诱导能够合成HcChi-dsRNA,浓缩菌液持续饲喂幼虫显著抑制HcChi的表达,相对表达量显著下降了76.7%～90.3%,幼虫生长发育迟缓,体重增长量与对照相比显著减小40.7%。结论]成功构建HcChi RNA干扰载体,通过饲喂法在美国白蛾中获得RNAi效应。该体系首次在美国白蛾中建立,为该物种的基因功能研究和生物防治提供新思路。
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