| 棉花蕾铃离层脱落相关基因的克隆及其表达分析 |
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| 引用本文： | 张书芹.棉花蕾铃离层脱落相关基因的克隆及其表达分析[J].南方农业学报,2018(5). |
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| 作者姓名： | 张书芹 |
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| 作者单位： | 华中农业大学植物科学技术学院/作物学国家级实验教学示范中心 |
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| 摘 要： | 【目的】研究激素与棉花蕾铃脱落的关系,为解析离层脱落相关基因的表达、调控及功能鉴定提供基础资料。【方法】以50 mg/L赤霉素(GA3)和250 mg/L乙烯利(CEPA)分别处理的棉花蕾铃离层c DNA为Tester,H2O处理的棉花蕾铃离层c DNA为Driver,利用抑制消减杂交(SSH)技术构建经GA3和乙烯处理后的消减文库,反向Northern blotting筛选出离层差异表达的EST序列,然后进行基因功能注释与功能分类,并分析蕾铃离层差异表达基因的组织表达模式和GA3诱导表达规律。【结果】以GA3处理的离层c DNA为Tester、H2O处理的离层c DNA为Driver,所构建的c DNA文库命名为GA文库;以CEPA处理的离层c DNA为Tester、H2O处理的离层c DNA为Driver,所构建的c DNA文库命名为CE文库。从构建的两个消减文库(GA和CE)中共筛选出29个在离层差异表达的EST序列,通过基因功能注释与功能分类,可将这些EST序列分为翻译相关、代谢相关、信号传导、转录相关、蛋白合成、能量代谢、抗逆相关、基因组序列和未知功能等九大类,其中与翻译相关的EST序列占24.14%,说明经激素处理后棉花蕾铃离层有大量的蛋白合成。从消减文库中挑选10个差异表达基因(EST序列)进行RT-PCR分析,结果发现以GA3处理棉花蕾铃离层后部分相关基因的表达模式会发生变化。【结论】棉花蕾铃离层经激素处理后能激活脱落相关基因的表达,进而影响器官脱落,是其对逆境胁迫反应的结果。
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