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H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体制备及鉴定
引用本文:邓显文,谢芝勋,谢志勤,刘加波,庞耀珊,谢丽基,范晴,罗思思,黄莉.H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体制备及鉴定[J].南方农业学报,2016,47(4):679-683.
作者姓名:邓显文  谢芝勋  谢志勤  刘加波  庞耀珊  谢丽基  范晴  罗思思  黄莉
作者单位:广西兽医研究所/广西畜禽疫苗新技术重点实验室,南宁,530001
基金项目:广西自然科学基金项目(2013GXNSFDA019015),广西科学研究与技术开发计划项目(桂科重14121003-3-3;桂科合14123001-8),广西水产畜牧兽医局科技项目(桂渔牧科1204930)
摘    要:目的]制备H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)单克隆抗体,为检测诊断AIV提供技术支持.方法]以灭活H9亚型AIV广西分离株为免疫原,免疫6~8周BALB/c雌性小鼠,然后取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,经血凝抑制试验(HI)及间接免疫荧光试验(IFA)筛选H9亚型AIV血凝素单克隆抗体的杂交瘤细胞.结果]经过4次亚克隆,获得3株稳定的H9单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为8A4、1B11和7F1细胞株,其细胞株培养上清液HI效价为27~210,腹水HI效价为216~219;单克隆抗体亚类鉴定结果表明,3株H9单克隆抗体均属于IgG1亚类,其轻链均为K链.3株H9单克隆抗体只与H9亚型AIV发生特异性HI反应,而与其他HA亚型AIV及新城疫病毒(NDV)、减蛋综合症病毒(EDS)、传染性支气管炎病毒(IBV)无交叉反应.3株H9单克隆抗体细胞株的抗体分泌能力稳定性良好.结论]用灭活H9亚型AIV为免疫原能成功制备针对H9亚型AIV血凝素的单克隆抗体,且具有良好的亚型广谱性和特异性.

关 键 词:禽流感病毒(AIV)    H9亚型    血凝素    单克隆抗体    HI效价    亚型广谱性

Preparation and identification of monoclonal antibodies against hemagglutinin of H9 subtype avian influenza virus
Abstract:
Keywords:avian influenza virus(AIV)  H9 subtype  hemagglutinin(HA)  monoclonal antibody  HI titer  subtype broad-spectrum
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