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刀豆蛋白A纯化猪流行性腹泻病毒的研究
引用本文:李兰,张浩明,杨利,程海卫,侯立婷,张元鹏,侯继波,陈瑾,郑其升.刀豆蛋白A纯化猪流行性腹泻病毒的研究[J].中国农业大学学报,2023,28(11):125-130.
作者姓名:李兰  张浩明  杨利  程海卫  侯立婷  张元鹏  侯继波  陈瑾  郑其升
作者单位:江苏省农业科学院 动物免疫工程研究所, 南京 210014;江苏省农业科学院 动物免疫工程研究所, 南京 210014; 江苏省食品质量安全重点实验室国家重点实验室培育基地, 南京 210014; 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心, 泰州 225300
基金项目:国家自然科学基金项目(32102690);江苏省农业科技自主创新资金(CX(21)3135)
摘    要:为开发一种新型高效、低成本的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)抗原纯化方法,本研究尝试了一种基于凝集素(刀豆蛋白A,Con A)的PEDV浓缩纯化方法。通过Con A与PEDV病毒粒子的特异性结合,形成Con A-PEDV复合物,然后通过低速离心和竞争性解离即可实现病毒纯化。结果表明:1)当Con A的使用浓度为80 μg/mL,室温作用2 h,4 000 r/min离心15 min时,纯化效果较佳;2)利用Tris-HCl缓冲液(pH 7,0.01 mol/L,内含200 mmol/L甲基-α-D-吡喃甘露糖苷和50 mmol/L NaCl)进行解离时,较PBS缓冲液有更高的解离效率;3)该方法病毒回收率大约为80%,总蛋白去除率可达90%。综上,本研究利用Con A纯化PEDV是可行的,为高质量PEDV灭活疫苗的研发奠定基础。

关 键 词:刀豆蛋白A  猪流行性腹泻病毒  纯化
收稿时间:2022/12/27 0:00:00

Research on the purification of porcine epidemic diarrhea virus by Concanavalin A
LI Lan,ZHANG Haoming,YANG Li,CHENG Haiwei,HOU Liting,ZHANG Yuanpeng,HOU Jibo,CHEN Jin,ZHENG Qisheng.Research on the purification of porcine epidemic diarrhea virus by Concanavalin A[J].Journal of China Agricultural University,2023,28(11):125-130.
Authors:LI Lan  ZHANG Haoming  YANG Li  CHENG Haiwei  HOU Liting  ZHANG Yuanpeng  HOU Jibo  CHEN Jin  ZHENG Qisheng
Affiliation:National Research Center of Engineering and Technology for Veterinary Biologicals, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China; National Research Center of Engineering and Technology for Veterinary Biologicals, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China; Cultivation Base of State Key Laboratory for Food Quality and Safety of Jiangsu Province, Nanjing 210014, China; GuoTai(Taizhou)Center of Technology Innovation for Veterinary Biologicals, Taizhou 225300, China
Abstract:
Keywords:Concanavalin A  porcine epidemic diarrhea virus  purification
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