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新城疫病毒F_（48）E_8株cDNA文库的构建 总被引：1，自引：0，他引：1
以ＳＰＦ鸡胚繁殖我国标准新城疫病毒Ｆ＿（４８）Ｅ＿８强毒株，经蔗糖密度梯度超速离心纯化病毒。再以酚－ＳＤＳ法提取病毒基因组ＲＮＡ，作为反应模板、采用Ｐｒｏｍｅｇａ公司商品试剂盒合成双股ｃＤＮＡ。以同聚物加尾的方法将ｃＤＮＡ克隆到质粒ｐＧＥＭ３Ｚｆ（一）中，经ＡＩＸ平板筛选，限制性内切酶分析和Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的核酸探针检测，共获得插入外源片段大小在０．６～４．８ｋｂ的阳性克隆７５个，初步构建了Ｆ＿（４８）Ｅ＿８株的ｃＤＮＡ文库 相似文献
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减蛋综合征病毒基因文库的构建 总被引：5，自引：0，他引：5
采用差速离心法纯化了鸭胚尿囊液中的减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）ＷＰＤＶ２０５病毒并提取了病毒基因组核酸。选用ＥｃｏＲⅠ和ＢａｍＨⅠ两种限制性内切酶对病毒基因组ＤＮＡ进行双酶切处理，结果产生７个片段，在这７个片段中，只具有ＢａｍＨⅠ酶切位点的片段有２个，只具有ＥｃｏＲⅠ酶切位点的片段有３个，具有双酶切位点的片段有２个。将其中的５个片段分别插入到ｐＵＣ１８相应多克隆位点中，建立了ｐＥＤＳＶＢＥ１、ｐＥＤＳＶＢＥ２、ｐＥＤＳＶＢ１、ｐＥＤＳＶＢ２、ｐＥＤＳＶＥ５个重组子，并对这５个重组子进行了酶切鉴定 相似文献
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新城疫病毒F48E8株cDNA文库的构建 总被引：2，自引：0，他引：2
以ＳＰＦ鸡胚繁殖我国标准新城疫病毒Ｆ４８Ｅ８强毒株，经蔗糖密度梯度超速离心纯化病毒。再以酚－ＳＤＳ法提取病毒基因组ＲＮＡ，作为反就模板，采用Ｐｒｏｍｅｇａ公司商品试剂合成双股ｃＤＮＡ。以同聚物加尾的方法将ｃＤＮＡ克隆 粒ｐＧＥＭ ３Ｚｆ中，经ＡＩＸ平板筛选，限制性内切酶分析和Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的核酸探针检测，共获得插入外源片段大小在０．６－４．８ｋｂ的阳性克隆７５个，初步构建了Ｆ４８Ｅ８株 相似文献
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鸡痘病毒基因组DNA复制非必需片段的鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
将中国鸡痘病毒鹌鹑化弱毒株（２８２Ｅ４）蚀斑纯化，在ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞上增殖后，经超声波裂解，蔗糖梯度离心得到纯化病毒，以蛋白酶Ｋ消化，酚：氯仿、氯仿和水饱和乙醚抽捉，乙醇沉淀，得到ＦＰＶ基因组ＤＮＡ，后用ＥｃｏＲｌ消化，随机克隆到ｐＵＣ１８质粒中。限制性内切酶片段电泳分析结果表明，克隆到１０个不同大小的片段，根据酶切图谱分析，选取克隆或亚克隆后的单一酶切位点，插入标记基因（Ｐ１１一ＩａｃＤ筛选出３个复制非必需片段。为进一步构建表达外源片段重组质粒载体创造了良好的条件。 相似文献
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鸡痘病毒基因组DNA复制非必需片段的鉴定 总被引：8，自引：0，他引：8
将中国鸡痘病毒鹌鹑化弱毒株（２８２Ｅ４）蚀斑纯化，在ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞上增殖后，经超声波裂解，蔗糖梯度离心得到纯化病毒，以蛋白酶Ｋ消化，酚：氯仿、氯仿和水饱和乙醚抽提，乙醇沉淀，得到ＦＰＶ基因组ＤＮＡ，后用ＥｃｏＲＩ消化，随机克隆到ｐＵＣ１８质粒中。限制性内切酶片段电泳分析结果表明，克隆到１０个不同大小的片段，根据酶切图谱分析，选取克隆或亚克隆后的单一酶切位点，插入标记基因筛选出３个复制非必需片 相似文献
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猪MHCⅠ类基因区基因组DNA的RFLP初步分析 总被引：2，自引：0，他引：2
用４种限制性内切酶ＥｃｏＲＩ，ＢａｍＨＩ，ＨｉｂｄⅢ和ＲｓｔＩ对纯种二花脸猪和梅山猪白细胞基因组ＤＮＡ进行内急酶消化和电泳，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ将ＤＮＡ转移到ＮＣ膜上，将来源于猪ＭＨＣ的Ⅰ类基因猪移植抗原基因片段克隆ＰＤ１－ＡＤＮＡ（４．３ｋｄ）用ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记作为ＤＮＡ探针，进行分子杂交反应，比较了不同品系和个体间的限制性酶切片段长度多态性（ＲＦＬＰ），结果表明：（１）经各种 相似文献
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为准确检测鸡群中减蛋综合征病毒感染情况,从减蛋综合征病毒（ＥＤＳ）贵州分离毒株ＨＳ－１中提纯病毒ＤＮＡ后,用地高辛标记制备了全基因组探针。在Ｄｏｔ－ｂｌｏｔ中该探针不与正常鸭胚尿囊液核酸提取物及马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＤＮＡ发生反应,只与３株ＥＤＳ病毒（国际标准毒ＡＶ－１２７、贵州分离毒ＨＳ－１、南京分离毒（ＧＣ２）ＤＮＡ呈阳性反应,具有较高的特异性;可检测出３０ｐｇ的同源ＤＮＡ,具有较强的灵敏度 相似文献
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鸡源和鸭源减蛋综合征病毒DNA酶切图谱分析 总被引：1，自引：0，他引：1
采用差速离心法纯化鸡源和鸭源减蛋综合征（ＥＤＳ）病毒,酚－氯仿抽提法提取两种毒株的核酸。选取ＥｃｏＲⅠ、ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅠ、ＢｇｌⅡ、ＫｐｎⅠ、ＰｓｔⅠ和ＨｉｎｄⅢ７种限制性内切酶,对两种毒株进行酶切图谱比较。结果显示,鸡源株酶切片段数分别为４,４,６,８,５,９,１０,共计４６个片段;鸭源株产生的酶切片段数分别为４,４,５,７,９,１０,８,共计４７个片段。两者的酶切结果除ＥｃｏＲⅠ完全相同外,其余均存在不同程度的差异。由此表明,鸡源和鸭源ＥＤＳ病毒虽然血清型相同,但在基因水平上存在较大的差异,属不同基因型。 相似文献
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本实验所用的马传染性贫血病毒（ＥＩＡＶ）Ｌ株（ＥＩＡＶ－Ｌ）是我国研制成功的ＥＩＡＶ弱毒疫苗的原始强毒株。以ＥＩＡＶ－Ｌ感染马外周血液白细胞中ＤＮＡ为模板，利用ＰＣＲ技术，分４个片段扩增ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒ＤＮＡ，并分别克隆到载体质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ中，得到 ４个重组质粒ｐ２．８、ｐ２．４、ｐ３．１和 ｐ１．２，经酶切鉴定后测序。对测序结果分析、拼接，得到 ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒基因组全序列。ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒基因组全长 ８２３５ｂｐ，其中 Ｇ＋Ｃ含量为 ３８％。通过使用计算机软件ＤＮＡＳＩＳ分析，ＥＩＡＶ－Ｌ与马传贫驴强毒和马传贫驴白细胞疫苗毒序列同源性分别为９８．４％和９６．９％。同源性如此接近反映了它们之间的亲缘关系，另外 ＥＩＡＶ－Ｌ与驴强毒的同源性高于其与驴白细胞弱毒疫苗株的同源性，这符合驴白细胞弱毒疫苗株的衍生过程。基因组两端是长为３１６ｂｐ的ＬＴＲ，其中Ｕ３为１９７ｂｐ，Ｒ为８０ＢＰ，Ｕ５为３９ｂｐ。前病毒基因组有 ３个较大的开放阅读框架（ＯＲＦ），分别编码 ｇａｇ、ｐｏｌ和 ｅｎｖ基因。ｇａｇ基因位于 ７１３～１９１２位碱基之间，全长１２００ｂｐ；ｐｏｌ基因位于 １７０８～５１０９位碱基之间，全长 相似文献
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鸡源和鸭源EDSV某些分子生物学特性的比较 总被引：1，自引：0，他引：1
采用差速离心法纯化鸡源和鸭源ＥＤＳＶ后,一方面用酚－氯仿抽提法分别提取两种毒株的核酸,选取Ｅｃｏ ＲⅠ,ＢａｍＨⅠ,ＢｇｌⅠ,ＢｇｌⅡ,ＫｐｎⅠ,ＰｓｔⅠ和ＨｉｎｄⅢ７种限制性内切酶对两种毒株的核酸进行酶切图谱分析;另一方面利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ技术对两种毒株进行多肽分析。酶切结果显示：鸡源株用上述７种酶酶切后分别产生４,４,６,８,５,９,１０个片段,共计４６个;鸭源株分别产生４,４,５,７,９, 相似文献
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选３１只２月龄德系安哥拉幼公兔，每只兔以背中线为界，左侧拔毛（试验），右侧剪毛（对照）。２月龄开始采毛，共采集１３５，２１０和２８５日龄３批毛样。每次采毛样后的第９天采集皮样。试验结果：（１）拔毛可以显著地提高粗毛率，主要原因是粗毛和两型毛根数增加，其次是粗毛直径增粗；（２）拔毛具有激活毛囊活性的迹象，使原来处于静止期的部分次级毛囊表现活性；（３）拔毛后次级毛囊数比剪毛的少；（４）拔毛使少部分次级毛囊的体积和内鞘在短时期内增大，之后随着时间的延伸逐渐恢复原状，这就是拔毛增长两型毛的机制；（５）拔毛兔与粗毛型兔之间在毛囊群结构和被毛的某些特性上呈现明显的差异。 相似文献
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在酸性黄壤中接种3株耐酸苜蓿根瘤菌91522,91512,91532,并施用不同浓度的Ca2+,比较研究了其在苜蓿根际土壤中的定殖动态与水平,进而分析了施Ca2+和接种耐酸苜蓿根瘤菌对紫花苜蓿共生效应的影响.结果表明:接种3种耐酸苜蓿根瘤菌均能在酸性土中定殖,且定殖动态基本一致,以接种菌株91512和91532的效果最好.施Ca处理对根瘤菌定殖影响不明显,施5 mmol/L Ca2+时,定殖效果最佳.接种耐酸苜蓿根瘤菌对苜蓿植株瘤重、根鲜重、株高、植株上部鲜重、全氮含量的影响显著.施Ca2+对植株根鲜重、株高和上部鲜重的影响达到了极显著水平,对瘤重的影响显著.施用5 mmol/L Ca2+,苜蓿生长和结瘤的效果最好,表明在酸性黄壤中,施用适当浓度的Ca2+可以提高紫花苜蓿的产量和品质. 相似文献
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以临床症状和病理学变化确诊为兔脑炎微孢子虫感染的家兔为研究对象,用流式细胞计数仪检测外周血CD4+、CEB+细胞比例,并与健康家兔进行比较。结果表明兔脑炎微孢子虫病患兔外周血CD4+细胞比例与对照组相比无明显变化,P>0.05;而CD8+细胞比例明显高于对照组,CD4+/CD8+比值则明显低于对照组,P<0.05。提示兔脑炎微孢子虫患兔外周血CD4+/CD8+比值明显下降,机体免疫力减弱,可能是导致兔脑炎微孢子虫入侵机体,引起家兔发病的重要原因。 相似文献
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Cu2+是养殖水体的常见污染物,为了评估Cu2+对鱼类超氧化物歧化酶(SOD)的影响,将中华倒刺鲃暴露于含0.01～0.32 mg/L Cu2+的水体中饲养8 d,测定肌肉、血浆及肝脏中SOD活性的变化.实验结果显示,低浓度Cu2+(0.01 mg/L)对肌肉、血浆及肝脏的SOD有诱导作用,随着处理时间的延长而升高.但当浓度较高(0.04mg/L以上)时,SOD活性均呈现先诱导后抑制的趋势.Cu2+浓度越高,SOD活性上升越急剧,出现活性抑制的时间就越提前.此外,SOD在3种组织中的分布亦存在明显差异,肝脏的SOD活性最大.这些结果表明,肝脏SOD活性更宜作为Cu2+污染的生物标记. 相似文献
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不同光质对小麦幼苗谷氨酸合成酶及钙调系统酶活性的影响 总被引：5，自引：0，他引：5
加钙培养的小麦黄化苗和绿苗,经过红光（Ｒ）、远药光（ＦＲ）处理有效地提高谷氨酸合成酶（ＧＯＧＡＴ）的活性。不同光质对麦苗硝态氮代谢关键酶活性的影响与细胞内钙调系统及其作用靶酶－Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｈ－ＡＴＰａｓｅ活性有密切的联系。Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｈ－ＡＴＰａｓｅ的作用能改变细胞内Ｈ、Ｃａ＾２＋的浓度,从而调节细胞的内环境,进而对植物的代谢过程起调节作用 相似文献
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溴氰菊酯对草鱼鱼种脑AchE及ATP酶活性的影响 总被引：10，自引：0，他引：10
本试验研究了溴氰菊酯对草鱼鱼种的急性效应以及溴氰菊酯对草鱼鱼种脑ＡｃｈＥ及ＡＴＰ酶活性的影响。结果表明,溴氰菊酯对规格Ⅰ（平均体重８．２１ｇ）、规格Ⅱ（平均 重６６．６ｇ）草鱼鱼种９６ｈ半数致死浓度（９６ｈＬＣ５０）分别为２．１６μｇ／Ｌ、４．２６μｇ／Ｌ,９５％置信区间分别为１．９３￣２．４２μｇ／Ｌ、３．８２￣４．７５μｇ／Ｌ,离体条件下对草鱼种脑Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性抑制显著,呈一定的浓度 相似文献
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根据有向图的分析，求得矩阵方幂，进而求得常系数非齐次线性差分方程解的一种显式表示式，方法较简单。 相似文献
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本文对36例阑尾肿瘤,包括阑尾粘液囊肿21例、腺瘤2例、腺癌5例、类癌4例、转移癌2例,黄色肉芽肿及恶性淋巴瘤各1例作了临床病理分析。结果显示:良恶性瘤比例为2:1,均以男性多见,平均年龄51.2岁;临床误诊或漏诊者占本组病例的75％;对各类肿瘤的病理改变进行了较详细的描述,并对误、漏诊的原因及本组病理改变的某些特点作了讨论。 相似文献
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离子注入对洋葱表皮细胞形态的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
本文讨论了离子束与生物体相互作用动态分析仪的物理方案及参量设计,提出了由微波(2.45GHz)激发等离子体,放电室尺寸远小于TE或TM谐振模式的ECR离子源模式,采用永久磁铁的会切场磁场位形产生高密度的等离子体。利用二电极引出系统引出N~+离子流密度高达16mA/cm~2,总离子流1.1mA。通过聚焦,离子束斑直径为0.2mm,并进行了离子束与洋葱表皮细胞相互作用情况显微观察与摄影。 相似文献
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土壤水分对水稻籽粒增重过程的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
应用数学模型Ｒｉｃｈａｒｄｓ方程，研究了扬稻２号等５个品种（含杂种）在不同土壤水分状况下籽粒增重的过程。结果表明：（１）与对照（上水势为０ｋＰａ）相比，低土壤水势处理的各品种的强、弱势粒达到最大生长速率的时间Ｔ＿（ｍａｘＧ）和活跃生长期Ｄ较长，最大生长速率Ｇ_（ｍａｘ）、平均生长速率Ｇ和起始生长势Ｒ￣０较小，参数Ｎ值较大，生长速率曲线向右偏移；（２）在低土壤水势下增施氮肥，各品种弱势粒的Ｔ＿（ｍａｘＧ），Ｄ，Ｎ和后期生长比率Ｐ_３减小，Ｒ￣０，Ｇ_（ｍａｘ）和Ｇ增大，生长速率曲线向左偏移；（３）在５个供试品种中，土壤水分对盐粳２号的籽粒灌浆影响最大，亚优２号次之，扬稻２号的影响最小。 相似文献