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AtNHX1基因对菊苣的转化和耐盐性研究 总被引：1，自引：5，他引：1
用农杆菌介导法将AtNHX1基因导入菊苣中,共获得42株卡那霉素(Kan)抗性再生植株。经过PCR检测、Southern杂交和RT-PCR检测表明,AtNHX1基因已成功整合到菊苣基因组中,并且能够正常转录。野生型和转基因植株诱发的愈伤组织进行耐盐生长试验,结果显示,相同盐胁迫条件下,转基因愈伤组织的相对生长率显著高于野生型愈伤组织。施加梯度NaCl胁迫后,植株叶片K+和Na+含量测定结果显示,转基因植株叶片比野生型积累更多的Na+和K+,维持较高的K+/Na+;叶片相对电导率测定结果表明,转基因株系叶片相对电导率显著低于野生型。上述结果表明,AtNHX1基因的导入和表达在提高菊苣耐盐性的同时减轻了盐胁迫对植物细胞膜的伤害。 相似文献
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以"甘农3号"紫花苜蓿为受体,利用农杆菌介导法导入双价基因OvBAN/bar,通过PCR检测和Southern杂交分析表明,4个转基因株系含有目的基因且均出现杂交条带,其中2个株系为单拷贝,1个株系为双拷贝,1个株系为三拷贝;对获得的4株转基因苜蓿进行qRT-PCR分析表明,具有三拷贝数的1个转基因株系OvBAN基因的表达量最高,其次为双拷贝数的2个转基因株系,并且这些株系的花青素还原酶活性及缩合单宁含量均显著高于野生型苜蓿。以过量表达OvBAN基因的3株转基因苜蓿为试验材料,进行抗蚜性和除草剂耐受性分析。结果表明,与野生型苜蓿相比,转OvBAN/bar基因苜蓿对苜蓿蚜都具有较好的抗性,蚜虫抑制率为78%~93%;用0.5%的市售草铵膦喷施各株系,10d后各转基因株系除个别叶片枯萎死亡,其他叶片及茎秆生长状况良好,而野生型苜蓿全部枯萎死亡,表明bar基因已整合到转基因苜蓿基因组中并稳定表达。综上所述,转OvBAN/bar基因紫花苜蓿表现出良好的抗虫性和除草剂耐受性。 相似文献
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以紫花苜蓿(Medicago sativa)‘中苜1号’为受体材料，通过根癌农杆菌介导法将抗旱基因PeDREB2a、KcERF转入‘中苜1号’，获得转基因抗性苗66株，基因组PCR检测阳性率为93.94%,RT-PCR检测表明目的基因在转录水平上能够稳定表达；利用Taqman PCR方法检测目的基因的拷贝数，结果表明PeDREB2a、KcERF基因在转基因株系Z6、Z7、Z9中均为单拷贝。在正常生长条件下，转基因株系Z6和Z7株高、分枝数、叶片吲哚乙酸含量、纤维素含量均显著高于野生型，而叶片乙烯含量显著低于野生型(P<0.05)。用20%PEG-3350和250 mmol·L-1 NaCl胁迫处理进行表型观测和抗逆生理指标检测，表明转基因株系与野生型相比抗旱、耐盐能力明显增强。本研究为进一步培育抗逆优质高产苜蓿新品种提供了新种质。 相似文献
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《草业学报》2009,18(3):103-109
用农杆菌介导法将AtNHX1基因导入菊苣中,共获得４２株卡那霉素（Ｋａｎ）抗性再生植株。经过ＰＣＲ 检测、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＲＴ－ＰＣＲ 检测表明,AtNHX1基因已成功整合到菊苣基因组中,并且能够正常转录。野生型和转基因植株诱发的愈伤组织进行耐盐生长试验,结果显示,相同盐胁迫条件下,转基因愈伤组织的相对生长率显著高于野生型愈伤组织。施加梯度ＮａＣｌ胁迫后,植株叶片Ｋ＋ 和Ｎａ＋ 含量测定结果显示,转基因植株叶片比野生型积累更多的Ｎａ＋ 和Ｋ＋ ,维持较高的Ｋ＋／Ｎａ＋ ;叶片相对电导率测定结果表明,转基因株系叶片相对电导率显著低于野生型。上述结果表明,AtNHX1基因的导入和表达在提高菊苣耐盐性的同时减轻了盐胁迫对植物细胞膜的伤害。 相似文献
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转基因技术对基因功能研究与农作物种质资源创新具有重要作用,在牧草类作物菊苣中相应的研究还处于初级阶段。本研究改进了菊苣组织培养与遗传转化方法,采用暗光培养的菊苣子叶为外植体,经农杆菌侵染后置于光照条件下进行共培养,利用子叶细胞从暗光转移到光照条件下细胞迅速分裂的特点,实现植物遗传转化。与已报道的转化方法(光照条件下的真叶外植体先进行2~3 d预培养,再进行农杆菌转化与共培养)相比,本方法出苗率与已报道方法相当,达90%以上;比不经预培养方法的出苗率要高80%~90%,能极大节省人力物力。同时本研究发现,在愈伤诱导、植物分化以及生根培养中,依次递减细胞分裂素的强度与浓度,能显著降低愈伤和再生苗的玻璃化程度,与一直采用强细胞分裂素相比,改进方法愈伤玻璃化比率下降约9%,再生苗玻璃化比例下降约16%。 相似文献
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Ta6-SFT基因对油菜的转化及抗旱性分析 总被引：1，自引：0，他引：1
为了研究Ta6-SFT对油菜抗旱的影响,进行了Ta6-SFT对油菜纯系材料的遗传转化,获得经PCR、Southern杂交和Northern 斑点杂交验证的转基因植株。对7株T1代转基因油菜进行了为期36 d的干旱胁迫,分析干旱胁迫36 d和复水后2 d各植株及野生型对照中的Ta6-SFT的转录水平表达和果聚糖含量,同时进行同时期丙二醛含量和相对电导率测定。结果表明,Ta6-SFT的转录水平表达与转基因植株体内的果聚糖含量、转基因植株的抗旱性呈正相关,表明Ta6-SFT在干旱胁迫下的表达增强了转基因植株的抗旱性。 相似文献
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氮元素是植物生长发育过程必不可少的营养元素之一,对禾本科作物生长的影响更加明显。本研究采用RACE技术从高羊茅叶片中克隆获得Fa14-3-3C基因全长,并对其亚细胞定位与分子功能进行系统研究。在烟草表皮细胞中观察发现Fa14-3-3C-GFP主要定位在细胞质中与细胞膜上。将Fa14-3-3C基因在拟南芥中过量表达获得3个单拷贝转基因株系(抗性分离比为3∶1)。在低氮胁迫反应中,Fa14-3-3C过量表达株系OE-1与OE-3的根鲜重显著比野生型高,而OE-2与野生型差异不显著,通过荧光定量PCR分析发现OE-1与OE-3过量表达明显而OE-2没有过量表达,说明Fa14-3-3C对植物耐低氮胁迫调节具有剂量效应。定量观察植物根系生长发现在低氮处理早期OE-1转基因株系就显著优于野生型,主要是通过补偿根系生长的方式缓解低氮胁迫对植物的伤害。因此本研究不仅获得了耐低氮胁迫候选基因,而且验证了其在模式植物中的分子功能,为进一步通过基因工程等手段培育耐低氮胁迫种质资源奠定基础,具有重要理论研究价值与生产应用前景。 相似文献
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SGR(stay green regulation)基因是植物体内叶绿素代谢的关键调控基因,在调控植物衰老进程中发挥着重要的作用。本研究利用从日本结缕草(Zoysia japonica)中分离的ZjSGR基因,通过农杆菌介导的方法,完成对匍匐剪股颖(Agrostis stolonifera)的转基因操作。经过诱导、分化、生根、炼苗及土培过程,最终获得了19株再生匍匐剪股颖植株。PCR方法检测证实:其中15株再生匍匐剪股颖植物为转化阳性;RT-PCR分析表明:15株转基因匍匐剪股颖能够转录表达ZjSGR基因;利用荧光定量RT-PCR技术筛选ZjSGR基因高水平表达的转基因植株,结果显示:10号、13号、15号表达水平最高。选择这3株表达水平最高的转基因植株,进行生理生化分析,结果显示:转基因匍匐剪股颖叶绿素含量明显降低,净光合速率显著下降,可溶性糖及丙二醛含量与野生型植株相比有所提高。以上结果表明,ZjSGR基因在匍匐剪股颖中过量表达,能够通过促进叶绿素的降解加速植物的衰老。 相似文献
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植物高亲和性K+转运蛋白基因（HKT）编码K+、Na+转运或K+-Na+共转运质膜通道蛋白,在植物抗逆过程中发挥重要作用。为了研究长穗偃麦草EeHKT1;4（GenBank： KF956112.1）的功能作用,构建了EeHKT1;4过表达植物表达载体转化拟南芥,进行拟南芥转基因植株的抗旱耐盐性评价分析。结果显示,正常生长条件下野生型（WT）与转基因株系的主根长度无差异,NaCl与甘露醇处理下WT和转基因株系根的生长受到抑制,转基因株系根长度均大于同等胁迫条件下（WT）的根长;正常生长条件下WT与转基因株系表型无显著差异,但在NaCl与甘露醇处理下WT表现出叶片萎缩和植株枯黄,转基因株系仅部分植株表现出叶片萎缩,同一胁迫条件下转基因株系的植株存活率皆高于WT。硝基氮蓝四唑（NBT）与二氨基联苯胺（DAB）染色结果显示,正常生长条件下WT与转基因株系叶片染色相对较浅,随着NaCl与甘露醇浓度提高,所有叶片染色程度逐渐加深且同等胁迫下WT染色程度高于转基因株系。以正常生长条件下基因的表达量为对照,随着NaCl浓度的增加,AtSOS1基因在WT和转基因植株中逐渐上调且在转基因中的表达量高于WT;AtNHX1基因在NaCl处理下上调表达且转基因植株中表达量低于WT,除转基因株系L5外并未检测到WT和转基因株系自身因NaCl浓度的提高AtNHX1基因表达量发生改变;在甘露醇处理下,AtRD29B和AtP5CS1基因均上调表达且转基因植株中表达量高于WT。综上所述,EeHKT1;4过表达降低了逆境胁迫下拟南芥中超氧阴离子和H2O2的积累,诱导抗逆基因上调表达,增强拟南芥抗旱耐盐性。 相似文献
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Dietary fiber, resistant to host-mediated digestion in the small intestine due to lack of endogenous enzymes, impacts many facets of animal health and is associated with gut development especially in young monogastrics. Furthermore, it can be used as in-feed antibiotic alternative. Chicory （Cichorium intybus L.） forage with high content of pectin （uronic acids as building blocks） is a novel class of dietary fiber that is chemically different from cereal grains （with high content of arabinoxylans）. In the present study, we investigated effects of dietary inclusion of chicory forage on digestibility, gut morphology and microbiota in broilers and young pigs. In the chicken experiment, 160 1-d old broiler chicks were fed 3 nutritionally balanced diets for 30 d including a cereal-based diet and 2 diets with part of the cereals substituted with 60 and 120 g/k9 chicory forage （CF60 and CF120], whereas in the pig experiment, 18 seven-wk old Yorkshire pigs were fed 3 diets for 18 d including a cereal-based diet and 2 diets with 80 and 160 g/kg chicory forage inclusion （CF80 and CF160）. Our results showed that young pigs were capable to utilize chicory forage well with higher total tract apparent digestibility （TTAD） of all fiber fractions, particularly uronic acid, compared with the control （P 〈 0.01）. In contrast, a decreased TTAD of all fiber fractions was observed in chickens fed on diet CF120 （P 〈 0.05）. Moreover, diet induced changes in gut morphology were observed in the large intestine of chickens. The alteration of cecal mucosal thickness was further positively correlated with TTAD of non-starch polysaccharides （NSP） and its constituent sugars （P 〈 0.05）. In addition, in pigs, terminal restriction fragment length polymorphism （T-RFLP） analysis of intestinal microbiota revealed substantial dietary effects （cereal control diet vs. chicory forage inclusion） on the relative abundance of 2 dominant bacterial phylotypes （Prevotella sp. vs. Roseburia sp.） respective 相似文献
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引进丹麦丹农公司6个菊苣品种,在重庆近郊区进行品种评比和栽培技术研究。结果表明,6个品种生长良 好,从秋季到第二年春季年可刈割8次,鲜草产量可达155-192t/hm2;表现出不是多年生特性,而是越年生特性;播期 选在6月份,播后用遮阳网覆盖。 相似文献
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依据贵州省松桃县的气候特点和牧草种植需要,用黔育1号菊苣与北林202紫花苜蓿、黔草4号鸭茅分别进行间作试验,从产量、营养品质、生产效益等方面对间作复合群体与3种牧草单播进行比较分析,探讨黔育1号菊苣与不同牧草间作种植模式的增产效益。结果表明,在贵州松桃地区,黔育1号菊苣+北林202紫花苜蓿间作,年均鲜草产量可达87.27 t/hm2,比紫花苜蓿单播产量增加36.17%,生产效益提高20.77%,粗蛋白含量达26.83%。该研究结果可为松桃县种草养畜产业的发展提供技术支撑。 相似文献
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G. A. Chapman E. W. Bork N. T. Donkor R. J. Hudson 《Journal of animal physiology and animal nutrition》2009,93(6):794-801
Little information exists on the performance of deer on alternative forage species in northern temperate environments during summer and fall, the period of inherent maximum growth in deer. In performance and choice experiments, we compared live weight gain (g/kg0.75/day), absolute [kg/ha dry matter (DM)] and relative (% DM) herbage utilization, relative preference index (RPI) as well as plant community visitation of white‐tailed deer grazing alfalfa (Medicago sativa), birdsfoot trefoil (Lotus corniculatus) or chicory (Cichorium intybus) in north central Alberta, Canada. Herbage phytomass and quality was also measured on the grazed pastures. Alfalfa had higher dry matter yields and crude protein concentrations than chicory and trefoil. Chicory had lower neutral detergent fiber concentrations than the other forages. Tannin concentrations were greatest in birds foot trefoil (nearly 55 g/kg DM), well above those in the other forages (<5 g/kg DM). Live weight gain was similar among deer feeding within the paddocks seeded to birds foot trefoil and chicory, and more than two times higher (p < 0.05) than deer feeding in paddocks seeded to alfalfa. Deer spent more grazing time (about 40%) on chicory pastures than on alfalfa and birds foot trefoil pastures. RPI values were greatest for birds foot trefoil at 2.11, intermediate for chicory at 1.40, and lowest for alfalfa at <0.60. Absolute herbage utilization remained similar (p > 0.05) among the three forage species. In contrast, relative herbage utilization was greater from birds foot trefoil (52% DM) than chicory (40% DM) or alfalfa (25% DM). These results suggest that the use of alfalfa with other alternative forages may prove beneficial to deer production, rather than using alfalfa pasture alone. 相似文献
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通过植物基因工程手段培育转基因作物品种,可改善作物的生存能力和对生态环境的耐受力。本研究以普那菊苣叶片(Cichorium intybus L.‘Puna’)为受体材料,用农杆菌介导方法,将来自水稻的由CaMV35S启动子驱动的生育酚环化酶(tocopherol cyclase,OsVTE)基因导入普那菊苣。经过卡那霉素(Km)筛选以及对抗性植株PCR和Southern杂交分析,获得了转基因植株。用不同浓度的蔗糖、琼脂和甘露醇溶液研究普那菊苣幼苗的耐旱性,发现转基因植株的耐旱性明显得到提高。蔗糖浓度为50g·L~(-1)、琼脂浓度为10g·L~(-1)和甘露醇浓度为30g·L~(-1)胁迫下普那菊苣的生理指标测定显示,转基因普那菊苣幼苗SOD、POD活性比未转化植株高2~3倍,转基因普那菊苣幼苗MDA含量降低。本研究获得了稳定的转OsVTE基因植株,旱胁迫下的转基因植株的SOD酶活性和POD酶活性含量提高,表现出一定的耐旱性。 相似文献
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菊苣(Cichorium intybus L.)是一种多年生、药食同源的植物,既可作为蔬菜种植,也可作为优质牧草推广应用。本研究对‘将军’(K042)这一具有较高饲用价值的菊苣牧草品种展开物种鉴定、染色体计数、基因组大小估算、调查测序及初步组装研究。系统进化分析表明,K042跟生菜的亲缘关系较近。染色体计数结果显示,K042体细胞有18条染色体(2n=18);流式细胞术实验结果显示,K042的基因组大小约为1 170.00 Mb;二代Illumina HiSeq测序分析进一步估算K042基因组大小约为1 424.00 Mb。K042基因组的杂合率为1.12%,重复序列含量为73.56%。K042基因组具有高重复、高杂合的复杂特征。根据基因组测序结果对K042展开基因组组装工作,组装后基因组大小为823.36 Mb,重叠群N50长度约为1.03 kb,本研究结果可为将来菊苣分子生物学和遗传育种研究提供重要的基因组学基础参考数据。 相似文献