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高温中性蛋白酶基因的克隆及毕赤酵母表达研究 总被引：1，自引：0，他引：1
对地衣芽孢杆菌XJT9503高温中性蛋白酶进行了克隆,并在毕赤酵母中进行了表达.以高温中性蛋白酶产生菌地衣芽孢杆菌XJT9503基因组DNA为模板,通过PCR扩增,获得高温中性蛋白酶(Tnp)基因的特异性片段,大小约为1 kb.通过EcoRI、NotI 双酶切后,将该基因连入毕赤表达载体pPIC9K,并整合到毕赤酵母SMD1168基因组中,构建的基因工程菌,进行甲醇诱导表达.结果表明,基因工程菌发酵72 h,有最大酶活,为19 U/mL;酶的最适作用温度为65℃,与原始酶的最适作用温度相符.证明研究成功克隆了高温中性蛋白酶基因,并在毕赤酵母中正确表达. 相似文献
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[目的]为四环素菌渣的处理及资源化利用提供依据。[方法]分别以不同比例四环素菌渣和麸皮为培养基,利用黑曲霉、康宁木霉和绿色木霉协同发酵处理四环素菌渣,在生产复合酶制剂的同时降解菌渣中残留的抗生素。[结果]在四环素菌渣∶麸皮=7∶3,培养基水分50%,厚度10 cm,培养温度2530℃条件下好氧发酵96 h,可得到富含纤维素酶、木聚糖酶、β-葡萄糖酶和酸性蛋白酶的复合酶制剂,且菌渣中残留四环素的降解率可达97.3%。[结论]该研究确定了四环素菌渣中残留抗生素的最佳降解条件。 更多还原 相似文献
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饲用酶制剂中酸性蛋白酶的酶学性质测定方法 总被引：2，自引：0，他引：2
酸性蛋白酶是饲用复合酶制剂中的主要酶种之一,本文对某商品酶制剂中的酸性蛋白酶进行了酶学性质的研究,这对于酸性蛋白酶的酶活测定、保存及应用均具有一定的指导意义。实验表明:该酸性蛋白酶的热稳定性良好,最适反应温度为50℃,Km值为1.77mg/mL,Cu2 、Mg2 、Mn2 、Zn2 、Fe3 对本酸性蛋白酶有抑制作用,而Na 、K 及(NH4)2SO4能提高此酸性蛋白酶的活性。 相似文献
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[目的]研究不同酶制剂及其组合对白肋烟叶中蛋白质的降解作用。[方法]在烟丝中添加不同种类及不同配比的酶制剂,利用醋酸抽提法测定烟叶中的蛋白质含量。[结果]3种酶的最佳添加量为：中性蛋白酶160 U/g,内切蛋白酶120 U/g,纤维素酶80 U/g。在45℃,25%水分,4 h条件下用上述混合酶降解白肋烟中蛋白质的效果最好。处理过的烟丝香气变好,杂气减轻,刺激性减小,余味干净,尤其对白肋烟中的苦味和辛辣味的消除有明显的效果。[结论]利用中性蛋白酶、内切蛋白酶、纤维素酶3种酶的最佳比例搭配出的复合酶制剂可以有效降低白肋烟中的蛋白质含量,为提高白肋烟的品质和安全性提供了有效的方法。 相似文献
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以碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合水解核桃蛋白制备抗氧化活性多肽的工艺条件优化为对象,通过研究酶解时间、酶解温度、酶与底物浓度比及复合酶比例对核桃蛋白酶解物清除DPPH·能力的影响,并利用正交试验优化工艺条件,以提高核桃蛋白多肽对DPPH·的清除率。结果表明,酶解时间、酶解温度、酶与底物浓度比及复合酶比例对核桃蛋白酶解物清除DPPH·能力有一定影响;当木瓜蛋白酶与碱性蛋白酶复合酶解温度为45℃、时间1.5h、酶与底物浓度1500U/g、pH值7.0、复合酶比例为2∶1时,酶解物清除DPPH·的能力最强,清除率达78.7%。 相似文献
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采用基因克隆方法获得酸性蛋白酶基因,在毕赤酵母KM71表达系统中进行表达,并将重组酵母酸性蛋白酶rPrA经过浓缩后研究其酶学性质,初步探究了rPrA对大豆蛋白和酪蛋白的水解情况.结果表明:经过异源表达后的重组毕赤酵母酸性蛋白酶分子量约为44 ku,在pH3.0的发酵条件下酶活最高,可达46.92U/mL.该酸性蛋白酶的最适pH值为3.0,最适温度为35℃.Mn2+对该酶活性有激活作用,多种金属离子对该酶有抑制作用;0.1 mmol/L的Pepstain A即可完全抑制酶活,说明此重组酶的活性中心有天冬氨酸残基.对大豆蛋白和酪蛋白的初步水解试验可知,当E/S为4 000 U/g时,此重组酶对大豆分离蛋白和酪蛋白的水解度分别为9.0％和8.34％.优化发酵条件以及与多种蛋白酶进行复配,该重组蛋白酶将在蛋白水解中有很好的应用前景,有望应用到畜禽饲料加工行业. 相似文献
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复合酶解法制备酵母抽提物的应用研究 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]为生产高辅料比啤酒确定最佳的酶制剂种类及酶解工艺。[方法]比较13种酶制剂在制备酵母抽提物中的酶解情况,选择并确定最佳的酶制剂种类及酶解工艺。[结果]在4种碱性蛋白酶中,碱性蛋白酶A的d一氨基氮得率最高。碱性蛋白酶A和风味蛋白酶的复合酶解试验表明,风味蛋白酶A的酶解情况优于风味蛋白酶B。β-葡聚糖酶和木瓜蛋白酶对α-氨基氮的得毫影响不大。酵母抽提酶的α-氨基氮得率高于干酵母酶A和B的共同酶解得率。当料水比为1：4时,滤液中α-氨基氮含量为900mg／L左右。100kg干燥酵母粉在酶解至α-氨基氮含量为4000mg／L时,可得浓度为10°P的醪液700L,即α-氨基氮的得率为1：7。[结论]应用蛋白酶复合酶解制备酵母抽提物具有收率高、时间短、设备简单、操作方便、成本低的优点,在高辅料比啤酒的生产中应用较为可行。 相似文献
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[目的]研究在复合酶制剂的作用下普洱茶渥堆过程中部分理化成分的变化及对普洱茶品质的影响。[方法]在实验室模拟普洱茶渥堆发酵过程,通过不同浓度复合酶制剂的作用,分析研究渥堆过程中各阶段普洱茶中干物质率、水浸出物、茶多酚、可溶性糖、黄酮等理化成分的变化。[结果]试验得出,联合应用多酚氧化酶、多糖水解酶类(纤维素酶、果胶酶、β-糖苷酶、淀粉酶)、单宁酶、蛋白酶等制成的复合酶制剂,在一定浓度下有利于普洱茶中水浸出物、茶多酚、可溶性糖的增加,有助于普洱茶品质的形成,并可缩短渥堆发酵时间。[结论]复合酶制剂应用于普洱茶渥堆发酵过程,可以简化工艺,缩短加工时间。 相似文献
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干酪乳杆菌干酪亚种Lactobacillus casei subsp.casei SY13对衰老模型小鼠的抗氧化作用 总被引：1，自引：1，他引：0
【目的】利用一株经体外筛选具有较强抗氧化活性的干酪乳杆菌干酪亚种(Lactobacillus casei subsp.casei)SY13活菌制剂和灭活制剂研究D-半乳糖所致衰老模型小鼠体内抗氧化能力。【方法】 采用SY13活菌制剂和灭活制剂饲喂由D-半乳糖连续皮下注射诱导的亚急性衰老模型小鼠,以各组小鼠血清和肝组织匀浆中超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力、总抗氧化能力(T-AOC)及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量为指标,全面评价其在小鼠体内的抗氧化能力。【结果】 Lactobacillus casei subsp. casei SY13活菌制剂高、中剂量组(20、10 mL•kg-1)能降低连续6周注射D-半乳糖诱发的衰老小鼠血清和肝脏组织中的MDA含量,同时提高血清和肝脏组织中GSH-Px活力以及总抗氧化能力(T-AOC),SOD活力变化不明显。【结论】 SY13活菌制剂能有效提高亚急性衰老小鼠的抗氧化能力,具有一定延缓衰老的作用。 相似文献