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南方菜豆花叶病毒（ＳＢＭＶ）主要有２株系：菜豆株系（ＳＢＭＶ－Ｂ）和豇豆株系（ＳＢＭＶ－Ｃ）,血清学方法不能予以区分。根据已报道的核酸序列设计了２对特异引物,进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增并克隆到载体Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ中,序列测定予以证实后利用随机引物法合成放射性ｃＤＮＡ探针,再进行体外转译合成地高辛ＵＴＰ标记的ＲＮＡ探针。２种探针均可分别特异地检测Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ膜上的ＳＢＭＶ－Ｂ和ＳＢＭＶ－Ｃ。ＲＮＡ探针检测ＳＢＭＶ－Ｂ和ＳＢＭＶ－Ｃ灵敏度分别为：０．１μｇ和０．０１μｇ。 相似文献
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本文报道应用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测烟草环斑病毒（ＴＲＳＶ）的。根据ＴＲＳＶＲＮＡ－２序列３末端非编码区设计，合成引物－１和引物－２；用ＴＲＳＶＲＮＡ作模板，引物－２作引物，反转录合成ｃＤＮＡ，并以此作模板进行ＰＣＲ扩增，５－６小时内可得到结果，检测粗提液中ＲＮＡ灵敏度达４００ｐｇ，并且可以直接从受侵染的叶片汁液中检出ＴＲＳＶ，为口岸快速检测疫推出一个更灵敏、准确的分子生物学新方法。值得推广应用。 相似文献
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贵州烟仓昆虫天敌初步观察 总被引：3，自引：1，他引：3
贵州烟仓昆虫天敌初步观察①高念昭（贵州农学院植保系，贵阳５５００２５）ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＯＢＳＥＲＶＡＴＩＯＮＳＯＦＮＡＴＵＲＡＬＥＮＥＭＩＥＳＯＮＳＴＯＲＥＤＴＯＢＡＣＣＯＩＮＳＥＣＴＰＥＳＴＳＩＮＧＵＩＺＨＯＵＧＡＯＮｉａｎ－ｚｈａｏ（Ｄｅｐ... 相似文献
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用从猪传染性胃炎病毒（ＴＧＥＶ）强毒Ｍｉｌｌｅｒ株（Ｍ５Ｃ）克隆建立的一株的重组杆状病毒（Ｒ２－２）表达的重组ＴＧＥＶ钉状糖蛋白（Ｓｐｉｋｅ，Ｓ）建立了一种阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来检测猪群中抗ＴＧＥＶ抗体。实验表明，用重组病毒Ｒ２－２接种昆虫传代细胞系Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（ｓｆ９），所表达的重组蛋白量在接种后第７２小明达到最高值；该重组蛋白能与抗ＴＧＥＶ Ｓ蛋白Ａ 相似文献
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几株真菌代谢产物对小菜蛾和菜青虫的杀虫效果 总被引：6，自引：0，他引：6
几株真菌代谢产物对小菜蛾和菜青虫的杀虫效果①姚丽娟（浙江省科学院亚热带作物研究所，温州３２５００５）ＩＮＳＥＣＴＩＣＩＤＡＬＥＦＦＩＣＡＣＹＯＦＳＥＶＥＲＡＬＳＴＲＡＩＮＳＯＦＦＵＮＧＡＬＭＥＴＡＢＯＬＩＴＥＴＯＤＩＡＭＯＮＤＢＡＣＫＭＯＴＨＡＮＤＣ... 相似文献
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利用同源菌株融合改良农抗５１０２产生菌——吸水链霉菌应城变种的研究ＳＴＲＡＩＮＩＭＰＲＯＶＥＭＥＮＴＯＦＡＮＴＩＢＩＯＴＩＣ５１０２ＰＲＯＤＵＣＩＮＧＳＴＲＥＰＴＯＭＹＣＥＳＨＹＧＲＯＳＣＯＰＩＣＵＳＶＡＲ．ＹＩＮＧＣＨＥＮＧＥＮＳＩＳＢＹＰＲＯＴＯ... 相似文献
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中华卵索线虫感染棉铃虫试验陈果（中国农业科学院生物防治研究所，北京１０００８１）ＩＮＦＥＣＴＩＮＧＴＲＩＡＬＳＯＦＯＶＯＭＥＲＭＩＳＳＩＮＥＮＳＩＳＴＯＣＯＴＴＯＮＢＯＬＬＷＯＲＭＣＨＥＮＧｕｏ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｌｏｏｉｃａｌＣｏｎｔｒｏ... 相似文献
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进境豇豆种子携带种传病毒的检测与鉴定 总被引：2，自引：0，他引：2
Imported cowpea seeds were detected with growing test, ELISA assay and RT-PCR method. The ELISA results showed that cowpea seedlings with symptoms reacted positively with antibody against Southern bean mosaic virus (SBMV). The 979 bp of fragment could be amplified from two positive ELISA samples using primers specific for Southern cowpea mosaic virus (SCPMV), and the sequence determination results proved that the pathogen existing in imported cowpea seeds was SCPMV. The positive ELISA results with SBMV antibody could be further confirmed by RT-PCR amplification with specific primers designed to amplify the coat protein gene and 3' noncoding region of SCPMV and SBMV. The RT-PCR method presented here was suitable for molecular identification of SBMV and SCPMV in entry-exit plant quarantine laboratories. 相似文献
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南方菜豆花叶病毒(Southern bean mosaic virus,SBMV)是我国二类检疫性有害生物,以南方菜豆花叶病毒日本分离物(SBMV-J)总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增病毒外壳蛋白基因及其上游基因的cDNA片断并将其克隆到pMD18-T载体上。序列分析结果表明:SBMV-J cp基因由801个核苷酸组成,编码266个氨基酸,SBMV-J与其它分离物及株系cp基因的核苷酸序列同源性为83%～97%,氨基酸序列同源性为86%～97%。由于SBMV各分离物及株系cp基因的同源性较低,难于设计出较长的普通PCR引物。通过较短引物设计和TaqMan-MGB探针技术,建立了SBMV的实时荧光RT-PCR一步检测方法。该方法的检测低限是0．16 pg,最佳检测总RNA的量是0．16 ng。 相似文献
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南方菜豆花叶病毒（Southem bean mosaic virus，SBMV）是我国二类检疫性有害生物，以南方菜豆花叶病毒日本分离物（SBMV-J）总RNA为模板，采用RT-PCR方法扩增病毒外壳蛋白基因及其上游基因的cDNA片断并将其克隆到pMD18．T载体上。序列分析结果表明：SBMV-J cp基因由801个核苷酸组成，编码266个氨基酸，SBMV．J与其它分离物及株系印基因的核苷酸序列同源性为83％-97％，氨基酸序列同源性为86％-97％。由于SBMV各分离物及株系印基因的同源性较低，难于设计出较长的普通PCR引物。通过较短引物设计和TaqMan-MGB探针技术，建立了SBMV的实时荧光RT-PCR一步检测方法。该方法的检测低限是0．16pg，最佳检测总RNA的量是0．16ng。 相似文献
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为建立南方菜豆花叶病毒(southern bean mosaic virus,SBMV)的快速、简便、高通量检测技术,加强该病毒的口岸检验检疫,以提纯的SBMV粒子为免疫原免疫BALB/C小鼠,利用杂交瘤技术获得3株杂交瘤细胞株19C3、19H9和20G4,其分泌的SBMV腹水单抗效价均达到10-7,且3个单抗与感染SBMV大豆叶片组织粗提液有强烈的特异性免疫反应,而不与感染南方豇豆花叶病毒(southern cowpea mosaic virus,SCPMV)的豇豆、健康的大豆、毛豆、豌豆、蚕豆和菜豆叶片组织粗提液发生免疫反应。以制备的单抗为核心,建立了检测植物中SBMV的ACP-ELISA和dotELISA两种血清学方法。3个单抗中19H9单抗的检测灵敏度最高,以其建立的ACP-ELISA和dot-ELISA方法检测大豆病叶粗提液的灵敏度分别达到1∶163 840和1∶10 240稀释浓度。利用建立的dot-ELISA方法可从上海口岸截获的大豆种子中检测出SBMV,且该检测结果得到RT-PCR方法验证。表明制备的SBMV单抗及建立的SBMV血清学检测技术可有效用于我国SBMV的口岸检验检疫。 相似文献
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逆转录环介导等温扩增技术检测南方菜豆花叶病毒 总被引：3，自引：0，他引：3
根据南方菜豆花叶病毒外壳蛋白基因序列设计并合成了4组RT-LAMP引物,通过引物筛选试验,确定SB1组引物为最佳引物,并进行了引物特异性与灵敏度检测试验,最终建立了南方菜豆花叶病毒的RT-LAMP检测方法。灵敏度检测试验显示,RT-LAMP方法比普通RT-PCR法灵敏度高10倍,而检测时间明显缩短,整个反应过程只需40 min。此外,体系中加入钙黄绿素,反应结束后,可裸眼观察颜色变化来判定结果。本研究所建立的SBMV RT-LAMP方法具有快速、稳定、灵敏、特异、操作简单的特点,适合于SBMV的现场快速检测。 相似文献
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Eduardo Segundo María P. Carmona Elisa Sáez Leonardo Velasco Germán Martín Leticia Ruiz Dirk Janssen Isabel M. Cuadrado 《European journal of plant pathology / European Foundation for Plant Pathology》2008,122(4):579-591
A study was conducted to determine the identity and prevalence of viruses in 455 greenhouses in the main Spanish green bean
growing area. Directed surveys were conducted in 422 crops from 2000–2004 to collect samples from diseased plants displaying
symptoms that could be attributed to viruses. The samples were analysed to detect any virus by means of dsRNA extraction,
mechanical inoculation to test plants, as well as ELISA and/or RT-PCR tests to detect potyviruses, geminiviruses and viruses
previously known to infect beans in Spain. Random surveys were conducted in the years 2002 and 2005 (in 21 and 12 greenhouses,
respectively) to study the actual incidence of known viruses in the area. Symptoms were recorded in 23,108 plants from which
664 plants were collected and analysed by ELISA or RT-PCR. The results of the directed surveys showed that all the analyzed
crops carried the cryptic virus Phaseolus vulgaris endornavirus (PVuV), whereas phytopathogenic viruses appeared in smaller percentages of the crops: Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) 20.4%, Southern bean mosaic virus (SBMV) 9.0%, Tomato spotted wilt virus (TSWV) 4.0%, and the new species Bean yellow disorder virus (BnYDV) that broke out in 2004 with occurrence values higher than 34.3% that year. From 2000–2004 an important decrease in
TYLCV was observed, along with a slight increase in SBMV and a consistently low occurrence of TSWV. The results of the random
surveys confirmed the increased occurrence of virus detected during the directed surveys, and furthermore demonstrated the
percentage of incidence for each virus. 相似文献
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J.Th.J. Verhoeven J.W. Roenhorst D.-E. Lesemann E. Segundo L. Velasco L. Ruiz D. Janssen I.M. Cuadrado 《European journal of plant pathology / European Foundation for Plant Pathology》2003,109(9):935-941
Southern bean mosaic virus (SBMV) has been identified as the cause of a new disease in greenhouse-cultivated common bean (Phaseolus vulgaris), in the south-east of Spain. The identification was based on host range comparisons, morphological and serological characteristics of the virus, the size of its dsRNA species and the nucleotide sequence of an 810-bp fragment from ORF2. The virus could be clearly discriminated from the related sobemovirus Southern cowpea mosaic virus. This is the first report of SBMV in Spain. 相似文献
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进境大豆携带的病毒主要有菜豆荚斑驳病毒(BPMV)、烟草环斑病毒(TRSV)、烟草条纹病毒(TSV)和南方菜豆花叶病毒(SBMV)等,均为大豆种传病毒,可随大豆种子实现远距离传播。本研究对这4种大豆病毒的外壳蛋白基因部分序列设计引物,并通过优化引物、模板浓度和扩增参数,在一个体系中成功对4种病毒进行了多重RT-PCR扩增,得到307bp、206bp7、17bp5、18bp共4条特异性条带,建立了能同时检测BPMV、TRSV、TSV和SBMV的多重RT-PCR检测体系。该方法快速、灵敏、简便,同时特异性强,在出入境检疫中具有广泛的应用前景。 相似文献
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香石竹斑驳病毒的鉴定和RT-PCR检测 总被引：7，自引：0，他引：7
从表现为叶斑驳、花碎色症状的香石竹病株上获得一病毒分离物 ,电镜负染观察到直径为28～33nm的球状粒子。病毒提取液经紫外光测定呈典型核蛋白吸收曲线 ,OD260/OD280=1.70;血清学反应与CarMV抗血清出现明显的沉淀线。通过以上实验结果 ,确定该病毒分离物为香石竹斑驳病毒(carnation mottle virus ,CarMV)。根据该病毒的RNA序列设计引物 ,对病健材料进行了RT-PCR检测 ,结果从感病材料中扩增出大约600bp的特异片段 ,而健康植物无此扩增带。将PCR产物连接 pGEM-T-easy载体 ,转化大肠杆菌JM109,得到了含目的片段的重组子 ,经双脱氧序列分析 ,与Guilley报道的序列对应部分的核苷酸序列基本一致 (其同源性达96% ) ,最低检出病毒核酸含量为5ng ,表明应用RT-PCR检测香石竹斑驳病毒是可行的 相似文献