辣椒抗疫病研究中的RAPD反应体系优化     

胡勇胜  毛胜利  刘明月  张宝玺 《辣椒杂志》2007,5(1):5-8

以高抗疫病的perenial、高感疫病的83-60,及perenial×83-60的F2代辣椒苗为材料,采用CTAB法提取辣椒基因组DNA,研究RAPD-PCR反应的相关影响因子,建立并优化了一组适合辣椒抗疫病研究的RAPD-PCR反应体系和程序。  相似文献   

应用正交设计优化江南牡丹RAPD-PCR反应体系     

范庆君  吕慧  范义荣  郑彦伟 《北方园艺》2011,(5):185-187

以牡丹品种"云芳"基因组DNA为模板,采用正交实验设计L25(55)对影响牡丹RAPD-PCR反应的5因素(模板DNA、引物、Mg2+、dNTPs、Taq酶)在5个水平上进行优化试验。结果表明:最佳的RAPD-PCR的反应体系为:20μL体系中含有25 ng的模板DNA,0.2μmol/L的引物,Mg2+1.0 mmol/L,1×buffer反应缓冲液,DNTPs各为0.2 mmol/L,1.0 U的TaqDNA聚合酶。  相似文献   

正交试验设计在建立杜鹃花RAPD-PCR反应体系中的应用   总被引：9，自引：2，他引：7  

张丽  周兰英  肖千文  吴开志 《北方园艺》2007,(5):124-126

利用正交试验对影响RAPD-PCR反应体系的各种因素进行研究,从而建立适合杜鹃花RAPD反应的最佳反应体系,最终选择杜鹃基因组RAPD-PCR的最佳扩增反应体系,即模板DNA 80ng、随机引物0.5μmol/L、dNTPs 1.1mmol/L、MgCl2 2.5mmol/L,1.2μmol/LTag-DNA聚合酶,buffer 2μL,总反应体系20μL.试验设计的6个因子、5个水平中,Mg2 、dNTPs和引物的浓度是主要因子,其中Mg2 的浓度对试验的影响最大,dNTPs和引物浓度在较低的水平就可满足需要,高浓度并没有显著提高试验效果.  相似文献   

辣椒AFLP反应体系的优化与建立   总被引：3，自引：0，他引：3  

徐明磊  詹玉丝  陈晓  樊红杰 《辣椒杂志》2008,(3):34-37

以5个辣椒（Clapsjcum annuum L.）材料为研究对象,对AFIJP反应体系中的DNA用量、酶切连接时间、预扩增产物的稀释倍数等关键因素进行优化分析,建立了适宜辣椒作物的AFLP反应体系。研究结果：酶切连接反应中,基因组DNA适宜用量为100ng,反应时间是6h最为合适,预扩增产物适宜稀释倍数在30-50倍时较为理想。  相似文献   

利用RAPD技术快速鉴定辣椒杂交种纯度的研究     

葛菊芬  张鲁刚  程智慧  颜彤  欧阳炜  刘雁彬  努尔亚 《辣椒杂志》2010,(4):29-32

以新椒系列辣椒杂交种父母本和一代杂种为材料,采用液氮-SDS法提取辣椒基因组DNA,研究PCR反应的主要影响因子,建立适合辣椒杂交种纯度RAPD分析的PCR反应体系,从120个随机引物中筛选出1个能鉴定新椒10号杂种纯度的引物S1220,从7个随机引物中筛选出1个能鉴定新椒3号杂种纯度的引物S1213。  相似文献   

辣椒RAPD反应体系建立及杂交种纯度鉴定研究   总被引：1，自引：1，他引：1  

詹玉丝  陈晓  齐卫强  陈占宽  郅玉宝  杨春英  刘建民  郭善辉 《辣椒杂志》2004,(4):32-35

以豫椒系列品种父母本和杂交种为材料，采用液氮-SDS法提取辣椒基因组DNA，使用Bio-RAD-Mycy-cler型PCR仪和Bio-RAD1000凝胶扫描仪，研究PCR反应的主要影响因子，建立适合辣椒RAPD分析的PCR反应体系，从40个10bp的随机引物中筛选出1个能鉴定豫椒968杂种纯度的引物S149。  相似文献   

正交设计优化辣椒SRAP-PCR反应体系及引物筛选     

《中国园艺文摘》2011,27(10):197-198

以辣椒基因组DNA为模板,采用L15（4^5）正交试验设计,对SRAP反应体系中的5种关键因素（TaqDNA聚合酶、Mg^2＋、dNTPs、引物、模板DNA）进行优化,结果表明,  相似文献   

温郁金RAPD-PCR反应体系建立及条件优化   总被引：1，自引：0，他引：1  

王晓慧  汤晓闯  杨恩秀  姜程曦  李敏  李校堃 《北方园艺》2008,(4):226-229

在提取纯化温郁金DNA的基础上,利用PCR扩增技术,对Mg2 、dNTP、模板DTA、引物、Taq聚合酶等反应条件进行优化,建立温郁金基因组DNA的RAPD-PCR最佳反应体系.结果表明:最佳条件是总体积为25μL,其中Mg2 (25mM)2μL,Taq 聚合酶(5 U/μL)0.3μL,引物浓度(20μM)1.0μL,模板DNA(5 ng/μL)1.0μL,dNTP(2.5 mM)2.0μL,10×PCRbuffer 2.5μL;PCR扩增程序为94℃预变性5min;94℃变性35 s,36℃退火1min,72℃复性1.5 min,共42个循环;最后72℃延伸10 min,该研究得出的体系是温郁金RAPD-PCR的最适宜反应体系,具有省时、经济、简便以及扩增条带较清晰、稳定等特点,为今后温郁金的遗传多样性研究奠定了基础.  相似文献   

均匀设计法优化彩色马蹄莲品种的RAPD-PCR反应体系     

陆波  郑玉红  彭峰  束晓春  陈晓萱 《北方园艺》2012,(11):123-126

以7个彩色马蹄莲品种为研究对象,以品种Prafait DNA为模板,采用均匀设计法对影响彩色马蹄莲RAPD-PCR反应的4因素(模板DNA浓度、引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度)在3个水平上进行U12(34)优化试验。结果表明:最佳的彩色马蹄莲RAPD-PCR的反应体系为:20μL体系中含有25ng的模板DNA,0.125mmol/L dNTPs,1.5mmol/L Mg2+,1×buffer反应缓冲液,0.55mmol/L引物,1.0U的Taq DNA聚合酶。  相似文献   

空间诱变辣椒AFLP反应体系的优化     

周春阳  郭亚华  谢立波  王雪  高永利  周宇  黄凤兰  彭木 《北方园艺》2011,(21):103-105

为了建立适合空间诱变辣椒的AFLP反应体系,以3～4叶期的辣椒叶片为试材,对体系中的DNA用量、酶切与连接、预扩增及产物的稀释倍数等关键因素进行了优化,确立了适合空间诱变辣椒的AFLP反应体系.结果表明:采用该体系对空间诱变辣椒进行AFLP分析,能够得到清晰稳定的分子标记图谱.  相似文献