共查询到20条相似文献，搜索用时 203 毫秒
1.
提取植物和微生物DNA的SDS—CTAB改进法 总被引：7，自引：1，他引：7
该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总ＤＮＡ的方法，该法是对提取真菌ＤＮＡ的ＳＤＳ－ＣＴＡＢ法进行改进而成，经过修改后的ＳＤＳ－ＣＴＡＢ法可在数小时内高效地提取细胞总ＤＮＡ。制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于２０ｋｂ的ＤＮＡ主带，基本无ＤＮＡ碎带；不用ＲＮａｓｅ处理，就已经无ＲＮＡ的干扰。ＯＤ２６０／２８０值显示产物纯度较高，无需任何纯化处理即可以用于ＰＣＲ扩增和ＲＡＰＤ分析。 相似文献
2.
提取植物和微生物DNA的SDS-CTAB改进法 总被引：40，自引：1，他引：40
该文介绍了一种简便快速地提取植物和微生物细胞总ＤＮＡ的方法，该法是对提取真菌ＤＮＡ的ＳＤＳ ＣＴＡＢ法进行改进而成，经过修改后的ＳＤＳ ＣＴＡＢ法可在数小时内高效地提取细胞总ＤＮＡ．制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于２０ｋｂ的ＤＮＡ主带，基本无ＤＮＡ碎带；不用ＲＮａｓｅ处理，就已经无ＲＮＡ的干扰．ＯＤ２６０／２８０值显示产物纯度较高，无需任何纯化处理即可以用于ＰＣＲ扩增和ＲＡＰＤ分析 相似文献
3.
不同基因型甘蔗磷素吸收动力学特征研究初报 总被引：8，自引：0，他引：8
万美亮 《华南农业大学学报》1998,19(2):125-126
不同基因型甘蔗磷素吸收动力学特征研究初报万美亮邝炎华（华南农业大学生物技术学院,广州,５１０６４２）ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＩＥＳＯＮＴＨＥＫＩＮＥＴＩＣＳＯＦＰＨＯＳＰＨＯＲＵＳＵＰＴＡＫＥＢＹＳＵＧＡＲＣＡＮＥＯＦＤＩＦＦＥＲＥＮＴＧＥＮ... 相似文献
4.
5.
一种适合枣合酸枣基因组DNA的提取方法 总被引：7，自引：0，他引：7
研究比较了ＣＴＡＢ法和ＳＤＳ法在枣和酸枣基因组ＤＮＡ提取中的效果，并分析了取样时间、部位、样品状况、抗氧化剂和不同纯化处理等对所提ＤＮＡ质和量及其ＲＡＰＤ扩增效果的影响。结果表明：用改良后的ＣＴＡＢ法优于ＳＤＳ法，可有效地去除多糖，所提ＤＮＡ的质和量均能满足ＰＣＲ扩增要求。取样时间与部位对所提基因组ＤＮＡ的质量无影响，但与产量有关，以旺盛生长期的幼叶或嫩梢尖为佳。样品采用液氧处理－７０℃低温保存， 相似文献
6.
按ＣＴＡＢ法提取大肠杆菌Ｋ－１２的ＤＮＡ,应用ＰＣＲ技术获得目的基因片段（ＰＰａｓｅ基因）,低熔点胶回收后,在Ｔ４ＤＮＡ连接酶的作用下,将目的基因克隆到ｐＵＣｍ－Ｔ载体上,并转化ＪＭ１０９感受态菌中。转化获得的克隆提取质粒ＤＮＡ,０．８％琼脂糖凝胶电泳分析,并进行ＰＣＲ扩增鉴定、序列分析证明插入片段确为ＰＰａｓｅ基因。本文用ＰＣＲ技术扩增并克隆大肠杆菌焦磷酸酶基因,为导入甜菜选育高含糖量品种奠定基 相似文献
7.
通过根癌农杆菌介导法获得新疆甜瓜抗病优质新品系 总被引：2，自引：0，他引：2
用新疆甜瓜无菌苗子叶块,通过根癌农杆菌介导法,将黄瓜花叶病毒外壳蛋白ｃＤＮＡ基因导入“新红心脆”等６个品种（系）,经卡那霉素筛选,获得大量Ｋｍ抗性植株,其中部分Ｋｍ抗性植株经Ｌｕｉｓ法检测,表达了胭脂碱合成酶活性。进一步经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,ＤＯＴ－Ｅｌｉｓａ,ＰＣＲ特异扩增。Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ等方法检测,结果证明了Ｋｍ抗性植株基因组中整合了ＣＭＶ－ＣＰ基因,长度为１ｋｂ,并能有效表达,表达产 相似文献
8.
11种野生苹果种质资源RAPD标记研究 总被引：2，自引：0，他引：2
利用Ｃ．Ｇ．Ａｌｐｈａ等的ＤＮＡ微量提取法,提取了山荆子ＭａｌｕｓｂａｃｃａｔａＢｏｒｋｈ．等１１个苹果属植物野生种类的ＤＮＡ,并用５对引物对所研究材料的ＲＡＰＤ标记进行了研究。探讨了叶片中富含多酚类化合物的苹果植物叶片ＤＮＡ的提取及纯化方法,并初步建立了野生苹果ＲＡＰＤ标记的ＰＣＲ反应条件。 相似文献
9.
甘蔗白条病(Xanthomonas albilineans)PCR,ELISA,DIA检验技术研究(英文) 总被引：1，自引：0，他引：1
应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术检测甘蔗白条病（Ｘ．ａｌｂｉｌｉｎｅａｎｓ）蔗茎无症带菌样品和纯培养及总ＤＮＡ;并以改良半选择性培养基（ｍＸＡＭ）定量．比较了ＰＣＲ,ＥＬＩＳＡ,ＤＩＡ的检测效率和可靠性．表明ＰＣＲ能够特异性检出白条黄单胞包括标准菌株３３９１５ＡＴＣＣ和血清型Ｉ,Ｉ等１９个菌株．但是不能扩增其它５个分离自蔗茎的腐生黄单胞和１３个其它属种的植物细菌．能够检出少至１０ｐｇ靶细菌总ＤＮＡ或２０个活细菌．ＰＣＲ检测灵敏度较ＥＬＩＳＡ和ＤＩＡ高１００～１０００倍．田间样品检测结果与实际发病符合度为９３．４６％．这一分子检测技术适用于国内外甘蔗种质资源交换和口岸检疫以及病害流行学研究 相似文献
10.
为建立能快速灵敏检测甘蔗宿根矮化病 （ｒａｔｏｏｎｓｔｕｎｉｎｇｄｉｓｅａｓｅ,ＲＳＤ）的 ＰＣＲ检测方法。本文通过改进模板 ＤＮＡ的制备方法,在 ＰＣＲ基本程序的基础上,以甘蔗宿根矮化病菌 （Ｌｅｉｆｓｏｎｉａｘｙｌｉｓｕｂｓｐ．ｘｙｌｉ,Ｌｘｘ）１６Ｓ-２３ＳｒＤＮＡ基因间隔区特异性引物,调整 ＰＣＲ扩增反应体系各组分的浓度、反应的退火温度、循环参数等主要因子,优化 ＰＣＲ反应体系。此检测体系能从感染 ＲＳＤ的样品中扩增出大小为４３８ｂｐ的特异性片段,而阴性对照和未感染样品则未扩增出任何片断;未优化仅从稀释３０倍的蔗汁总 ＤＮＡ中扩增出 ＲＳＤ的特异性片段,优化后可以从稀释３０００倍的蔗汁总 ＤＮＡ中扩增出 ＲＳＤ的特异性片段。对３１份田间采集样品检测,未优化的阳性检出率为 ３２.２６％;优化后阳性检出率 ７４.１９％,与 Ｉ-ＥＬＩＳＡ检测结果一致。应用此检测方法可稳定、快速地检测出蔗株是否感染 ＲＳＤ,且检测效率高,适合于田间大批量样品快速检测。 相似文献
11.
人工感染ＲＨＤＶ－ＮＪ株病死兔肝经－５０℃反复冻融,氯仿处理,ＰＥＧ沉淀、差速离心,Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－４Ｂ柱层析得纯化病毒,纯化ＲＨＤＶ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＣｕＣｌ２负染色后,切取主要结构多肽ＶＰ１（６４．５ＫＤ）凝胶带,除去ＣｕＣｌ２和ＳＤＳ获得ＶＰ１,高效液相色谱鉴定只有一个蛋白峰,Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔｔｉｎｇ,ＨＡ和ＨＩ结果显示纯化ＶＰ１具有良好的抗原表位稳定性。无母源抗体的３月龄兔１ 相似文献
12.
一种更适合培养的番茄叶肉原生质体杨华杰吴定华（华南农业大学园艺系，广州，５１０６４２）ＡＫＩＮＤＯＦＭＯＲＥＳＵＩＴＡＢＬＥＭＥＳＯＰＨＹＬＬＰＲＯＴＯＰＬＡＳＴＦＯＲＣＵＬＴＵＲＩＮＧＯＦＴＯＭＡＴＯＳＰＥＣＩＥＳＹａｎｇＨｕａｊｉｅＷｕＤｉｎｇｈ... 相似文献
13.
甘蔗受黑穗病菌侵染后苯丙烷类代谢变化及与其抗性的关系 总被引：3，自引：0，他引：3
检测了不同抗病类型甘蔗品种肥黑穗病菌（Ｕｓｔｉｌａｇｏ ｓｃｉｔａｍｉｎｅａ Ｓｙｄ．）侵染向苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）、酷氨酸解氨酶（ＴＡＬ）、４－香豆酸辅助酶Ａ连接酶（ＣｏＡｌｉｇａｓｅ）活性以及绿原酸和黄酮类化合物含理的动态变化。结果表明：受病菌侵染后和ＰＡＬ、ＴＡＬ、ＣｏＡｌｉｇａｓｅ比活性均有一个明显的消长过程，但高技术品种ＮＣｏ３７６，＂ＲＯＣ”１０酶活性上升的幅度和持续时间显著大于高感 相似文献
14.
香蕉越冬期ATPase和保护酶的活性及膜脂过氧化 总被引：8，自引：2，他引：8
在越冬期，随着气温的降低香蕉叶片腺苷三磷酸酶（ＡＴＰａｓｅ）活性明显提高，３月份后气温上升，活性开始下降。越冬期间超氧物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）活性呈下降趋势，膜脂过氧化产物ＭＤＡ含量呈上升趋势，其中台湾蕉ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＰＯＤ活性下降幅度比柴蕉大。ＡＴＰａｓｅ水解活性和ＭＤＡ含量明显高于柴蕉，经ＰＰ３３３处理的台湾蕉，ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＰＯＤ活性分别比对照提高６ 相似文献
15.
用ＡＣＣ处理保持系会降低花粉的可育度,使其幼穗中蛋白质、ＤＮＡ和ＲＮＡ含量以及蛋白酶、ＲＮＡ酶和ＤＮＡ酶活性下降;并使Ｏ＾－２的生成速率和丙二醛含量上升,ＣＡＴ和ＳＯＤ活性下降,ＰＯＤ活性上升。用ＡＶＧ处理不育系,可使其花粉育性得以部分提高,使其幼穗蛋白质、ＤＮＡ和ＲＮＡ含量以及蛋白酶、ＲＮＡ酶和ＤＮＡ酶活性下降,并使Ｏ＾－２生成速率和丙二醛含量下降,使ＣＡＴ、ＳＯＤ和ＰＯＤ活性上升;ＡＣＣ可降低 相似文献
16.
在越冬期，随着气温的降低香蕉叶片腺苷三磷酸酶（ＡＴＰａｓｅ）活性明显提高，３月份后气温上升，活性开始下降．越冬期间超氧物岐化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）活性呈下降趋势，膜脂过氧化产物ＭＤＡ含量呈上升趋势，其中台湾蕉ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＰＯＤ活性下降幅度比柴蕉大．ＡＴＰａｓｅ水解活性和ＭＤＡ含量明显高于柴蕉，经ＰＰ３３３处理的台湾蕉，ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＰＯＤ活性分别比对照提高６６．７７％、８６．４４％和２３７．７６％，ＡＴＰａｓｅ活性下降２４．１５％，ＭＤＡ含量下降２１．６７％，在一定程度上提高了香蕉的抗寒性 相似文献
17.
检测了不同抗病类型甘蔗品种受黑穗病菌（ＵｓｔｉｌａｇｏｓｃｉｔａｍｉｎｅａＳｙｄ．）侵染后苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）、酪氨酸解氨酶（ＴＡＬ）、４—香豆酸辅醇Ａ连接酶（ＣｏＡｌｉｇａｓｅ）活性以及绿原酸和黄酮类化合物含量的动态变化．结果表明：受病菌侵染后各品种的ＰＡＬ、ＴＡＬ、ＣｏＡｌｉｇａｓｅ比活性均有一个明显的消长过程，但高抗品种ＮＣｏ３７６、“ＲＯＣ”１０酶活性上升的幅度和持续时间显著大于高感品种Ｆ１３４、ＦＮ８３—０７０６；同时，与高感品种相比．高抗品种绿原酸与黄酮类化合物的累积时间早，累积量也明显增加．因此，我们认为甘蔗黑穗病菌诱导ＰＡＬ、ＴＡＬ、ＣｏＡｌｉｇａｓｅ活性提高，增强了合成绿原酸、黄酮类化合物等多种抗病次生物质的苯丙烷类代谢，这可能是甘蔗对黑穗病侵染后抗性（Ｐｏｓｔ－ｉｎｆｅｃｔｉｏｎａｌｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ）机制的一个重要方面． 相似文献
18.
益生地衣芽孢杆菌天门冬氨酸激酶Ⅱ基因的PCR扩增及序列分析 总被引：2，自引：0，他引：2
通过聚合酶链反应（ＰＣＲ） 扩增得到了益生地衣芽孢杆菌Ｈ８８ － ３ 株天门冬氨酸激酶（Ａｓｐａｒ ｔｏｋｉｎａｓｅ,ＡＫ） Ⅱ基因,并用ＡＢＩＰＲＩＳＭＴＭ ３７７ ＤＮＡＳｅｑｕｅｎｃｅｒ 进行序列测定,所得核苷酸序列及推导的氨基酸序列与枯草芽孢杆菌ＶＢ２１７ 株进行了比较,结果它们的同源性非常高。 相似文献
19.
苦竹类植物RAPD分析及其系统学意义 总被引：14，自引：1，他引：13
利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术,分析了苦竹类植物中产于日本的大明竹Ｐｌｅｉｏｂｌａｓｔｕｓ ｇｒａｍｉｎｅｕｓ（Ｂｅａｎ）Ｎａｋａｉ、、长苦竹Ｐｌ．ｓｉｍｏｎｉｉ（Ｃａｒｒ．）Ｎａｋａｉ,中国产的苦竹Ｐｌ．ａｍａｒｕ（Ｋｅｎｇ）Ｋｅｎｇｆ．、宜兴苦竹Ｐｌ．ｙｉｘｉｎｇｅｎｉｓ Ｃｈｕ ＆Ｃｈａｏ、斑苦竹Ｐｌ．ｍａｃｕｌａｔｕ（ＭｃＣｌ．）Ｃｈｕ＆Ｃｈａｏ。采用２０个引物（１０ｂｐ）进行扩增出的ＤＮＡ片段,用于种间遗传相似性分析。结果表明：（１）苦竹与宜兴苦竹关系密切;（２）大明竹与其它４种关系较远;（３）形态为分上将中、日产苦竹分成两类没有得到ＲＡＰＤ分析的支持。 相似文献
20.
数量性状基因数目估计的程序设计 总被引：5，自引：0，他引：5
本文给出了估计控制数量性状基因数目的ＢＡＳＩＣ程序。本程序根据估计数量性状基因数目的Ｃａｓｔｌｅ－ｗｒｉｇｈｔ方法（或称矩法）及其该法的若干扩展，利用双亲、Ｆ１，Ｆ２及回交世代（Ｂ１，Ｂ２）的资料，估计所研究性状双亲有差异的基因座位数在称有效因子数，并给出其估值的标准误；程序还有对资料进行加性显性模型适合性检验（ＡＢＣ检验和合并ＡＢＣ检验）的功能。″５５０ＲＥＴＵＲＮ５６０ＥＳ＝Ｄ／Ｓ／８：ＳＥ＝（４＊Ａ＋Ｖ／Ｓ／Ｓ）＊ＥＳ＊：Ｇ＝Ｇ＋１５７０Ｂ＄＝″ｎ（″＋ｓｔｒｎ＄（Ⅰ）″，″＋Ｓｔｒ＄（ｇ）＋″）．：ＧＯｓＵＢ５１０：ＲＥＴＵＲＮ５７０Ｂ＄＝″ｎ（″＋ＳＴＲ＄（Ⅰ）＋″，″＋ＳＴＲ＄（Ｇ）＋″）．：ＧＯＳＵＢ５１０：ＲＥＴＵＭ２．２程序说明２．２．１变量和数组Ｎ——世代数（在此等于６）Ａ（３，Ｎ）一一合并ＡＢＣ测验的系数矩阵Ｘ（Ｎ）——世代均值数组Ｎ（Ｎ）——世代样本容量数组Ｖ（Ｎ）——世代方差数组Ｚ（Ｎ）一一世代均值的方差Ｕ（Ｎ）——世代方差的方差Ｔ２——ｔ２统计量ＦＴ一一一ｔ２统计量的近似自由度２．２．２数据输入（ＤＡＴＡ语句）世代按Ｐ１，Ｐ２，Ｆ１，Ｆ２，Ｂ１，Ｂ２的顺序，每世代依次为样本容量， 相似文献