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相似文献
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1.
用ELISA测定了8株抗牛病毒性腹泻/粘膜病病毒(BVD/MDV)单克隆抗体(McAb)的抗原结合位点,通过ELISA相加试验证实,8株单克隆抗体识别的抗原位点大多数比较接近,其中5A5与5C2,5A9与5F11,以及5D7、5C9、2G3、4E6四株所识别的抗原位点相同或非常接近。  相似文献   

2.
用ELISA测定了8株抗牛病毒性腹泻/粘膜病病毒(BVD/MDV)单克隆抗体(McAb)的抗原结合位点,通过ELISA相加试验证实,8株单克隆抗体识别的抗原位点大多数比较接近,其中5A5与5C2,5A9与5F11,以及5D7、5C9、2G3、4E6四株所识别的抗原位点相同或非常接近。  相似文献   

3.
用单克隆抗体(MAb)作酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫荧光试验(IFA)、病毒中和(VN)试验及兔疫沉淀试验证明了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)致细胞病变株87-2552(现地分离)与NADL和Singer(原型株)之间的抗原差异。两个抗BVDV87-2552株的MAb(D11和B7)能强烈中和现地分离株,并对该病毒的48-KDa糖蛋白呈特异性。这两个MAb有不同的亚型,D11为免疫球蛋白G1  相似文献   

4.
采用腹腔的接种1次脾内注射禽呼肠孤病毒(ARV)蛋白免疫小鼠,经3次融合后,共筛选8株分泌抗禽呼肠孤病毒(单克隆抗体杂交瘤细胞株,这8株McAb均可与ARVS1133株,FDO株发生反应,而与IBDV,MDV,EDS-76病毒不发生反应,经亚类鉴定,AE7,AF8,BD1,DH10,EE5为IgG1;AD6,CG4为IgC2a,AG7为IgG2b。腹水效价在10^3~10^5之间。  相似文献   

5.
从马立克氏病病毒(MDV)人工感染鸡的淋巴细胞瘤表面洗脱抗马立克氏病相关肿瘤表面抗原(MATSA)的抗体。以此作为Ab1免疫家兔,成功地制备了MATSA的内映像(Ab2β)。将纯化的Ab2β与白油佐剂乳化,给30日龄鸡肌注免疫,应用间接ELISA对免疫鸡MATSA抗体的消长进行了监测。结果表明:正常鸡的血清中无MATSA抗体的存在,而用这种Ab2β于第1次免疫后10d即可形成明显的抗体应答,ELISA的OD值(x)为0.20;至第3次免疫后10d,OD值(x)为0.33,达峰值,以后则呈下降趋势。研究结果表明,应用来自MDV感染鸡肿瘤细胞表面的抗MATSA的抗体,可以用作肿瘤表面抗原内映像的制备,从而为抗肿瘤独特型疫苗的研究提供了一种新途径  相似文献   

6.
以纯化的兔出血症病毒免疫BALB/C鼠,应用杂交瘤技术获得了分泌抗RHDV单抗杂交瘤细胞17株,其中有3株杂交瘤细胞分泌单抗的ELISA效价为1:409600,1:4096;5株单抗具有血凝抑制活性。兔抗RHDV高兔血清对17株McAb的ELISA抑株为IgG2b。各株McAb与欧洲棕色兔病病毒无抗原交叉反应,也无沉淀反应特性。  相似文献   

7.
抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立   总被引:6,自引:1,他引:5  
将纯化的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)组织毒免疫的BALB/c鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用ELISA,病毒中和试验检测分泌抗体,获得了6株稳定分泌抗IBDV单隆抗体的杂交瘤细胞,命名为NIB-1,NIB-2,NIB-3,NIB-4,NIB-5,NIB-6;6株MCAb均具ELISA特性和免疫沉淀特性,亚类鉴定表明,前4株属于IgG2a,后2株属于IgG1。杂交瘤细胞冻存6个月后复苏,均  相似文献   

8.
用能表达马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白B(gB)的重组杆状病毒感染的Sf9细胞免疫小鼠,制备针对MDVgB的单克隆抗体。以Ⅰ型马立克氏病病毒GA株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原,同时以免疫荧光试验(IFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)来筛选杂交瘤细胞,结果获得了IFA和ELISA均为阳性的2株单克隆抗体细胞株,定名为BA4和BD8。在IFA和免疫沉淀试验中,单抗BD8与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型MDV均呈阳性反应;单抗BA4只对Ⅰ型MDV(包括CVI988疫苗株)呈阳性反应。免疫沉淀反应进一步确证2株单抗识别的是MDV糖蛋白B抗原。  相似文献   

9.
用制备的抗鸡IgGMcAb-HRP作为免疫试剂,以IBDV的高免阳性鸡血清作为抗体,用间接ELISA法检测经IBDV强毒攻击的各脏器含毒情况,同时与AGP法进行比较。结果表明两种方法具有良好的平行关系,间接ELISA法比AGP法更为敏感;攻毒鸡的法氏囊带毒最多,而在脾、胸腺、肾中均未检出病毒抗原。  相似文献   

10.
用纯化的兔出血症病毒(rabbithaemorhagicdiseasevirus,简称,RHDV)免疫Balb/c小鼠。正如网络学说所指出的,从免疫鼠的杂交瘤细胞克隆中,不仅筛选出能分泌抗RHDV抗体(Ab1)的细胞克隆,同时也筛选出能分泌抗RHDV独特型抗体(anti-idiotypicantibodies,Ab2)的杂交瘤细胞,用抗原而不用单克隆抗体(Ab1)免疫,诱导产生抗独特型抗体(Ab2)是一种具有广阔的应用前景的新技术  相似文献   

11.
具有中和活性的减蛋综合征病毒单抗的研制   总被引:1,自引:0,他引:1  
用减蛋综合征病毒毒株WPDV205纯化抗原免疫BALB/c小鼠,在最后一次免疫后第3天取脾细胞与SP2/0细胞在PEG-4000的作用下融合。用间接ELISA初步筛选出阳性克隆10株(4B1、1D4、2D6、3D6、3A5、2A1、3C6、3C1、1B3和2C5)。这些杂交瘤细胞经克隆化和再次检测后生产腹水,用微量细胞中和试验筛选出具有中和活性的单克抗隆体4株(4B1、3C1、3C6和2C5),其  相似文献   

12.
利用猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV)国内分离株J1,采用反复差速离心法制备免疫抗原,长程免疫法免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA方法检测抗体,通过细胞融合技术,并经3次亚克隆获得了10株能稳定分泌抗PRRSV单抗的杂交瘤细胞单克隆株(A1D7H10,A1D7H11,A1E7H9,A1E7D9,A2D8E7,A2D8B11,B3D11D6,B2G9A9,B2G9F2)。这些细胞经体外连续传  相似文献   

13.
用能表达马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白B(gB)的重组杆状病毒感染的Sf9细胞免疫小鼠,制备针对MDVgB的单克隆抗体,以I型马立克氏病病毒GA株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原,同时以免疫荧光试验(IFA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)来筛选杂交瘤细胞,结果获得了IFA和ELISA均为阳性的1株单克隆抗体细胞株,定义名BA4和BD8。在IFA和免疫沉淀试验中,单抗BD8与I,ⅡⅢ型MDV均呈阳  相似文献   

14.
建立了抗禽脊髓炎病毒(AEV)的单克隆抗体(MAb)VR9-1。接种AE鸡胚适应毒Van Rockcl株、2种疫苗株和2种野毒株的雏鸡脑冰冻切片、鸡胚成纤维细胞和鸡胚脑细胞,用间接免疫荧光和免疫过氧化物酶染色检查,结果,均可与MAb VR9-1起反应。该MAb也可用于石蜡包埋切片的抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶染色。试验结果表明,该MAb可认别AEV毒株的一个共同抗原决定簇,可用于AEV检测和定  相似文献   

15.
用提纯的鸭肝炎病毒(DHV)免疫家兔制备高免血清,常规方法提取IgG,与1%葡萄球菌A蛋白(SPA)阳性菌悬液混合,以PH7.20.2mol/LPBS作缓冲液,制成鸭病毒性肝炎(DVH)SPA协同凝集试验(SPA-CoA)诊断试剂,同时制备阴性对照试剂。用SPA-CoA检测人工感染致死的雏鸭肝脏、含DHV强毒的鸭胚液、适应鸡胚的疫苗毒鸡胚尿囊毒的检出率均为100%。用SPA-CoA检测强毒时,样品  相似文献   

16.
用单克隆抗体(MAb)对传染性法氏囊病病毒(IBDV)不同毒株中和表位的相关性进行了分析。MAb B69能中和同源病毒D78株,但不中和MD及IBDV Del-A变异株。而MAb 33E8和R63能中和D78株和MD及Del-A变异株。在体外将Dcl-A株VP2基因和一个10^3bp片段的cDNA克隆进行翻译,得到6种多肽,它们代表了一个全长产物(35.5kd)和5份切割片段。用MAb B69、3  相似文献   

17.
在1日龄和3周龄鸡的脾粘着(CSA)细胞中,检测到了被正常鸡血清(NCS)中和过的传染性法氏囊病毒(IBDV)的感染性,有3周龄鸡的(CSA)细胞中,检测到了被母源抗体(MN-Ab)中和过的IBDV的感染性。此外,发现1日龄鸡制备的CSA细胞含有补体受体(CR),1周龄鸡制备的CSA细胞既含有CR又有Fc受体(FcR)。然而,即使CSA细胞上的FcR被热凝集NCS(56℃,60分钟)阻断的情况下,  相似文献   

18.
鸡病毒性关节炎病毒的提纯结构蛋白及其免疫活性分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用差速离心和蔗糖递度超速离心法提纯了鸡病毒性关节为病毒(AVAV)9307株,并用SDS-PAG电泳技术分析其结构蛋白,该病毒主要由8条多肽组成(VP1~VP8),它们的分子量分别是145,130,115,72,70,65,42,39KD。用Westernblotting免疫印迹技术分析这些多肽的免疫活性,与同源病毒株抗血清出现5条可见的反应带,分别是VP1,VP2,VP4,VP5和VP7;与异  相似文献   

19.
应用鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)作免疫原建立了8株分泌抗ILTV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株。这8株McAb均具有荧光抗体的特性,没有中和病毒的能力,分别属于IgG2a,IgG3和IgM,应用异硫氰酸荧光素标记McAb,建立了直接荧光抗体试验,用其检测ILTV抗原与分离病毒的符合率为92.8%。  相似文献   

20.
禽白血病/肉瘤病毒群特异性抗原P^gag27的分离和纯化   总被引:2,自引:0,他引:2  
本试验用差速离心和非线性蔗糖密度梯度离心法从感染雏鸡血浆中分离和提纯了禽成髓细胞性白血病病毒,并以SDS法裂解病毒,用SDS-PAGE分析AMV结构蛋白成分,最后选用水平板式电泳系统,经SDS-PAGE比较大量地分离了P^gag27。用Dot-ELISA和琼脂扩散试验检验其抗原活性,并且用SDS-PAGE测定其分子量和纯度,结果表明,提纯的病毒蛋白具有抗原活性,且达到电泳纯。  相似文献   

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