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相似文献
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1.
Bacteriophage and the toxigenicity of Clostridium botulinum type C   总被引:25,自引:0,他引:25  
Nontoxigenic and bacteriophage-sensitive bacterial cultures have been isolated from toxigenic Clostridium botulinum type C, strain 468C, after treatment with either ultraviolet light or acridine orange. Two bacteriophages, designated CEbeta and CE(gamma), were isolated from toxigenic strain 468C. Both of these bacteriophages were capable of infecting the nontoxigenic type C cultures, but only bacteriophage CEbeta was involved in the change from nontoxigenicity to toxigenicity.  相似文献   

2.
[目的]通过对分离纯化的C型肉毒毒素抗原性分析,提供快速鉴定动物因C型肉毒梭菌中毒的理论基础.[方法]对分离纯化的C型肉毒梭菌的肉毒毒素灭活后通过SDS - PAGE测定浓度,确定浓度后与弗氏佐剂乳化后免疫家兔,免疫结束后采家兔血液并分离血清.[结果]将不同稀释倍数的肉毒毒素经SDS -PAGE电泳分离后,转移至HybondNC膜,家兔三免后提取的血清作为一抗,用二抗进行Western blotting检测,大约在98.0和53.0 kDa处出现特异反应带;抗原与抗体在琼脂凝胶上结合时,会形成清晰的沉淀带.[结论]分离纯化的C型肉毒毒素,经免疫后家兔可见:C型肉毒毒素具有免疫原性和反应原性,抗体的效价为1∶8.  相似文献   

3.
Clostridium botulinum type F: seasonal inhibition by bacillus licheniformis   总被引:9,自引:0,他引:9  
Clostridium botulinum type F has been identified during the summer months in mud samples from a small stream. Its absence during the period from October to April in these mud samples is attributed to the presence of Bacillus  相似文献   

4.
Clostridium botulinum type F has been isolated from a salmon (Oncorhynchus nerka) taken from the Columbia River. Cultures of this type have been reported only twice before-once the bacterium was isolated.  相似文献   

5.
付强  莫玲  苗立中  王艳  李金林 《安徽农业科学》2014,(30):10567-10568,10577
肉毒中毒是肉毒杆菌引起的一种致死性的神经麻痹性疾病,应对内毒中毒的最有效方法是预防或疫苗接种,肉毒毒素Hc段是研制亚单位疫苗的首选.通过基因重组技术能够将肉毒毒素Hc片段在大肠杆菌或酵母表达系统中进行大规模表达.阐述了这2种表达载体在肉毒毒素亚单位疫苗的研制及发酵生产情况.  相似文献   

6.
Two proteolytic strains of Clostridium botulinum type F have been isolated from crabs (Callinectes sapidus) from the York River in Virginia. This is the first time proteolytic strains of this type have been isolated in the United States and the first demonstration of the presence of type F on the eastern coast of the United States.  相似文献   

7.
从不同菌株、不同培养基、不同培养温度和不同培养时间对C型魏氏梭菌在培养过程中毒素产生的影响及不同菌株的交叉保护力方面进行了研究.结果表明,在3株C型魏氏梭菌中.C_(59-2)株在相同培养条件下产生的毒素最高,肉肝胃酶消化汤更有助于该菌株产生高滴度的致死性毒素,并且在35℃培养16-20 h后可产生较高滴度的致死性毒素,1μL魏氏梭菌培养物上清液即可致8/8小鼠死亡,不同菌株之间具有较好的交叉免疫力,这些结果为研制C型魏氏梭菌高效疫苗打下了基础.  相似文献   

8.
从山西各鹿场采集鹿出血性肠炎急性病死鹿病料39例,通过病原微生物分离培养,形态学观察和血清型鉴定,初步表明分离到的产气荚膜梭菌主要是A型,对PCR产物的序列分析表明经过PCR得到了特异性的α毒素基因片段,因而A型产气荚膜梭菌是引起山西鹿场发生鹿出血性肠炎的主要致病菌。为该疾病的防治和疫苗研制提供依据。  相似文献   

9.
为了探索一种快速、准确检测产气荚膜梭菌毒素型的方法,以便有效预防控制该病的流行和发生,利用SDS-PAGE方法,对通过ELISA鉴定的20株(A型16株、C型3株和D型1株)德国牛舍环境气源性产气荚膜梭菌分离株,以及通过Multiplex-PCR鉴定的57株山东省疫区产气荚膜梭菌分离株外毒素蛋白的相对分子质量进行测定,以确定毒素的种类,进而确定菌株的毒素型。结果表明,产气荚膜梭菌标准株、德国牛舍环境气源性产气荚膜梭菌分离株、山东省疫区产气荚膜梭菌分离株粗提外毒素的质量浓度分别为3.261,2.238~3.333,1.451~3.109mg/mL,精提外毒素的质量浓度分别为0.803,0.521~0.999,0.530~0.812 mg/mL。SDS-PAGE法检测的20株德国牛舍环境气源性产气荚膜梭菌分离株中A型17株、C型2株、D型1株,与ELISA检测结果的符合率为95.0%;SDS-PAGE检测的57株山东省疫区产气荚膜梭菌分离株全部是A型,与Multiplex-PCR检测结果的符合率为100%。说明应用SDS-PAGE方法对产气荚膜梭菌的检测结果与ELISA方法的检测结果有一定的差异性,与Multi-plex-PCR方法的检测结果一致。  相似文献   

10.
冶贵生 《湖北农业科学》2012,51(13):2873-2874
为了对B型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type B)进行快速检测,依据NCBI登录的产气荚膜梭菌α、B及ε毒素基因序列设计引物,并对其进行PCR扩增.琼脂糖凝胶电泳结果显示3个毒素基因均被成功扩增,目标片段条带清晰,长度与预期相符.  相似文献   

11.
【目的】获得产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)的无毒重组突变体,并评价其毒力及免疫原性。【方法】对已知的D型产气荚膜梭菌ETX编码基因按照大肠杆菌偏爱密码子进行优化设计。同时,将第106位的组氨酸和第199位的苯丙氨酸分别突变为脯氨酸和谷氨酸,经人工合成,获得基因片段GETXm2。将GETXm2克隆至原核表达载体pET30a-(+)后,将pET30a-GETXm2转化至BL21(DE3)感受态细胞中,在15℃和37℃两种条件下分别用IPTG诱导16 h和4 h,超声破碎后收集上清和沉淀,采用SDS-PAGE和Western blot方法检测重组蛋白的表达情况及其可溶性。利用Ni-IDA亲和层析方法对可溶性表达的重组蛋白进行纯化,从而获得重组蛋白rETXm2。利用Western blot方法,检测rETXm2与D型产气荚膜梭菌ETX抗血清的反应性。将rETXm2用细胞维持液稀释至100及10 μg·mL-1,检测其对犬肾细胞系(MDCK细胞)的毒力。分别用胰酶活化前和活化后的rETXm2,以0.0625、0.625和6.25 mg·kg-1 3个剂量尾静脉注射,检测rETXm2对小鼠的毒力。随后,将rETXm2与Montanide ISA 201佐剂混合乳化制备疫苗,取4只健康家兔,皮下免疫2次(间隔两周),100 μg/只。同时,Montanide ISA 201佐剂与PBS混合液免疫组作为对照组。分别在一免后14 d以及二免后21 d,采血,分离血清,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测血清对D型产气荚膜梭菌毒素的中和抗体效价。同时,在二免后21 d,对家兔经耳缘静脉注射1个家兔MLD的D型产气荚膜梭菌毒素,检测rETXm2对家兔的免疫保护效果。【结果】 在15℃和37℃条件,rETXm2在BL21(DE3)菌体中均以可溶性和包涵体两种形式表达,综合考虑重组蛋白的表达量、可溶性及诱导时间,选择纯化在37℃条件下诱导获得的可溶性rETXm2。灰度扫描结果显示,在37℃诱导条件下,rETXm2可溶表达比例达30%;Western blot检测结果表明,D型产气荚膜梭菌毒素抗血清能够特异性的识别rETXm2,出现特异性反应条带。MDCK细胞毒性实验显示,在rETXm2浓度为100 μg·mL-1的细胞培养基中孵育24 h后,细胞未出现细胞病变,而2 000倍稀释的D型产气荚膜梭菌天然毒素细胞培养基孵育组的细胞出现了明显的细胞病变;小鼠安全试验显示,尾静脉注射6.25 mg·kg-1剂量的rETXm2,对小鼠无致死性;血清中和试验结果显示,rETXm2免疫组每毫升的一免兔抗血清可中和450-750个小鼠MLD,每毫升的二免兔抗血清可中和2 500-4 000个小鼠MLD的D型产气荚膜梭菌毒素,而对照组的兔抗血清对D型产气荚膜梭菌毒素无中和作用;用1个家兔MLD的D型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔4/4保护。【结论】产气荚膜梭菌rETXm2毒力基本丧失,但保留了良好的免疫原性,是D型产气荚膜梭菌病基因工程亚单位疫苗的理想候选抗原蛋白。  相似文献   

12.
为了摸清引起湖北某猪场3日龄内仔猪以出血性下痢、死亡率高的疾病病因,经病料涂片镜检、培养基接种、生化试验和血清型鉴定,诊断为C型产气荚膜梭菌感染,该菌厌气肉肝汤培养物上清0.001 m L可引起小鼠全部死亡,具有较强的毒力。  相似文献   

13.
目的对比难辨梭状芽孢杆菌相关性腹泻(CDAD)与抗生素相关性腹泻(AAD)的临床特点,分析CDAD的危险因素。方法对2008年4至11月诊断为抗生素相关性腹泻(AAD)的202例住院患者,用酶联荧光免疫检测粪便中难辨梭状芽孢杆菌毒素A/B,前瞻性对比分析CDAD和AAD的临床特点。结果202例AAD中有44例CDAD(占21.8%)。多因素分析显示:高APACHE Ⅱ评分、合并慢性病、高血C反应蛋白及低血白蛋白水平是引起CDAD的危险因素(P<0.05),而使用甲硝唑或万古霉素是CDAD的保护性因素。结论AAD中约21%由难辨梭状芽孢杆菌感染所致,病情危重、慢性疾病史、免疫功能低下及抗生素应用是引起CDAD的危险因素。  相似文献   

14.
Vegetative cells of Clostridium botulinum were shown to contain iron-sulfur proteins that react with added nitrite to form iron-nitric oxide complexes, with resultant destruction of the iron-sulfur cluster. Inactivation of iron-sulfur enzymes (especially ferredoxin) by binding of nitric oxide would almost certainly inhibit growth, and thus is probably the mechanism of botulinal inhibition by nitrite in foods.  相似文献   

15.
产气荚膜梭菌的分离鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
从山西省太原市、阳泉市、昔阳县、绛县、太谷、榆次等地的鹿场发生鹿出血性肠炎的病死鹿体内分离到21株产气荚膜梭菌,鉴定均为A型。对A型产气荚膜梭菌的培养条件进行了研究。结果表明:最佳培养基为厌氧肉肝胃酶消化汤,最佳产毒条件为35℃7h。  相似文献   

16.
部分梭菌对机体的免疫系统具有明显的调节作用,可开发成新型益生菌。由于鸡盲肠内容物中梭菌含量较高,从小鸡肓肠内容物中分离培养功能性梭状芽孢杆菌,并在小鸡中初步研究其对沙门氏菌攻毒的保护效果。该研究首先采用梭菌选择性培养基,从小鸡肓肠内容物中分离获得了一株可以将大豆素转化为雌马酚的革兰氏阳性纤维状梭菌C1,以四环素为对照,研究梭菌C1对小鸡沙门氏菌攻毒的保护作用。结果表明,梭菌C1组和四环素组均具有降低肓肠内容物中沙门氏菌活菌数和促进小鸡生长的功能,推测梭菌C1具有开发为四环素替代品的潜能。虽然较高浓度的S 雌马酚(5 mg·mL-1)在体外对沙门氏菌有一定的抑制作用,梭菌C1也具有将大豆素转化为雌马酚的能力,但梭菌C1在体外对沙门氏菌的抑制作用并不明显,其益生机制还有待进一步研究。  相似文献   

17.
[目的]了解气肿疽梭菌的抗原特性。[方法]对气肿疽梭菌标准菌株(C54-1)的菌体抗原进行提纯过柱,通过制备小鼠免疫血清及免疫印迹技术进行了反应原性试验。[结果]气肿疽梭菌的菌体抗原有8条蛋白带,电泳图谱上分别出现了与之相对应的条带,分子质量分别为93、72、56、46、38、26、15、11 kD,其中第2(72 kD)、5(38 kD)、6(26 kD)峰的抗原表现出明显的特异性。用酶联免疫印迹技术分析气肿疽梭菌分泌蛋白的抗原组分,气肿疽梭菌感染小鼠的血清能与抗原组分蛋白发生反应,其中72、38、26 kD蛋白带显色最深。[结论]为气肿疽梭菌的深入研究提供了理论依据。  相似文献   

18.
唐少刚 《安徽农业科学》2006,34(20):5271-5271,5286
介绍了梅花鹿肠毒血症的临床症状,剖检变化及诊断方法,并对其中西医疗法进行了比较。  相似文献   

19.
冶贵生  张龙刚  康耀鹏 《安徽农业科学》2011,39(32):19681-19683
[目的]研究C型产气荚膜梭菌α毒素基因核苷酸序列的遗传变异特点。[方法]设计产气荚膜梭菌α毒素基因特异性引物进行PCR扩增,扩增产物纯化后测定核苷酸序列并与NCBI登录的参考序列通过DNAStar软件进行同源比对。[结果]序列分析表明,所测菌株α毒素基因核苷酸组成中腺苷酸含量较高,胞苷酸含量较低。所测菌株与13、C57-1、CER 89L43、S01、S08、T01以及T16菌株的核苷酸序列同源性分别为98.7%、98.7%、98.6%、98.8%、98.7%、97.0%、98.6%,推导的氨基酸序列同源性分别为98.6%、98.6%、98.9%、98.9%、98.9%、98.6%、98.6%。[结论]所测C型产气荚膜梭菌α毒素基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列与参考序列同源性均较高。  相似文献   

20.
Nitric oxide (NO) is extremely toxic to Clostridium botulinum, but its molecular targets are unknown. Here, we identify a heme protein sensor (SONO) that displays femtomolar affinity for NO. The crystal structure of the SONO heme domain reveals a previously undescribed fold and a strategically placed tyrosine residue that modulates heme-nitrosyl coordination. Furthermore, the domain architecture of a SONO ortholog cloned from Chlamydomonas reinhardtii indicates that NO signaling through cyclic guanosine monophosphate arose before the origin of multicellular eukaryotes. Our findings have broad implications for understanding bacterial responses to NO, as well as for the activation of mammalian NO-sensitive guanylyl cyclase.  相似文献   

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