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相似文献
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1.
为了评价由皱叶酸模、牛至、凉粉草、梁王茶四味中药组成的皱牛凉梁汤的抑菌效果及对急性感染致病性大肠杆菌鸡的治疗效果,试验应用药敏试验检测药物抑菌圈直径,通过药物安全性试验测定中药安全性,采用致死剂量测定试验测定菌液接种最佳致死量,最后人工诱发鸡大肠杆菌病模型治疗试验,并应用皱牛凉梁汤分别以高、中、低三个剂量(5,2.5,1.25 mL/500 mL水)对试验鸡进行灌服治疗,观察疗效,计算存活率、平均增重及胸腺、脾脏重量。结果表明:大肠杆菌对皱牛凉梁汤高度敏感,与卡那霉素相似。小鼠灌服中药后100%存活,未见毒性反应,各试验组小鼠平均增重与空白对照组差异不显著(P0.05)。0.5 mL菌液(浓度为1×10~7cfu/mL)为接种的最佳感染剂量。中药高、中、低三个剂量组、卡那霉素组、感染对照组、空白对照组的存活率分别为83.3%、83.3%、60%、86.7%、50%、100%。中药高、中剂量组鸡的平均增重、胸腺重量差异不显著(P0.05),但均显著高于中药低剂量组和卡那霉素组(P0.05);中药高、中剂量组与卡那霉素组鸡的脾脏重量不显著(P0.05),但均显著高于中药低剂量组和感染对照组(P0.05)。说明中药高、中剂量抗菌效果明显,与卡那霉素效果接近,中药低剂量效果不明显。  相似文献   

2.
为了评价由小鱼眼草、凉粉草、圆穗蓼、梁王茶4味中药组成的方剂抗鸡致病性大肠杆菌的效果，首先对病料进行分离鉴定，然后采用药敏试验测定药物抑菌圈直径，通过小鼠测定中药安全性，最后人工诱发大肠杆菌病模型治疗试验，并应用中药分别以高、中、低3个剂量（1、0.5和0.25 g/mL）对试验鸡进行灌服治疗。结果显示，麦康凯培养基上呈现红色菌落，革兰氏染色镜检见红色短小杆菌；生化鉴定结果显示，葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、吲哚和MR显阳性，三糖铁产酸产气，枸橼酸盐、VP和硫化氢显阴性。对分离细菌进行PCR检测，检测基因与对照基因均得到大小为1 466 bp的特异性条带。中药、西药环丙沙星抑菌圈直径分别为15.2和18.3 mm。小鼠灌服中药后全部存活，各试验组小鼠平均增重和空白对照组差异不显著（P>0.05），未见不良反应。中药高、中、低3个剂量组、环丙沙星组、感染对照组、空白对照组的存活率分别为96.7%、93.3%、63.3%、93.3%、50.0%和100%，中药高、中、低3个剂量组和环丙沙星组治愈率分别为96.7%、93.3%、63.3%和93.3%。中药高、中剂量组平均增重及胸腺重差异不显著（P>0.05），但显著高于中药低剂量组（P<0.05）；中药高、中剂量组和环丙沙星组脾脏重差异不显著（P>0.05），但显著高于中药低剂量组和感染对照组（P<0.05）。结果表明，1和0.5 g/mL中药口服液抗菌效果明显，与环丙沙星效果相似，中药低剂量效果不明显。  相似文献   

3.
为研究中药组方加味麻杏石甘汤对人工感染传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)雏鸡的保护作用及其作用机制,将240只15日龄雏鸡随机分为6组:健康对照组、IBV接种组、利巴韦林治疗组及加味麻杏石甘汤高、中、低剂量治疗组。IBV接种组及各治疗组雏鸡的接种病毒量为3×10-5.68EID50/0.3 mL,于攻毒后48 h进行治疗,剂量分别为0.01%利巴韦林和0.6%、0.4%、0.2%加味麻杏石甘汤。ELISA方法检测各组雏鸡血清中细胞因子γ干扰素(interferonγ,IFN-γ)与白介素4(interleukin 4,IL-4)含量。结果显示:IBV接种组雏鸡血清中IL-4水平显著升高,IFN-γ水平显著降低;经过药物干预治疗以后,血清中IL-4水平降低,IFN-γ水平提高。各药物治疗组之间,中药高、中剂量组IFN-γ水平高于低剂量组和利巴韦林组,IL-4水平较之偏低。可见,加味麻杏石甘汤可使IBV感染雏鸡血清中IFN-γ含量上调,IL-4含量下调,其保护机制可能是通过改善IBV感染导致的Th1/Th2失衡而起作用。  相似文献   

4.
为了评价由小鱼眼草、凉粉草、圆穗蓼、梁王茶4味中药组成的方剂抗鸡致病性大肠杆菌的效果,首先对病料进行分离鉴定,然后采用药敏试验测定药物抑菌圈直径,通过小鼠测定中药安全性,最后人工诱发大肠杆菌病模型治疗试验,并应用中药分别以高、中、低3个剂量(1、0.5和0.25 g/mL)对试验鸡进行灌服治疗。结果显示,麦康凯培养基上呈现红色菌落,革兰氏染色镜检见红色短小杆菌;生化鉴定结果显示,葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、吲哚和MR显阳性,三糖铁产酸产气,枸橼酸盐、VP和硫化氢显阴性。对分离细菌进行PCR检测,检测基因与对照基因均得到大小为1 466 bp的特异性条带。中药、西药环丙沙星抑菌圈直径分别为15.2和18.3 mm。小鼠灌服中药后全部存活,各试验组小鼠平均增重和空白对照组差异不显著(P0.05),未见不良反应。中药高、中、低3个剂量组、环丙沙星组、感染对照组、空白对照组的存活率分别为96.7%、93.3%、63.3%、93.3%、50.0%和100%,中药高、中、低3个剂量组和环丙沙星组治愈率分别为96.7%、93.3%、63.3%和93.3%。中药高、中剂量组平均增重及胸腺重差异不显著(P0.05),但显著高于中药低剂量组(P0.05);中药高、中剂量组和环丙沙星组脾脏重差异不显著(P0.05),但显著高于中药低剂量组和感染对照组(P0.05)。结果表明,1和0.5 g/mL中药口服液抗菌效果明显,与环丙沙星效果相似,中药低剂量效果不明显。  相似文献   

5.
采用“雏痢清”对雏鸡人工诱发大肠杆菌感染的预防和治疗效果试验。每一试验均分为健康对照组、感染对照组,“雏痢清”高、中、低剂量组和药物对照等6组,每组30只三周龄石歧杂雏鸡,试验前后每只鸡分别称重,试验期2周。预防试验:“雏痢清”在人工诱发大肠杆菌感染前1天按0.1％(C3组)、0.2％(C2组)、0.4％(C1组)添加饮水中,让雏鸡自由饮用5天(雏鸡感染后连续2—3天饮水和吃料均停止),结果痊愈率分别为16.7％(5/30)、63.3％(19/30)、93.3％(28/30);感染对照(B1)组10.0％(3/30);药物对照组(C4)为56.7％(17/30)。相对增重率分别为:37.63％、93.71％、104.32％、82.99％和64.89％。治疗试验:当人工诱发大肠杆菌3小时后,试验组按抗茵药含量5 mg/kg(D3组)、10 mg/kg(D2组)、20 mg/kg(D1组)人工灌服药物3天,自由饮用2天,结果其痊愈率分别为40.0％(12/30)、77.0％(23/30)、100.0％(30/30);感染对照(B2)组36.7％(11/30);药物对照组(D4)为93.3％(28/30)。相对增重率分别为74.19％、70.45％、69.31％、69.79％和54.36％。以上试验显示:“雏痢清”与剂量相同的抗菌药对雏鸡人工诱发大肠杆菌感染痊愈率方面比较,无显著性差异(P>0.05);在增重方面比较,无论是预防还是治疗,“雏痢清”显著比抗菌药高(P<0.05)。  相似文献   

6.
为评价白头翁颗粒对鸡大肠杆菌病的疗效,将试验鸡随机分为7个处理组,以健康雏鸡为空白对照,硫酸新霉素和白头翁汤为对照药物,对鸡大肠杆菌病进行预防和治疗试验。统计各处理组对人工感染鸡大肠杆菌病的保护率、发病率和治愈率、有效率及测定相对增重率、脏器指数。结果显示,白头翁颗粒中剂量组(150 mg/只)对鸡大肠杆菌病的预防效果优于硫酸新霉素,但差异不显著(P0.05)。白头翁颗粒高剂量组(600 mg/只)治愈率和有效率分别为71.43%和85.71%,治疗效果与硫酸新霉素相近(P0.05)。白头翁颗粒高剂量组和硫酸新霉素组的相对增重率、脏器指数均优于感染对照组。说明白头翁颗粒对鸡大肠杆菌病具有良好的预防和治疗效果,可缓解大肠杆菌引起的典型病理症状,降低雏鸡心脏和肝脏的受损。  相似文献   

7.
本试验将240只海兰褐雏鸡随机分为8组,每组30只,分别为金银花复方制剂高剂量组、中剂量组、低剂量组、中药对照组、西药对照组、疫苗对照组、阴性对照组、健康对照组。将试验鸡人工感染法氏囊病毒(IBDV)强毒,观察药物对雏鸡保护效果。结果表明:金银花复方制剂可以减弱IBDV强毒对雏鸡免疫器官的损害,对法氏囊强毒感染雏鸡具有明显的保护作用。  相似文献   

8.
抗菌肽CecropinB对人工感染大肠杆菌雏鸡的治疗效果研究   总被引：1，自引：1，他引：0  
以1日龄来航蛋雏鸡为试验对象,研究重组抗菌肽CecropinB治疗雏鸡大肠杆菌感染的效果.120只雏鸡分6个组,每组20只,其中不同剂量抗菌肽治疗组又分为口服和肌内注射两个不同的处理,每个处理10只.致死剂量大肠杆菌肌内注射24 h后,肌内注射和口服不同浓度的重组CecropinB抗菌肽,连续治疗5 d.结果表明,重组抗菌肽CecropinB对大肠杆菌病有较好的治疗效果.其中高剂量(0.75 mL)口服组的效果最佳,治愈率达到80%,中剂量(0.5 mL)口服组与高剂量肌内注射组治愈率同为70%.中剂量肌内注射组与环丙沙星组效果一致,治愈率达到60%,低剂量抗菌肽治疗组治疗效果不如上述所有治疗组.与感染对照组相比,所有组别的雏鸡死亡率显著降低.  相似文献   

9.
为了探讨复方盐酸小檗碱对雏鸡大肠杆菌病的临床疗效,本试验选用240只2周龄海兰褐商品代公鸡,随机分为6组,每组40只,第1组为健康对照组;.第2组为感染对照组;第3~5组分别为复方盐酸小檗碱高、中、低剂量组;第6组为诺氟沙星对照组。试验结果表明:复方盐酸小檗碱可溶性粉剂对雏鸡大肠杆菌感染治疗效果明显,治愈率为75.0%~92.5%,推荐剂量为1.5g/kg。  相似文献   

10.
考察青蒿、诃子、苦参、柴胡、黄芪、山楂、木香7味中药组成的复方中药制剂对鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的防治效果。选取120只健康雏鸡,随机分为6组,除空白对照组外,其余各组(阳性对照组,药物对照组及复方中药低剂量组、中剂量组、高剂量组)试验鸡均经口感染1.5×10~4个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,考察各组试验鸡相对增重率、病变值、抗球虫指数ACI、相对球虫卵囊产量及血清生化指标等,评价不同剂量复方中药制剂的抗球虫效果。结果显示,复方中药中剂量组与低剂量、高剂量、磺胺氯吡嗪钠组的相对增重均有显著差异(P<0.05)。ACI与相对卵囊产量统计结果表明,复方中药低剂量组与中剂量组之间无显著差异(P>0.05),且均呈低效抗球虫作用。同时,复方中药中剂量组的耗料量增长率最高,雏鸡总蛋白、白蛋白、总胆固醇等3个生化指标均在攻虫第7天呈升高趋势。复方中药3个试验组雏鸡丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶水平在攻虫后均呈升高趋势,但未达到肝损伤标准。结果表明,该中药复方制剂中剂量浓度有一定的抗球虫作用,可促生长,且在推荐的剂量下使用安全。  相似文献   

11.
The experiment was aimed to detect the effect of lactic acid bacteria yeast matching with traditional Chinese medicine (TCM) on efficacy of TCM preventing chicks from colibacillosis.The CTCML compound used in the experiment was composed of effective TCM formula to chick colibacillosis and lactic acid bacteria yeast.Chicks were artificially infected with E.coli for disease model by injecting 0.2 mL (9×108 CFU/mL) E.coli culture into breast muscles.144 eight-day-old chicks were divided into 9 groups,in which CTCML high-dose,middle-dose and low-dose groups were treated with CTCML particles at the dose of 0.6,0.4 and 0.2 g/d respectively before chicks being infected,and mixing the extract liquid of CTCML with drink at the dose of 0.3,0.2 and 0.1 mL/d respectively after chicks being infected.Three TCM high-dose,middle-dose and low-dose groups were treated with TCM at the same doses as CTCML groups.The drug control group was treated with ciprofloxacin hydrochloride.Meanwhile,the infection control group and normal control group were set up.The survival rates of CTCML high-dose,middle-dose and low-dose groups,TCM high-dose,middle-dose and low-dose groups,drug control group,infection control group and normal control group were 75.00%,75.00%,93.75%,68.75%,68.75%,75.00%,75.00%,56.25% and 100.00%,respectively.There were significant differences between CTCML low-dose group and CTCML high-dose and middle-dose groups,TCM high-dose,middle-dose and low-dose groups,drug control group,infection control group (P<0.05).But there were no significant differences between CTCML high-dose and middle-dose groups,TCM high-dose,middle-dose,low-dose groups and drug control group each other (P>0.05).The rate of weight gain of CTCML low-dose group was lower by 29.93% than that of normal control group.CTCML low-dose group had the lowest effect on weight gain of chicks in all infection groups.Compared to normal control group,the rate of weight gain of CTCML middle-dose group reduced by 36.95%,the rate of weight gain of other infection groups reduced by 42.49% to 51.07%.The results showed that TCM was effective on protecting chicks from E.coli infection and the lactic acid bacteria had obvious synergistic effect on TCM.  相似文献   

12.
【目的】 探究大肠杆菌噬菌体BP16对O2血清型禽致病性大肠杆菌感染引起的鸡大肠杆菌病的防治效果, 以及噬菌体BP16的最佳治疗剂量。【方法】 将O2血清型禽致病性大肠杆菌新鲜培养物稀释成5×1010、5×109、5×108、5×107和5×106 CFU/mL 5个浓度梯度, 以测定禽致病性大肠杆菌的半数致死量(LD50), 确定其感染剂量; 选取常用的对革兰阴性菌有抑菌或杀菌作用的药敏纸片进行药敏试验, 筛选出阳性对照药物; 经无菌试验和安全性试验确定噬菌体裂解液的无菌性及安全性, 用于后续试验。将80只雏鸡随机分为5个试验组与3个对照组, 试验组在雏鸡攻毒前后不同时间腹腔注射大肠杆菌噬菌体BP16, 3个对照组分别腹腔注射氟苯尼考、大肠杆菌菌液、生理盐水, 其余条件一致, 连续饲养7 d, 记录雏鸡的死亡率, 评价大肠杆菌噬菌体BP16对大肠杆菌人工感染试验鸡的防治效果。【结果】 O2血清型大肠杆菌的LD50为1.5×108 CFU/mL, 筛选出氟苯尼考作为阳性对照药物, 噬菌体裂解液中无菌, 噬菌体悬液对雏鸡安全, 可用于后续防治试验。雏鸡感染大肠杆菌前6 h使用噬菌体能有效预防大肠杆菌病, 在感染同时至感染后6 h内使用噬菌体, 能有效治疗大肠杆菌病, 且噬菌体治疗效果优于氟苯尼考; 当大肠杆菌攻毒剂量为1.5×108 CFU时, 噬菌体剂量为1.5×109 PFU时治疗效果为最佳。【结论】 大肠杆菌噬菌体BP16对大肠杆菌病具有防治作用, 本研究为进一步应用噬菌体防治大肠杆菌病及开发大肠杆菌噬菌体制剂提供了科学依据。  相似文献   

13.
This experiment was designed to study the complex of Lactobacillus rhamnosus fermented herbal and Bacillus subtilis on White Feather broiler immunity performance and impact of Escherichia coli infection.360 one-day-old broiler chickens were randomly divided into 3 groups with 4 replicates in each group and 30 chickens per replicate.The pretrial period lasted for 7 d,and the experiment lasted for 35 d.The chickens in the group Ⅰ(positive control group) and group Ⅱ(negative control group)were all only fed a basal diet,group Ⅲ was test group,by additive 1% fermented herbal preparations,groups Ⅱ and Ⅲ were intraperitoneal injection of 1 mL E.coli at 35 d,broiler mortality,immune organ index,cecalmicroflora content,immunoglobulin levels,IL-2 and IL-6 content were tested.The results showed that injection of E.coli caused massive death of chickens,group Ⅱtook up to 75.00%,it was significantly higher than groups Ⅰ and Ⅲ (P < 0.05),the mortality in group Ⅲ was significantly lower than group Ⅱ(P < 0.05),was only 23.33%.Injection of E.coli maked spleen index and thymus index of group Ⅱincreased significantly (P < 0.05),the spleen index and thymus index of groups Ⅰ and Ⅲ were no significant difference (P > 0.05).E.coli counts was significantly decreased after injectionin group Ⅲ (P < 0.05),but the number of intestinal Lactobacilli of group Ⅲ was significantly increased (P < 0.05),and inhibited the propagation of E.coli,the counts of E.coli in groups Ⅰ and Ⅲ were no significant difference (P > 0.05).At 42 d,the sIgA of the intestinal fluid in group Ⅲ were higher than that of groups Ⅰ and Ⅱ with 11.99% and 36.56%,respectively(P < 0.05).The serum IgG concentrations of group Ⅲ was higher than that of groupsⅠand Ⅱwith 14.68% and 28.15%,respectively(P < 0.05).At 42 d,the IL-2 content of group Ⅱ was the lowest,it was significantly lower than group Ⅲ(P < 0.05),the IL-6 of group Ⅲ was significantly lower than group Ⅱ(P < 0.05).  相似文献   

14.
试验旨在研究鼠李糖乳杆菌发酵中草药复合枯草芽孢杆菌对白羽肉鸡生长后期免疫性能及大肠杆菌感染的影响。选取体重相似、健康状况基本相同的360只1日龄肉鸡随机分成3个组,每组4个重复,每个重复30只。试验预试期7 d,正试期35 d。试验Ⅰ组为阳性对照组,试验Ⅱ组为阴性对照组,均饲喂基础日粮,试验Ⅲ组在基础饲料中添加1%发酵中草药制剂,且试验Ⅱ、Ⅲ组在肉鸡35日龄时腹腔注射大肠杆菌菌悬液1 mL,连续攻毒2 d,测定肉鸡死亡率、免疫器官指数、盲肠菌群含量、免疫球蛋白水平和白介素含量。结果表明,腹腔注射大肠杆菌造成鸡大量死亡,试验Ⅱ组高达75.00%,显著高于试验Ⅰ、Ⅲ组(P < 0.05),使用发酵中草药微生态制剂后鸡死亡率显著下降(P < 0.05),仅有23.33%;注射大肠杆菌后试验Ⅲ组脾脏指数和法氏囊指数显著升高(P < 0.05),但使用发酵中草药微生态制剂后脾脏指数接近于试验Ⅰ组,而法氏囊指数稍高于试验Ⅰ组,说明发酵中草药微生态制剂可以抵抗大肠杆菌感染,脾脏和法氏囊发育不受影响;注射大肠杆菌后试验Ⅲ组大肠杆菌数量显著下降(P < 0.05),但试验Ⅲ组由于饲喂发酵中草药复合芽孢杆菌制剂,肠道乳杆菌数量显著增加,抑制大肠杆菌的繁殖,从而大肠杆菌数量与正常饲喂状态下的试验Ⅰ组趋于一致;42日龄时,盲肠内容物sIgA含量试验Ⅲ组分别高出试验Ⅰ、Ⅱ组11.99%和36.56%(P < 0.05),血清IgG含量试验Ⅲ组分别高出试验Ⅰ、Ⅱ组14.68%和28.15%(P < 0.05);42日龄时,试验Ⅱ组IL-2含量最低,显著低于试验Ⅲ组(P < 0.05),试验Ⅲ组IL-6含量显著低于试验Ⅱ组(P < 0.05)。  相似文献   

15.
为研究鸭大肠杆菌的致病性及相关生物特性,本试验从西昌市某规模化鸭场采集病料,通过传统分离培养及理化性质鉴定,分离得到27株鸭致病性大肠杆菌。对27株鸭致病性大肠杆菌进行血清型鉴定、药敏试验、相关毒力基因检测。血清型鉴定结果显示,优势血清型为O119、O86、O126、O142和O44,占分离株55.56%。血清型O119占27株鸭致病性大肠杆菌的40.74%,为该鸭场流行的致病血清型。对20种兽医临床常用药物的药敏试验结果显示,27株鸭致病性大肠杆菌均对阿米卡星、庆大霉素和多黏菌素B敏感,对头孢曲松等10种药物较敏感,对利福平等5种药物耐受。大肠杆菌相关毒力基因检测结果显示, iutA、hlyF、Iss、IroN、ompT、fyuA、irp 2、Tsh及papA基因携带率均为100.00%, fimC基因携带率59.26%, K 99基因携带率7.40%。各项研究结果为有效防控鸭大肠杆菌病提供了重要科学依据,并为大肠杆菌深入研究奠定了基础。  相似文献   

16.
旨在探究苦参苍术颗粒是否通过调节肝组织胆固醇代谢，改善致病性大肠杆菌诱导的肉鸡肝组织胆固醇合成异常。将40只21日龄白羽肉鸡随机分为空白对照组、模型对照组、苦参苍术低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组8只。模型对照组和苦参苍术组分别胸部肌肉注射0.7 mL致病性大肠杆菌菌液(8.37×108 CFU·mL-1),苦参苍术组在接种菌液24 h后，在饮水中分别添加不同剂量的苦参苍术颗粒(低剂量组：3.6 g·L-1,中剂量组：5.5 g·L-1,高剂量组：7.3 g·L-1),自由饮水，连用7 d。试验结束，所有试验肉鸡处死，收集血液，采集组织样品，称体重和各器官重；采用石蜡切片技术观察肝组织形态变化；检测血清和肝组织中总胆固醇(total cholesterol, TCH)、甘油三酯(hepatic triglyceride, TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein-cholesterol, HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-densi...  相似文献   

17.
贵州部分地区猪源大肠杆菌耐药性分析及ESBLs基因型检测   总被引：3，自引：0，他引：3  
为了解贵州地区规模养猪场大肠杆菌菌株耐药情况和ESBLs基因型的流行情况,试验采用CLSI推荐的方法对采自贵州省4个地区规模养猪场的164株大肠杆菌进行药物敏感性试验和产ESBLs菌的检测,并用PCR方法对TEM、SHV、OXA-1和CTX-M-1 4种常见ESBLs基因进行检测。结果显示,164株大肠杆菌对10种常用抗菌药物耐药率分别是头孢噻呋93.29%、氨苄西林87.19%、四环素86.59%、庆大霉素81.10%、链霉素53.66%、多黏菌素51.83%、环丙沙星53.05%、卡那霉素47.56%、金霉素34.76%和氟苯尼考21.95%,且大多为多重耐药,其中检测出ESBLs阳性菌株137株,阳性率为83.54%,各个地区的检出率不同;137株产ESBLs大肠杆菌中,TEM、SHV、OXA-1和CTX-M-1基因的检出率分别为90.51%、70.07%、51.82%和43.07%,且多为复合基因型耐药菌株,各地区的各种基因检出率不同。试验结果表明,贵州部分地区的猪源大肠杆菌耐药现象严重,ESBLs菌株的检出率很高,耐药基因的检出率也极高,且多为复合基因型耐药菌株,应加强当地产酶耐药菌的监测和研究,有效防制此类细菌引发的疾病。  相似文献   

18.
试验旨在研究大肠杆菌（E.coli）对奶牛子宫内膜上皮细胞（bovine endometrial epithelial cells,BEECs）的体外炎性损伤,探究大肠杆菌引发炎性反应的最佳浓度、作用时间及机制。首先,用不同浓度的大肠杆菌（5×104、5×105、1×106、2.5×106、5×106 CFU/mL）诱导刺激细胞3、6和9 h,通过倒置显微镜观察细胞形态、CCK-8法测D450 nm值,检测大肠杆菌对细胞活性的影响;其次,用不同浓度的大肠杆菌（5×104、5×105 CFU/mL）处理细胞3、6和9 h,用ELISA方法检测细胞上清液中白介素-1β（IL-1β）、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的分泌量;最后,用不同浓度的大肠杆菌（5×104、5×105 CFU/mL）处理细胞6和9 h,用Western blotting检测核因子κB抑制蛋白α（IκBα）和p65蛋白的磷酸化水平。结果显示,与对照组相比,大肠杆菌感染细胞9 h后,1×106、2.5×106和5×106 CFU/mL大肠杆菌组细胞活性均极显著降低（P<0.01）,5×105 CFU/mL大肠杆菌组显著降低（P<0.05）;大肠杆菌感染细胞9 h后,5×105 CFU/mL大肠杆菌组IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α极显著升高（P<0.01）;大肠杆菌感染细胞6 h后,5×105 CFU/mL大肠杆菌组IκBα、p65蛋白磷酸化水平和IL-6均极显著升高（P<0.01）,5×104 CFU/mL大肠杆菌组IκBα和p65蛋白磷酸化水平显著升高（P<0.05）。结果表明,大肠杆菌可以刺激奶牛子宫内膜上皮细胞产生炎性反应,且当细胞与5×105 CFU/mL大肠杆菌作用6 h或与5×104 CFU/mL大肠杆菌作用9 h为最佳。  相似文献   

19.
本研究旨在通过网络药理学联合16S rDNA高通量测序技术分析丹参对感染大肠杆菌小鼠肠道菌群的影响。利用传统中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）筛选丹参有效成分及靶点基因。使用基因数据库（Genecards）获得E.coli靶点基因。两者靶点基因取交集,通过STRING平台进行蛋白质相互作用分析,构建PPI网络,并运用Cytoscape 3.8.2软件构建“丹参活性成分-潜在作用靶点”网络。利用DAVID在线工具进行基因本体论（GO）功能富集分析,Metascape数据库进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。试验选用110只雄性昆明小鼠,随机分为对照组、大肠杆菌组和低、中、高剂量丹参大肠杆菌感染组,每组22只。连续灌胃丹参液28 d后,用E.coli O101进行腹腔注射,对照组注射无菌生理盐水,观察24 h后,收集各组粪便。应用16S rDNA高通量测序技术对各组小鼠肠道菌群进行分析。结果显示：1）网络药理学丹参有效成分36个,作用靶点669个,Genecards数据库搜索E.coli靶点8 902个,对两者取交集去除孤立点获得丹参治疗E.coli潜在靶点51个;GO、KEGG分析,获得关键靶点18个、关键通路47条,其中生物过程（BP）、分子功能（MF）和细胞成分（CC）各为174、76、45条;2）通过Illumina Miseq测序共获得950 855条有效序列,2 537个操作分类单元（OTUs）;3） Alpha多样性分析结果表明,不同剂量丹参组肠道菌群多样性与对照组具有显著差异,大肠杆菌组肠道菌群多样性显著低于对照组（P<0.05）;4）相比于大肠杆菌感染组,在门水平上,低、中、高剂量丹参大肠杆菌感染组Bacteroidetes （拟杆菌门）丰度极显著增高（P<0.01）,Firmicutes （厚壁菌门）丰度显著增高（P<0.05）,Proteobacteria （变形菌门）极显著降低（P<0.01）,在属水平上Bacteroides（拟杆菌属）丰度极显著增高（P<0.01）;5）基于LEfSe分析,对照组、大肠杆菌感染组、丹参高剂量大肠杆菌感染组共发现14种显著差异菌群;6） PICRUSt功能预测分析发现,丹参对大肠杆菌感染小鼠肠道菌群调节功能主要富集的途径是氨基酸、碳水化合物运输与代谢,翻译、核糖体结构和生物转化,细胞壁/膜/生物合成等方面。综上,基于网络药理学联合16S rDNA高通量测序技术全面揭示了丹参多成分、多靶点、多途径调节相关菌群生物丰富度,对大肠杆菌感染小鼠的肠道菌群紊乱有缓解作用,为临床应用丹参治疗大肠杆菌感染提供理论依据。  相似文献   

20.
To analyze the pathogenicity and biological characteristics of duck E.coli, 27 strains of duck pathogenic E.coli were isolated from dead ducks with the typical characterize of colibacillosis by isolation and culture, physical and chemical properties identification in Xichang city.O serotype identification, drug sensitivity test and virulence associated genes were detected in 27 strains of duck pathogenic E.coli.The result showed that the predominant serotypes were O119, O86, O126, O142 and O44, which accounted for 55.56%.O119 was the epidemic and pathogenic serotype in this farm, which accounted for 40.74% in 27 strains of duck pathogenic E.coli.Through the drug sensitivity test of 20 kinds of clinical commonly used drugs, we found that all strains were sensitive to amikacin, gentamicin and polymyxin B.Besides, 10 drugs(ceftriaxone, etc) were lightly sensitive.However, these strains were resistant to 5 kinds of drugs(rifampicin, etc).The detection result of PCR about virulence associated genes indicated that the positive of iutA, hlyF, Iss, IroN, ompT, fyuA, irp 2, Tsh and papA genes were 100.00%, fimC and K 99 genes were 59.26% and 7.40%, respectively.The results provided an important reference for effective prevention and control of duck colibacillosis, and laid the foundation for further study of E.coli.  相似文献   

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