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摘要 鱼类胚胎冷冻保存经过多年研究,尽管有所突破,但目前仍未达到应用水平,其主要原因是由于鱼类胚胎体积大、卵膜通透性差等特点,导致传统的平衡法,无法使抗冻剂足够、有效的进入胚胎内部起到保护胚胎的作用。而在鱼类胚胎冷冻保存中利用显微注射技术,可直接将抗冻剂注射到鱼类胚胎卵黄囊内,这一定程度上弥补了普通平衡法的不足,提高抗冻剂对胚胎的保护程度。本研究主要对抗冻剂的选择、抗冻剂对牙鲆胚胎的注射剂量、注射浓度、以及注射后牙鲆胚胎的冷敏感性进行了比较分析。结果表明:1、牙鲆胚胎较适宜的显微注射剂量为750pl。2、几种抗冻剂注射牙鲆胚胎后的毒性大小相对排列为PVP>蔗糖,DMSO > MeOH > PG,其中注射PG获得的胚胎成活率和孵化率最高,注射PVP获得的胚胎成活率和孵化率最低,而PG与MeOH组成混合抗冻剂PM毒性更低获得的胚胎成活率和孵化率更高。而任何一种抗冻剂均随着浓度的增加其毒性随之增加。3、另外,在冷敏感实验中,显微注射6M的PM的胚胎胚胎,应用程序化法处理,以2℃/min的速率降至-20℃,平衡10min后解冻处理,发现注射PM的胚胎低温处理后成活率为25.07±1.57%,而6M的PM五步平衡法同步处理的对照组胚胎成活率为20.88±2.84%,说明显微注射的胚胎冷敏感性一定降低。 相似文献
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张忠诚 《农业工程技术:农产品加工》2000,(2)
动物科技学院动物繁殖教研室的自选研究课题“哺乳动物胚胎玻璃化冷冻保存技术的研究与应用”于1999年12月18日通过鉴定。专家委员会认为:该项目在系统研究哺乳动物胚胎对几种常见抗冻剂的耐受性和细胞膜通透性的基础上,结合抗冻剂的化学特点,研制出在常温下高效、低毒的冷冻保护液EFS和GFS,并建立了简易、快速、稳定的胚胎玻璃化冷冻技术方法。运用这种技术方法已成功地对小鼠、家兔、绵羊和牛的体内、外受精胚胎及显微操作胚胎进行了玻璃化冷冻保存。冷冻胚胎解冻后的体内、外继续发育率高于国内同类研究水平,达到或超过本… 相似文献
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<正> 自从Whittngham发现经超低温冷冻保存的小鼠胚胎可以成活后,超低温冷冻保存哺乳动物胚胎的方法取得很大进展。目前许多国家都在对不同的胚胎冷冻保护技术进行探讨,如加入冷冻保护剂的种类和浓度、冷冻程序的选择、脱除保护剂的方法等,试图寻找一个胚胎冷冻和解冻的最佳方案。我们从87年开始从事这方面的研究,其目的是探索胚胎冷冻的方法和步骤、寻找适宜于基层生产单位应用的解冻和脱除冷冻保护剂的简易方法。为今后胚胎移植的推广应用打下基础。 相似文献
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赵尚林 《上海海洋大学学报》1994,(3):168-173
低温生物学技术的问世,为人类控制利用生物资源提供了有效的手段。畜牧业、医疗保健已率先尝受到了这一技术成果,当今家畜胚胎的低温保存令人振奋鼓舞,其应用程度已遍及全球了。然而鱼类胚胎的冷冻保存研究进展几乎是停滞的,原因不外现行试验研究手段受限以及鱼卵与胚胎的自身特性所致。近年我们对此也进行了初步的探索,并就此课题的研究前景借本文一并讨论。 相似文献
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赵尚林 《上海水产大学学报》1994,3(3):168-173
低温生物学技术的问世,为人类控制利用生物资源提供了有效的手段。畜牧业、医疗保健已率先尝受到了这一技术成果,当今家畜胚胎的低温保存令人振奋鼓舞,其应用程度已遍及全球了。然而鱼类胚胎的冷冻保存研究进展几乎是停滞的,原因不外现行试验研究手段受限以及鱼卵与胚胎的自身特性所致。近年我们对此也进行了初步的探索,并就此课题的研究前景借本文一并讨论。 相似文献
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本研究的目的在于建立绵羊胚胎的慢速冷冻和玻璃化快速冷冻保存方法,为绵羊胚胎移植技术应用于生产提供保证。结果:慢速冷冻保存,解冻后正常胚胎占72%,移植受体的受胚率33%、产羔率66%。玻璃化快速冷冻保存,解冻后正常胚胎率亦达72%,移植受体3只,产羔4只。 相似文献
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随着我国工业和化学技术的飞速发展,工业废水、化工污染及人类生活对水资源的污染问题日益严重。作为鱼类赖以生存的环境,水资源的污染情况已经严重影响到鱼类的正常生存发展。本研究就当前我国水污染对鱼类性腺及胚胎的发育影响展开分析,从对鱼的生理、神经及胚胎等方面的影响进行具体研究,以期全面改善水资源环境,促进鱼类的正常生长。 相似文献
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哺乳动物胚胎冷冻保存研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]介绍哺乳动物胚胎冷冻保存技术的最新研究进展。[方法]从冷冻原理、防冻剂种类、冷冻方法、解冻方法等方面综述了哺乳动物胚胎冷冻保存技术的最新研究进展。[结果]胚胎冷冻保存的原理是阻止冷冻、解冻过程中细胞内形成致死冰晶;防冻剂的种类大致分为低分子量渗透性防冻剂、低分子量非渗透性防冻剂、大分子物质、生物活性物质;胚胎冷冻方法主要有常规慢速冷冻法、玻璃化冷冻法和快速冷冻法;解冻方法主要介绍了快速解冻。[结论]胚胎冷冻保存技术的应用愈加广泛,将对胚胎生物工程和其他生物技术产生推动作用。 相似文献
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渤海黑牛目前存栏量急剧下降,亟需对这一宝贵种质资源进行抢救性保护。本试验选用青年牛作为供体进行超数排卵处理,研究季节、促卵泡素(FSH)来源、饲粮成分对其超数排卵效果的影响,并将获得的可用胚胎利用冷冻载杆进行玻璃化冷冻保存。结果表明:(1)春季头均可用胚数、胚胎可用率显著高于冬季(P<0.05);(2)使用国产FSH渤海黑牛的超排有效率、头均胚胎数、头均可用胚数、胚胎可用率显著低于进口FSH(P<0.05);(3)含胚芽玉米组超排有效率、头均胚胎数、头均可用胚数、胚胎可用率均显著高于不含胚芽玉米组(P<0.05);(4)玻璃化冷冻保存85枚胚胎,胚胎冷冻可用率为82.52%,杆均胚胎数为2.30枚。本试验为渤海黑牛体内胚胎生产及种质资源保存提供了一定的参考。 相似文献
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以小鼠卵丘细胞为供核细胞,猪体外成熟去核卵母细胞为受体,构建小鼠-猪种间体细胞核移植(iSCNT)胚胎,并以猪体细胞核移植(pSCNT)胚胎为对照,采用开放式拉长细管(OPS)法对所获iSCNT胚胎进行冷冻保存,研究不同冷冻保护液(ES、EFS和EDFS)及胚胎不同发育阶段(2-、4-、8-细胞)对冷冻效果的影响。结果显示:小鼠-猪iSCNT胚胎卵裂率与猪pSCNT胚胎相比无显著差异(P>0.05),但其8-细胞发育率则明显较低(28.1%对56.8%,P<0.05)。采用ES液作为冷冻保护液,iSCNT胚胎冻后存活率与EDFS组相似,但显著高于EFS组(28.6%和22.7%对9.5%,P<0.05);与其他发育阶段相比,2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎可获得最高的冻后存活率;小鼠-猪iSCNT各期胚胎的冻后存活率均低于pSCNT组,但无统计学差异(P>0.05)。结果表明,以ES液为冷冻保护液,选择2-细胞期小鼠-猪iSCNT胚胎进行OPS法冷冻保存,可获得相对较高的冻后存活率,但iSCNT胚胎的冻后存活率和体外发育能力均较pSCNT胚胎低。 相似文献
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周颂成 《上海交通大学学报(农业科学版)》1987,(3)
本文叙述了胚胎移植及胚胎冷冻保存新技术的操作过程。其中包括:①激素超排处理;②受精卵收集;③胚胎冷冻保存;④胚胎解冻;⑤胚胎移植等。同时就其操作方法从理论上给以分折讨论。 相似文献
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21世纪哺乳动物胚胎生物工程发展趋向 总被引:2,自引:2,他引:0
动物胚胎生物工程主要是指在实验室条件下,对动物胚胎进行人为干预、改造和操作,按照人们的意愿生产某种性别或特定功能动物的实践。进入21世纪以来,动物胚胎生物工程技术发展迅速,研究不断深入,在动物配子/胚胎超低温冷冻保存、MOET育种、性别鉴定与控制、转基因、克隆和胚胎干细胞分离与培养技术等研究领域取得了令人瞩目的成就,同时也突现了许多新的研究热点和存在的问题。该文围绕哺乳动物配子与胚胎生物工程中几个热点研究进行简述。 相似文献