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鳙鱼不同组织基因组DNA提取方法的探讨 总被引：2，自引：0，他引：2
分别采用试剂盒和常规苯酚/氯仿抽提法提取新鲜的鳙鱼肌肉、肝脏、尾鳍以及用乙醇保存的3种组织基因组DNA,并对其进行综合分析。结果表明,对3种组织的新鲜样品2种方法均能提取高质量的DNA,而用乙醇保存的3种组织,DNA样品质量最好的是尾鳍,其次是肌肉,肝脏最差;总的来看,试剂盒法提取的DNA纯度较好,但是浓度低,而苯酚法得到的DNA浓度高,质量好,且相对成本低。综合比较,苯酚/氯仿抽提法提取乙醇保存的尾鳍组织基因组DNA是一种行之有效的方法,可以在鱼类分子研究中推广应用。 相似文献
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不同固定剂及固定时间对三角帆蚌DNA提取效果比较 总被引：2，自引：0，他引：2
以三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)为对象,研究了无水乙醇,95%乙醇,4%多聚甲醛,福尔马林溶液,TE缓冲液5种固定剂不同固定时间对三角帆蚌斧足DNA提取质量及PCR扩增的影响。结果显示95%乙醇固定后提取的三角帆蚌基因组DNA降解少,DNA浓度高,OD260/OD2 8 0在1.8~2.0之间,OD260/OD230在1.5左右,表明95%乙醇固定后三角帆蚌基因组DNA的提取质量最好,再依次为无水乙醇、福尔马林溶液、4%多聚甲醛,DNA提取质量最差的是用TE固定的三角帆蚌。 相似文献
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<正> 随着分子生物学的迅速发展,体外进行DNA操作已成为现实。鱼类基因文库的构建,就是分子生物学技术在水产研究方面的应用实例。所谓鱼类基因文库,就是应用DNA体外重组技术,将某种鱼的全部基因组的遗传信息,贮存在可以长期保存的重组体之中,以备需要时应用。这种长期保存基因的方法好象文献资料贮存在图书馆中一样,所以称为鱼类的基因文库。 相似文献
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三角帆蚌不同组织基因组DNA提取效果比较 总被引：1，自引：0，他引：1
利用平衡酚-氯仿法分别提取三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)斧足、鳃、闭壳肌、性腺、肝脏、心脏中的基因组DNA,采用紫外分光光度测定法、琼脂糖凝胶电泳法、PCR扩增法分析三角帆蚌不同组织基因组DNA的提取质量.结果表明,三角帆蚌6个组织均能成功地提取基因组DNA,但提取的DNA质量存在差异;斧足中提取的DNA纯度、浓度最高,PCR扩增的条带最亮,因而是三角帆蚌提取DNA的最佳组织;其次是肝脏和闭壳肌,心脏和性腺提取的DNA较差. 相似文献
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利用平衡酚-氯仿法分别提取三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)斧足、鳃、闭壳肌、性腺、肝脏、心脏中的基因组DNA,采用紫外分光光度测定法、琼脂糖凝胶电泳法、PCR扩增法分析三角帆蚌不同组织基因组DNA的提取质量。结果表明,三角帆蚌6个组织均能成功地提取基因组DNA,但提取的DNA质量存在差异;斧足中提取的DNA纯度、浓度最高,PCR扩增的条带最亮,因而是三角帆蚌提取DNA的最佳组织;其次是肝脏和闭壳肌,心脏和性腺提取的DNA较差。 相似文献
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小球藻生物量的快速测定技术研究 总被引：3，自引：0，他引：3
选取540~700 nm中11个波长对不同密度的小球藻进行吸光值测定,同时对其进行精确计数和干重测定,结果表明:(1)在11个波长下,小球藻吸光值与细胞密度存在理想的线性关系,线性系数r0.999,其中以680 nm波长处最为灵敏,其次为540 nm;(2)小球藻吸光值与细胞干重之间同样存在良好的线性关系:Y(g/L)=0.25 X(OD680)-0.001 5,线性系数r0.999。表明光密度法能快速且准确地测定小球藻生物量。与传统的细胞计数法和叶绿素a测定法相比,光密度法更方便、快捷,能极大地提高实验效率和准确度。 相似文献
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以刺参肠组织为材料,通过蛋白质提取方法、上样前处理方法、上样量以及聚焦条件的优化,建立了刺参肠组织蛋白质双向电泳技术体系.试验结果表明,采用TCA-丙酮沉淀法制备刺参肠组织蛋白质,能够得到高纯度的蛋白质提取液.刺参样品上样前不经过处理,等电聚焦电压1 000V,电流7mA,聚焦时间3h,平衡时间30min,最佳上样量25μg,pH 4～6.5、8.5cm的IPG胶条,银染能获得较好的双向电泳图谱.通过蛋白质双向电泳体系的优化,获得了刺参肠组织的蛋白质表达图谱,为进一步研究刺参差异表达蛋白的筛选及蛋白质组学研究提供技术保障 相似文献
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研究了用紫外分光光度法测定嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）菌液浓度的可行性。随机选取东北三省嗜水气单胞菌分离株（H、J和L）接种于胰蛋白胨大豆肉汤（TSB）培养基中,培养0、3、6、9、12,及24h取样,每个样品5个平行。用紫外分光光度计（入=600nm）测定菌液OD值,同步采用10倍系列稀释法测定平皿菌落个数（CFU）。建立起H、J和L菌株OD值与CFU的回归方程式分别为：y=134．34x＋5．5206;y=135．86x＋3．1397和v：142．87x一3．7068。测定结果表明：当OD值为1时,菌液的浓度约为1．4×107CFU·mL-1。采用紫外风光光度计法测定菌液浓度时,应注意菌液浓度和培养时间的影响。 相似文献
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研究了聚乙二醇法、硫酸铵法、EDTA-Na2法及尿素法提取的琼脂糖在得率和品质上的差异。结果表明,4种方法提取的琼脂糖在得率和品质方面都具有较大的差别;EDTA-Na2法琼脂糖的得率最高,为62．3％;聚乙二醇法琼脂糖中的硫酸根和灰分含量最低,分别为1．39％和O．42％;尿素法琼脂糖的结晶紫电泳性能最好,其电泳长度为8．6cm;EDTA-Na2法琼脂糖的聚乙二醇电泳性能最好,电泳长度为3．9cm。随着聚乙二醇法提取次数的增加,琼脂糖纯度和质量显著提高。用聚乙二醇法提取3次所获得的琼脂糖的各项质量指标比其他3种方法获得的琼脂糖都好。 相似文献
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高效液相色谱一电感耦合等离子体质谱联用技术测定海产品中5种形态砷 总被引：1，自引：0，他引：1
建立了海产品中5种形态砷（As）的高效液相色谱一电感耦合等离子体质谱联用测定方法。将样品冷冻干燥后采用矿（甲醇）：V（水）=3：1溶液,70℃水浴振摇30rain提取1次,再用y（甲醇）：y（水）=1：1溶液提取2次,提取液用阴离子交换柱分离,以20mmol·L-1碳酸铵[碳酸氢铵（NH。HCO,）＋氨基甲酸铵（NH：COONH。）]为流动相,用电感耦合等离子体质谱检测。5种As的检出限为0．057～0．13μg·L-1,定量限为0．19～0．43μg·kg。添加回收率为83．2％～115％,相对标准偏差小于10％。实际海产品样品测定结果表明,海产品中的As主要以砷甜菜碱和二甲基砷酸为主,5种形态As的和与总As相比,总体提取率达90％以上。 相似文献
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臭氧冰对凡纳滨对虾保鲜效果的研究 总被引：5，自引：1，他引：4
就采用高浓度臭氧冰对凡纳滨对虾（Litopeneaus vannamei）保鲜效果进行了探讨研究,结果表明,使用臭氧含量为5mg·kg^-1的臭氧冰时,具有显著的杀菌和抑菌作用,菌落总数减少91%,并降低了挥发性盐基氮的产生,可延长产品的保鲜期3～5d。臭氧冰具有杀菌力强,保鲜效果好,使用方便、快捷、环保,解决了臭氧不能保存和运输等技术问题,该研究解决长期以来依赖臭氧设备随产随用的被动结局,扩大了臭氧的应用范围,为水产品保藏提供一种新的保鲜方式。 相似文献
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为了快速、方便地检测出这2种病毒,研究将PCR核酸扩增的高灵敏度和胶体金免疫层析技术快速、简便、直观的优点结合起来,建立了同时检测2种对虾病毒(WSSV和IHHNV)的同步PCR-胶体金免疫层析检测方法。采用了生物素标记和地高辛(Digoxigenin)标记引物。PCR扩增产物利用胶体金免疫层析技术进行检测。胶体金免疫检测试剂条的检测线(T线)处的层析膜处点上地高辛的单抗,经地高辛标记的PCR扩增产物可在T线上被检测到,在10 min内即可得到检测结果。同时,在PCR过程中使用UNG(尿嘧啶-DNA糖基酶),极大地控制了遗留污染。通过此方法检测对虾WSSV和IHHNV病毒的灵敏度均可达到10~100个拷贝,高于国家标准PCR检测法10~100倍。此检测方法让工作人员避免了接触有毒和诱导突变的试剂,免除基层检测实验室购买电泳设备和荧光检测系统的投资。 相似文献