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1.
葡萄SVP类MADS-box基因的克隆及表达分析 总被引：1，自引：0，他引：1
从无核白葡萄(Vitis vinifera cv.Thompson seedless)中克隆获得一个胚珠发育相关MADS-box基因。该基因cDNA全长1 248bp,ORF为729bp,编码一个含有243个氨基酸的蛋白。氨基酸多序列比对和系统发育分析显示,该基因属于SVP类MADS-box基因。采用半定量技术进行表达分析表明,该基因在葡萄的根、茎、叶、花蕾、盛花和胚珠中均有表达,但是有强弱差异。实时定量PCR技术分析表明在无核葡萄品种无核白胚珠发育过程中基因表达量先升后降,而在有核葡萄品种黑比诺胚珠发育过程中表达量一直呈下降趋势。 相似文献
2.
用RT-PCR法从葡萄扇叶病毒杭州分离物(GFLV-H)基因组RNA中扩增了该病毒分离物的外壳蛋白基因cDNA片段,并克隆到质粒pGEM-T-easy Vector.序列分析结果表明,该基因含有1515个核苷酸,编码504个氨基酸,其核苷酸和推导的氨基酸与GFLV法国分离物F13的同源性分别为88%和95%.目前该基因已成功地克隆到植物表达载体pBI121,经三亲交配导入到根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404中. 相似文献
3.
以携带葡萄(Vitis spp.)斑点病毒(GFkV)、沙地葡萄茎痘伴随病毒(GRSPaV)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄卷叶伴随病毒-1(GLRaV-1)、葡萄卷叶伴随病毒-2(GLRaV-2)、葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)和葡萄卷叶伴随病毒-6(GLRaV-6)等病毒的8个葡萄品种试管苗样品为材料,采用不同质量浓度的医用抗病毒剂利巴韦林注射液进行脱毒处理。结果发现,葡萄植株的死亡率较高,设置的4个质量浓度处理中,只有加入25 mg/L利巴韦林注射液处理的试管苗样品获得了再生植株。对分离成活的茎尖进行RT-PCR检测,结果表明,获得的5个葡萄品种的9株再生植株中,只有维多利亚的2株检测带有GRSPaV,其余均不带有所检病毒。 相似文献
4.
对湘西北、湘南、湘中和湘西等葡萄主产区的扇叶病发病及危害情况进行了调查,并通过生物学和分子生物学的方法对各地区的疑似病株进行了检测。结果表明：在湖南的葡萄主产区,葡萄扇叶病的感病品种较多,在夏黑无核、红地球、金星无核和金手指等品种上均有发生,但湘西的刺葡萄表现出对葡萄扇叶病有一定的抗性;感病症状总体上表现为叶片褪绿、黄化,叶缘锯齿变尖锐或形状不规则,并严重影响葡萄植株的生长,导致树势减弱、产量下降、果实品质变差;生物学检测结果显示,采集的54个样品,其中有52%的样品在千日红和本氏烟草上表现出系统性斑驳和变形;而分子生物学检测结果显示,54个样品中有29个样品检测到葡萄扇叶病病毒,以金星无核和红地球两个品种的检出率较高。 相似文献
5.
为了证实GFLV-H P38蛋白的性质及其在寄主扩散中的作用,根据葡萄扇叶病毒(Grapevine fanleaf virus, GFLV)法国分离物F13 RNA2序列合成特异性引物,利用RT-PCR从GFLV-H基因组中扩增出P38蛋白基因的cDNA片段,并克隆到pGEM-T-easy vector上.序列分析表明该基因包含1044个核苷酸,编码347个氨基酸.序列比较发现GFLV-H P38蛋白基因与GFLV-F13对应基因核苷酸和氨基酸的同源性分别为90%和96%;与线虫传多面体病毒属中的南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus, ArMV)和番茄环斑病毒(Tomato ringspot virus, TomRSV)对应基因氨基酸同源性分别为85%和38.6%,与烟草黑环病毒(Tabacco black ring virus, TBLV)、葡萄铬色花叶病毒(Grapevine chrome mosaic virus, GCMV)和树莓环斑病毒(Raspberry ringspot virus, RRSV) 的同源性均低于30%. 相似文献
6.
为调查嘉兴市主栽葡萄品种上病毒发生状况,本研究采集了嘉兴市5个县区的6个主栽葡萄品种162份样品,采用RT-PCR技术结合PCR产物测序对葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄卷叶病毒1(GLRaV-1)、葡萄卷叶病毒3(GLRaV-3)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄病毒B(GVB)、沙地葡萄茎痘病毒(GRSPaV)和葡萄斑点病毒(GFkV)发生情况进行检测。结果表明,嘉兴市葡萄主栽品种带病毒率高达91.4%,且复合侵染率为60.5%。以上7种病毒,除GFLV以外,其他6种病毒均可检测到,且GFkV发生率高达84%。 相似文献
7.
甘肃葡萄扇叶病毒和卷叶病毒的检测 总被引：2，自引：1，他引：1
采用 DAS-ELISA 检测方法对甘肃地区的葡萄主要品种进行扇叶病毒和卷叶病毒的调查和测定。结果表明,这两种病毒病在甘肃地区的主要葡萄产区均有发生。兰州地区和一些老的葡萄产区葡萄带病毒病较严重。通过对比植株下部枝条的幼叶、幼茎、老叶和老茎病原的检测结果,说明植株下部幼嫩组织是卷叶病毒最适的检测部位。 相似文献
8.
中国野生毛葡萄芪合成酶基因表达与抗白粉病分析 总被引：1，自引：1，他引：0
【目的】葡萄是世界性重要果树,欧洲葡萄品种因其优质高产被广泛栽培,但其突出缺点是抗病性弱,尤其易受白粉病危害。葡萄中芪合成酶（stilbene synthase,STS）的代谢产物白藜芦醇是植物体内具有抗病功能的植保素,果实中的白藜芦醇对人具有保健作用。中国野生毛葡萄‘丹凤-2’抗病性强且白藜芦醇含量高。论文旨在研究中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因（STS）及其功能,应用于抗病育种来提高欧洲葡萄抗病性及果实中芪类物质含量。【方法】同源克隆中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因VqSTS26和VqSTS32,构建pCAMBIA35S::VqSTSs::GFP过表达载体;以器官发生途径诱导的无核白分生愈伤组织作为受体材料,采用农杆菌介导法进行遗传转化,获得转基因葡萄植株;分别从转录水平和代谢产物水平比较转基因与野生型无核白在自然生长条件与人工接种葡萄白粉病菌（Uncinula necator）诱导下STS表达及芪类物质产生与积累的差异;通过显微观察白粉病菌在转基因与野生型无核白叶片上的生长发育进程,统计孢子萌发、菌丝生长与分生孢子梗形成数目,对转基因植株进行抗病性分析。【结果】通过PCR检测和Western blot鉴定,获得了稳定转化VqSTS26植株8株和稳定转化VqSTS32植株5株。在自然生长条件下实时荧光定量PCR分析表明VqSTS26、VqSTS32转基因无核白STS的表达量显著提高,芪合成酶上游基因PAL与下游基因RSGT的表达量上调,而与芪合成酶存在底物竞争关系的CHS表达下调;液相色谱分析表明芪类物质主要以糖苷的反式云杉新苷形式存在,VqSTS26、VqSTS32转基因无核白芪类物质的含量极显著高于野生型无核白。STS的表达及其产物合成受白粉病菌诱导,随白粉病菌诱导,STS表达量在1—2 dpi时显著升高,至7 dpi时表达量达最高;诱导表达产生的芪类物质由原来的反式云杉新苷新增加了反式白藜芦醇和葡萄素,且含量增加;转基因植株在STS表达量、芪类物质的积累方面均极显著高于野生型无核白。显微观察白粉病菌在葡萄叶片上的生长发育状态,对比野生型无核白,转基因植株白粉病菌生长受到抑制,菌丝发育更迟,7 dpi时转基因葡萄叶片上的分生孢子梗数量低于野生型无核白。【结论】过表达中国野生毛葡萄‘丹凤-2’VqSTS26和VqSTS32可以提高无核白中STS的表达量,促进芪类物质的形成与积累,抑制转基因无核白叶片上白粉病菌的生长。因此,中国野生毛葡萄‘丹凤-2’与其携带的STS及其产物,是定向改良欧洲葡萄品种白粉病抗性与芪类物质含量的重要种质资源与基因资源。 相似文献
9.
<正> 1988～1990年用10种抗血清对270～700份葡萄标样用 ELISA 的间接法和双抗体夹心法检测出南芥菜花叶病毒(ArMV)、葡萄卷叶病毒(GLRV)、葡萄扇叶病毒(G-FV)、番茄黑环病毒(TBRV)、烟草环斑 相似文献
10.
[目的]研究土壤不同程度干旱处理对两个葡萄品种叶片相对电导率、相对含水量、光合色素含量以及叶绿素荧光特征参数的影响.[方法]以吐鲁番主栽葡萄品种火焰无核和无核白扦插苗作为研究对象,采用盆栽模拟干旱处理法.[结果]随着土壤相对含水量的减少,两个葡萄品种的叶片相对电导率均呈现逐渐上升趋势,其中火焰无核的上升幅度比无核白较大;火焰无核T1、T2、T3处理的叶片相对含水量均显著小于对照(CK),无核白T1和T2处理的叶片相对含水量比CK差异不显著,T3处理显著低于CK.两个葡萄品种的叶绿素a和叶绿素b均随着土壤相对含水量的减少呈现逐渐下降趋势,火焰无核的叶绿素a/叶绿素b值在各处理间差异不显著,而无核白T3处理的叶绿素a/叶绿素b值显著高于其它处理,其值为4.935 ±0.310;火焰无核T1处理和无核白T2处理的类胡萝卜素含量均最高,值分别为(27.293±2.021) mg/cm2、(17.090±2.127) mg/cm2.随着土壤相对含水量的减少,两个葡萄品种光化学量子效率(F m/Fv)、PSⅡ实际量子效率(ΦPSⅡ)和光化学淬灭系数(qP)均缓慢下降,而其电子传递速率(ETR)呈现先上升后下降趋势,T2处理的ETR均最大,火焰无核和无核白T2处理的ETR分别为2.486±0.088、0.794±0.050.[结论]随着土壤相对含水量的减少,火焰无核扦插苗的旱害程度逐渐增大,而无核白在T1处理下基本上没受到早害,T2和T3处理时受到一定程度的旱害. 相似文献
11.
无核葡萄胚挽救中影响胚发育的因子 总被引：7，自引：2，他引：5
【目的】提高无核葡萄胚挽救育种效率。【方法】以12个无核葡萄品种或株系的自然授粉胚珠和6个杂交组合的胚珠为试材,研究不同配方的培养基、不同培养基相态、低温处理、光照和暗培养对无核葡萄的胚发育率的影响。同时,研究花后不同时间取样,摘取果粒取出胚珠培养的适宜时间。【结果】在供试的8种培养基中,Nitsch＋GA3 0.5 mg?L-1＋IAA 1.5 mg?L-1和MM3培养基最适宜于无核葡萄离体幼胚的发育,其次是ER培养基。在供试的固相、液相和固液双相的3种相态培养基中,以固液双相培养基进行无核葡萄品种底来特离体胚珠培养为最好。在胚珠离体培养阶段进行低温培养,降低了胚发育率。暗培养有利于幼胚的发育,可提高胚发育率。不同无核葡萄品种和组合在花后摘取果粒,取出胚珠进行离体胚挽救的适宜时间不同,无核白为35 d、森田尼无核为40 d、火焰无核为40 d、底来特为60 d、黎明无核为55 d、无核紫为70 d、优无核为50 d、皇家秋天为70 d、奇妙无核为60 d、奥迪亚无核为40 d、红宝石无核×贵妃玫瑰为70 d。【结论】本研究中不同无核葡萄品种进行胚挽救宜选择Nitsch＋GA3 0.5 mg?L-1＋IAA 1.5 mg?L-1、MM3或ER培养基,在（25±2）℃常温下进行固液双相暗培养,有助于提高胚挽救效率。 相似文献
12.
花粉管通道介导玉米总DNA导入小麦D1代的农艺性状研究 总被引：1，自引：0，他引：1
采用花粉管通道法介导玉米总DNA导入4个小麦品种(系)"9411"、"955159"、"96266"和鲁麦21中,并对转基因D1代的农艺性状进行了分析.研究发现,与对照相比,鲁麦21和"96266"的转基因D1代株高、穗长的差异达极显著水平;"9411"、"955159"、"96266"的转基因D1代的旗叶叶长和叶面积均达极显著水平;在"9411"的转基因D1代中,出现无芒变异的植株占20%左右;在"9411"的转基因D1代中,也发现了穗型与抗病性同时发生变异的植株. 相似文献
13.
[目的]探索黄瑞香组织培养和快速繁殖的培养条件。[方法]以黄瑞香幼嫩茎尖为外植体,采用植物组织培养和生物统计的方法研究黄瑞香的组织培养和快速繁殖技术。[结果]确定黄瑞香茎尖诱导愈伤组织的最佳培养培养基为WPM+IBA 0.1 mg/L+KT 0.1mg/L,茎尖诱导芽的适宜培养基为WPM+IBA 0.2 mg/L+6-BA 3 mg/L,幼芽形成根的适宜培养基为1/2 MS+IBA 3.0 mg/L。[结论]该研究结果为黄瑞香的快速繁殖及工厂化生产奠定了基础,该研究为黄瑞香组织培养和快速繁殖提供依据。 相似文献
14.
【目的】通过对部分柿品种杂交亲和性的研究,为柿杂交育种亲本的选择及杂交组合的选配提供理论依据。【方法】采用“杂3-2”、“禅寺丸”、“杂4-2”和“正月”4个雄株作父本,“黑柿”、“干帽盔”、“野柿”、“平核无”、“金枣柿”和“阳丰”6个雌株作母本,设置自然授粉（对照）、套袋不授粉、套袋后进行无生活力花粉授粉和有生活力花粉不同组合杂交授粉4种处理,利用离体萌发法比较雄株的花粉生活力,利用荧光显微镜观察柿不同杂交组合的亲和性,并比较不同杂交组合的坐果率、单果种子数和无籽果实率。【结果】4个雄株花粉生活力由大到小依次为“杂3-2”（52.53%）>“禅寺丸”(48.13%)>“杂4-2”（40.02%）>“正月”（34.10%）。在24个杂交组合中,相同倍性的父本与母本杂交,柱头乳突细胞表面均无胼胝质（“阳丰”与各雄株杂交情况除外）,且花粉粒在柱头上粘附萌发形成大量的花粉管并不同程度地参与了受精;不同倍性的父本与母本杂交,柱头上粘附的花粉粒少,柱头胼胝质的形成阻碍了花粉的萌发。24个杂交组合中,坐果率和单果种子数最高的组合为“黑柿”ד杂3-2”,分别为74.44%和4.00;坐果率最低的组合为“金枣柿”ד正月”,坐果率和单果种子数分别为22.22%和0.10,且人工授粉处理的坐果率和单果种子数均高于自然授粉处理。通过比较不同授粉方式下6个雌株的无籽果实率可知,“干帽盔”、“阳丰”、“平核无”存在真单性和刺激性单性结实现象,“黑柿”存在刺激性单性结实现象,“野柿”、“金枣柿”存在假单性结实现象。【结论】柿不同雄株间的花粉生活力存在差异;相同倍性的父本与母本杂交亲和性大于不同倍性间父本与母本杂交;人工授粉能明显提高各杂交组合的坐果率和单果种子数。 相似文献
15.
植物生长调节剂对克瑞森葡萄果实品质的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]改善葡萄品质,提高其商品价值.[方法]试验采用几种不同浓度的植物生长调节剂及在植物生长调节剂中添加营养液和展着剂于不同时期对克瑞森无核葡萄进行浸穗处理.[结果]与用单一植物生长调节剂处理相比,在植物生长调节剂中添加营养液处理对克瑞森无核葡萄果实品质有更好的改善作用.试验于盛花期用奇宝50 mg/L+多收液600倍,花后7 d用奇宝143 mg/L+保美灵45 mg/L+必加1 g/L 进行浸穗处理效果最佳.[结论]经植物生长调节剂处理后,葡萄产量和品质得到明显改善,提高了商品价值. 相似文献
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抗除草剂水稻新品系“E32HR”的选育 总被引：4，自引：0，他引：4
以基因枪法转化获得的转bar基因水稻"HR"为供体亲本,两系法亚种间杂交稻优势组合"65396"的恢复系"E32"为受体亲本,经过4次回交转育成对除草剂Basta具有稳定抗性的水稻新品系"E32HR"。对"E32HR"及其杂种"培矮64S/E32HR"的主要农艺性状进行比较分析的结果表明,除了"E32HR"的株高明显高于"E32"以外,其余性状均无明显差异。文中对转基因育种与常规育种的结合以及抗除草剂水稻的利用等问题进行了讨论。 相似文献
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Effects of exogenous paclobutrazol and sampling time on the efficiency of in vitro embryo rescue in the breeding of new seedless grape varieties 
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下载免费PDF全文 XU Teng-fei GUO Yu-rui YUAN Xiao-jian CHU Yan-nan WANG Xiao-wei HAN Yu-lei WANG Wen-yuan WANG Yue-jin SONG Rui FANG Yu-lin WANG Lu-jun XU Yan 《农业科学学报》2022,21(6):1633-1644
Embryo rescue technology plays an important role in seedless grape breeding. However, the efficiency of embryo rescue, including the embryo formation, germination, and seedling rates, is closely related to the parental genotypes, degree of abortion, growth medium, and plant growth regulators. In this study, we investigated the effects of different concentrations of paclobutrazol (PAC), a plant growth regulator, and embryo collection times on the embryo formation, germination, and seedling rates for different hybrid combinations of grape breeding varieties used for their aroma and cold-resistance traits. The results showed that the different PAC concentrations had varying impacts on the development of ovules and embryos from the different grape varieties. The embryo formation rates of the ‘Sultanina Rose’בBeibinghong’ and ‘Kunxiang Seedless’בTaishan-2’ crosses were the highest under the 5.1 μmol L–1 PAC treatment. The 1.0 μmol L–1 PAC treatment was optimal for the germination and seedling development of the ‘Sultanina Rose’בBeibinghong’ embryos, whereas the 0.2 μmol L–1 PAC treatment induced the highest germination rate for the ‘Sultanina Rose’בKunxiang Seedless’ cross. The optimal sampling times for each cross varied as 39 d after pollination (DAP) for the ‘Flame Seedless’בMuscat Hamburg’ cross, 46 DAP for the ‘Kunxiang Seedless’בBeibinghong’ cross, and 41 DAP for the ‘Ruby Seedless’בBeibinghong’ and ‘Fantasy Seedless’בShuangyou’ crosses. Moreover, the medium modified with 0.5 g L–1 of indole-3-butyric acid allowed the malformed seedlings to develop into plantlets and achieve larger progenies. This study provides a useful basis for further studies into grape embryo rescue and could improve breeding efforts for new seedless grape varieties. 相似文献