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对黑曲霉A3214及其诱变株N14所产植酸酶进行分离纯化并研究各种酶学性质,表明A3214植酸酶和N14植酸酶的最适pH均为2．5,最适温度均为50℃,60℃保温10min后酶活保留均在80％左右,用胃蛋白酶处理后酶活均保留80％左右,分子量均为47．4KD,等电点均在4．5到5．0之间,K^＋,Na^＋,Ca^2＋,Mg^2＋．Fe^2＋在高浓度时对A3214植酸酶和N14植酸酶都有抑制作用,而Zn^2＋,Cu^2＋,Mn^2＋却几乎没有抑制作用,A3214植酸酶对植酸钠的Km值为0．0005mol／L,N14植酸酶对植酸钠的Km值为0．0004mol／L,A3214植酸酶的比活为135777．5u／mg,N14植酸酶的比活为148447．5u／mg。 相似文献
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对用黑曲霉植酸酶基因构建的一株重组酵母E22所产植酸酶进行分离纯化并研究各种酶学性质,表明E22植酸酶分别在pH2.5～3.0和pH5.5左右具有2个最适pH峰,有活性pH范围为pH2.0～7.5,pH2.5时的最适温度为45℃左右、对植酸钠的Km值为0.000 2 mol/L、比活为493 328.7 u/mg、受Fe2+抑制,pH5.5时的最适温度为55℃.对植酸钠的Km值为0.000 1 mol/L、比活为624 376.2 u/mg、受Ca2+和Zn2+抑制,85℃热处理10 min酶活性保留70%,pH2.5下用胃蛋白酶、pH5.5下用胰蛋白酶处理6 h后酶活均保留90%左右,分子量为61.7KD,等电点在4.5到5.0之间. 相似文献
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对用黑曲霉植酸酶基因构建的一株重组酵母E22所产植酸酶进行分离纯化并研究各种酶学性质,表明E22植酸酶分别在pH2．5～3．0和pH5．5左右具有2个最适pH峰,有活性pH范围为pH2．0～7．5,pH2．5时的最适温度为45℃左右、对植酸钠的Km值为0．0002mol／L、比活为493328．7u／mg、受Fe^2＋抑制,pH5．5时的最适温度为55℃、对植酸钠的Km值为0．0001mol／L、比活为624376．2u／mg、受Ca^2＋和Zn^2＋抑制,85℃热处理10min酶活性保留70％,pH2．5下用胃蛋白酶、pH5．5下用胰蛋白酶处理6h后酶活均保留90％左右,分子量为61．7KD,等电点在4．5到5．0之间． 相似文献
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从118份样品中分离到1株产植酸酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WHNB 02),其发酵液经乙醇沉淀、硫酸铵分级沉淀及Sephadex G-100柱层析等步骤后分离纯化了该酶,纯化倍数约为31.5倍,回收率为13.0%.该酶为单体酶,SDS-PAGE测得的分子量约为43 KD,以植酸钠为底物的Km值为0.5 mmol/L,酶反应的最适温度为60℃,80℃作用10 min酶活保存61%,最适pH为7.0,在pH 6.0～10.0范围内稳定,酶活性及稳定性都需Ca2+存在.ED-TA,Mn2+,Ba2+(5 mmol/L)对酶活具有很大的抑制作用. 相似文献
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实验室保存的菌种黑曲霉TH-2经柠檬酸-磷酸缓冲液抽提,DEAE-Sepharose离子交换层析和Superdex-200凝胶过滤层析,得到电泳纯的蔗糖酶.纯化后的蔗糖酶比活为135.90 U/mg,回收率为37.7%,提纯倍数为20.3倍.测得酶的相对分子质量为1.29×105,最适温度为65℃,最适pH值为4.4.以不同浓度蔗糖为底物测得Km值为23.1 mmol/L.Ag+对其活性有很强的抑制作用,而Zn2+,Cu2+,Mn2+对其有激活作用. 相似文献
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暗纹东方鲀胃蛋白酶的分离纯化及部分性质研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了探明 pH 值、温度及矿物质离子对暗纹东方鲀胃蛋白酶活性的影响效果,用暗纹东方鲀的胃为材料,经柠檬酸缓冲液抽提,硫酸铵分级沉淀,CM-纤维素离子交换柱、Sephedex G75 层析柱纯化,获得比活为 7.13μmol/(min·mg)的胃蛋白酶.酶经聚丙烯酰胺电泳,表现为单一蛋白带,经 SDS-PAGE 测得酶的亚基相对分子质量为18 600.酶水解酪蛋白的最适温度为50 ℃,在pH2.5, ℃下酶催化酪蛋白水解的Km值为0.715 mmol/L;pH5.0, 3737 ℃下酶催化 N-卞氧羰酰 L-赖氨酸对-硝基酚酯(CBZ-Lys.pNP)的 Km 值为 0.112 mmol/L.几种矿物质离子对酶活力的影响表明,Ca2+,Mn2+,Mg2+对酶有激活作用,Zn2+,Fe2+对酶有抑制作用. 相似文献
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从黑龙江大豆根部土壤中分离一株穗霉属菌株,对其诱变菌株26-13-4所产植酸酶进行研究。该植酸酶对植酸钠的适宜水解温度为45℃、适宜pH为5.0,在4、25和45℃下热稳定性好,在pH4.0～7.0时植酸酶比较稳定;低浓度的Fe2+、Mn2+、Ca2+对酶活性有促进作用,而Cu2+、Mg2+、Zn2+、Al3+以及高浓度Mn2+、Ca2+、Fe3+对酶活性有抑制作用;K+、低浓度的Fe3+对酶活没有任何影响。结果表明,该植酸酶以植酸钠为底物时的米氏常数Km为4.4×10-5mol·L-1。 相似文献
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黑曲霉N25植酸酶的分离纯化及酶学性质研究 总被引：9，自引：0，他引：9
黑曲霉N2 5 (AspergillusNiger)菌株所产胞外植酸酶 ,经硫酸铵分级沉淀 ,纯化测得此植酸酶分子量为 6 9 15KD ;最适 pH 4 6 ;最适温度为 6 0℃。聚乙二醇 10 0 0 0、Fe2 +、低磷对酶有激活作用 ,而Ca2 +,Mg2 +,Mn2 +,EDTA对酶有抑制作用 相似文献
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以小白鼠为试验对象 ,对黑曲霉培养物的急性毒性和遗传性毒性进行了研究。结果表明 :黑曲霉培养物的 LD5 0>1 0 g/kg;黑曲霉培养物组与正常饲料组所引起的小鼠骨髓细胞微核率无显著差异。因此初步认为黑曲霉培养物是一种比较安全的饲料原料。 相似文献
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刘颖 《黑龙江八一农垦大学学报》2000,12(4):61-65
从自然界中分离出的黑曲霉９８１３株经诱变处理,获得一株高产纤维素酶的９８１３Ｘ８突变株。对９８１３Ｘ８株固态发酵产维素酶、半纤维素酶及果胶酶的优化条件进行了研究。通过综合评分的决策方法分析表明,黑曲霉９８１３Ｘ８株的产酶优化条件为：稻草与麸皮的比例１：１,料水比１：２,氮源是１．０％硫酸铵和１．０％豆饼,培养基起始ｐＨ值３．２～３．５,２５０ｍｌ三角瓶中装培养基５～１０ｇ,培养时间４８～６０ｈ;用０．２ｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ４．８的醋酸缓冲液室温下浸提３ｈ,所得粗酶液活性最高。 相似文献
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用ＰＥＧ促融剂使经硫酸二乙酯灭活的黑曲霉ＡＭＳ－１１的原生质体与细胞分裂中期折啤酒酵母ＲａｓｓｅⅫ原生质体融合，在选择性培养基上获得了能利用羧甲纤维素作唯一碳源的杂种酵母菌株ＦＡＳＳ１及ＦＡＳＣ１，经测定其ＤＮＡ量，蛋白质电泳谱带，生长曲线和碳源同化等项目，它们将具有双亲菌株的特征性状。 相似文献
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通过发酵培养实验对ML2、ML4两株溶磷黑曲霉的生长特性及对不同难溶性磷酸盐底物的溶解作用进行了研究。绘制了溶磷曲线,产酸、残糖变化曲线,菌体生长曲线,同时,结果表明：两株曲霉对Ca,（PO4）2、CaHPO4、FePO4、ALPO4,均有较好的溶解作用,说明它们可以适用于不同的土壤。 相似文献
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用扬州大学饲料营养学教研室筛选并保藏的黑曲霉菌株 ,经6 0 Co照射后 ,最终分离出 3株突变菌株。培养 5d后 ,突变株 A、C、D及野生菌株产生的植酸酶酶活力分别为 883 .52± 1 1 0 .0 8、 70 2 .1 4± 73 .85、 687.0 4± 82 .70、 74 8.1 2± 57.0 5U/ g。突变株 A比野生菌株的产植酸酶能力高 1 8.1 %。此外 ,突变株 A对菜籽饼中硫葡萄糖甙、粗纤维等的降解能力也较强。因此 ,本次筛选出的突变株 A具有较好的实用价值 相似文献
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