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1.
为研究探讨奶牛细管冻精不同解冻方法对荷斯坦牛受胎效果的影响,试验对奶牛细管冻精经不同方法解冻后精子活力、有效存活时间以及输精后第一情期受胎率进行了研究,结果表明:(1)在5℃和15℃解冻时精子活率低于0.35,差异不显著(P>0.05);90℃解冻后活率显著低于40℃、75℃组(P<0.05),其中75℃解冻3 s精子的活率最高,解冻效果最好;在40℃解冻20 s效果较好.(2)在40℃和75℃解冻后,精子存活时间随解冻温度升高而缩短,其中40℃解冻后精子有效存活时间较75℃差异极显著(P<0.01).(3)冻精采用75℃3 s解冻后输精较40℃解冻20 s第一情期受胎率高5.45%,差异不显著(P>0.05). 相似文献
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研究探讨了不同解冻方法对0.25 mL奶牛细管冻精解冻后的影响,细管冻精分别在5,15,40,75,90℃下不同时间（1～120 s）进行解冻操作,通过评定精子冻后活率、顶体完整率、尾膜完整率,筛选出最佳的奶牛细管冻精的解冻方法。结果表明：（1）奶牛细管冻精采用75℃解冻3 s,精子的活率最高,解冻效果最好;其次在接近体温40℃解冻20 s,效果也较好;在低温5℃和室温15℃解冻,精子活率低于0.3;在90℃高温解冻条件下不稳定,不适合生产使用;（2）90℃解冻精子的顶体完整率、尾膜完整率明显低于40℃和75℃,差异显著（P＜0.05）,但是精子畸形率却高于40℃与75℃的处理组（P＜0.05）,而后两者间差异不显著（P＞0.05）;（3）不同解冻温度解冻后精子在37℃时保持有效存活时间存在较大差异,表现为：40℃＞75℃＞90℃。因此,在生产实践中对奶牛细管冻精进行解冻时,可根据具体情况选用适合的解冻方法。若解冻后立即输精的,建议采用75℃下3 s解冻;解冻后不能立即输精的,为了使精子在较长时间内保持活力,宜采用40℃下20 s解冻。 相似文献
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目前我国在细管冻精方面应用主要是在牛羊方面,在驴方面,细管冻精使用的较少。采取细管冻精结合人工授精的方法可以提高优秀种公畜的利用率,加快品种改良速度,提升生产性能。【目的】研究出更适合驴细管冻精的解冻方法,使解冻后的精子质量与活力更优良,以提高母驴受孕率。【方法】通过用5℃、38℃水浴锅解冻以及手搓的方法对驴细管冻精进行解冻,跟踪观察记录精子活力与存活时间,对数据进行分析找到更适合于解冻驴细管冻精的解冻方法。【结果】38℃水浴锅解冻30s时精子活力最高,活力为25.46±0.25,且P0.05,对精子活力的影响差异显著。 相似文献
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1985-1987年对江苏白山羊精液颗粒冷冻保存技术与应用效果进行了研究,试验结果表明:稀释液中甘油最终浓度以1.5％最好,始冻温度-145℃为佳,40-41℃解冻温度好,冻精颗粒0.1±0.01ml加 0.4ml解冻液解冻,输精剂量 0.5ml,每情期输精2次,一次情期受胎率达74.1％,与自然配种相比,受胎率无明显差异,而窝平产羔数比自然配种多0.33只. 相似文献
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为探讨0.25 mL奶牛细管冻精解冻后的最佳保存环境和适宜的输精时段,本试验对奶牛细管冻精40℃下20 s解冻后在0℃～4℃,14℃～16℃,25℃～27℃下分别保存2,4,6,8,10h的活力进行了测定.结果表明:在本次实验中,奶牛细管冻精解冻后在0℃～4 ℃和14℃～ 16℃保存到10h精子活力0.434±0.0167和0.423±0.0196与初解冻精子活力(0.441±0.030)差异不显著(P＞0.05);在25℃～27℃随保存时间延长精子活力呈下降趋势,保存6h精子活力和初解冻相比差异显著(P＜0.05),保存8,10h差异极显著(P＜0.01).从而得出,奶牛细管冻精解冻后在0℃～4℃和14℃～16℃保存10h以内,精子活力仍然维持在一个较高水平,符合输精要求,在此温度和时间范围内进行长距离携带,对精液质量影响小,可以达到预期的输精效果;环境温度在25℃左右时,冻精解冻后宜于6h以内进行输精. 相似文献
7.
流式细胞仪分离奶牛精子性控效果的试验研究 总被引：2，自引：0，他引：2
用流式细胞仪分离荷斯坦奶牛的精液,检测在冷冻前和冷冻后分离的精子活力。同时,对不同牛群利用分离得到的性控鲜精和性控冻精进行人工输精,对其人工授精效果和性别控制效果进行观察。结果表明:分选后冻前精子活力达到0.60～0.67,分选后解冻精子活力达0.31～0.39;育成牛群性控鲜精输精的情期受胎率高于使用性控冻精输精,经产母牛群性控鲜精输精的情期受胎率高于使用性控冻精输精,但差异均不显著(P>0.05);使用性控鲜精、性控冻精进行人工输精,育成牛群情期受胎率高于经产母牛群,且差异显著(P<0.05);产母犊率差异不显著(P>0.05);用性控精液人工授精的奶牛早期流产率高于非性控精液,但差异不显著(P>0.05)。 相似文献
8.
近年来,颗粒精液逐渐被细管精液所取代,细管精液携带方便,解冻操作简单,便于上门服务,故我们用70℃、90℃、40℃和体温不同温度的解冻细管精液对母牛情期受胎率作了试验,试验表明,体温解冻受胎率为34%,40℃解冻受胎率为44%,70℃与90℃解冻差异不大,但比40℃解冻受胎率提高34%和36%,比体温解冻提高44%和46%,差异极显著,现将试验结果报道如下: 相似文献
9.
本试验优选出的冷冻稀释液1号和2号配方,冻精活率达0.5,解冻后精子在38～40℃恒温下存活指数分别为1.98±0.64和2.27±0.62。应用日立 H-800型透射电子显微镜对冻精进行超微结构观察,精子顶体完整率分别达59.61%和63.54%。2号配方的冷配情期受胎率达70.57%,其顶体完整率与受胎率呈正相关。 相似文献
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为优化湖羊冻精生产工艺,提高冻精质量,以湖羊种公羊的精液为试验材料,分别选择7种稀释液进行处理,采用液氮熏蒸法进行冷冻,并设置不同解冻温度和时间进行交叉试验。结果表明:7号稀释液处理的湖羊精子在42℃和70℃两种解冻条件下的活力、活率、质膜完整率和顶体完整率均最高; 6种解冻条件中,70℃解冻5 s的解冻效果最佳,其活率、活力、质膜完整性和顶体完整率分别达50. 62%、43. 09%、40. 09%和54. 37%。综上,7号稀释液和70℃解冻5 s是湖羊精液冷冻的最佳稀释液和解冻条件。 相似文献
11.
高山红景天愈伤组织的玻璃化法保存及植株再生 总被引：5，自引：0，他引：5
采用玻璃化法对高山红景天的愈伤组织进行了超低温保存研究.高山红景天愈伤组织在8%蔗糖中暗培养5 d后,先用25℃的60%玻璃化保护剂PVS2预处理20 min,转至100% PVS2于-20℃乙醇浴中处理2 h后,投入液氮进行保存,48 h后使用40℃水浴快速化冻.冻存后的愈伤组织用液体培养基MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+40%蔗糖洗涤3次,再转入MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.5 mg/L固体培养基中在22℃条件下进行暗培养,2周后转入光照培养（光照强度800 lx）. 6周后观察到高山红景天愈伤组织呈鲜绿色,长势较为旺盛,存活率可达到78.24%.冻存后的愈伤组织可诱导成苗. 相似文献
12.
用安格斯牛７日龄冻胚１６枚，在液氮中保存８９４ｄ后，用３６℃水浴解冻（２５Ｓ），全部回收。在室温２７℃条件下，用１０％蔗糖一步脱除抗冻剂（甘油）１０ｍｉｎ后，移入２０％犊牛血清ＰＢＳ１０ｍｉｎ，再移人同样浓度的犊牛血清ＰＢＳ中１０ｍｉｎ，按常规形态鉴定方法．对胚胎评级，１０枚为可用胚胎，解冻后胚胎可用率为６２．５％，将１０枚可用胚胎用非手术法，移入发情周期与胚胎发育期同步的５头受体牛，结果２头妊娠，移植妊娠率为４０％。妊娠足月后，２头受体牛各产公犊１头，试验结果表明，在液氮中保存８９４ｄ之久的安格斯牛冻胚，进行洲际间引种能够成功，这也是安格斯牛冻胚洲际间引种，在我国首次获得成功。 相似文献
13.
[目的]寻找肉牛精子最佳解冻温度和解冻时间。[方法]将54支利木赞公牛细管冻精在不同温度、不同时间下进行解冻,对解冻后的精液品质进行检测。[结果]解冻后精子活率随解冻温度升高(40～75℃)而升高,而畸形率随解冻温度升高而降低,但高温下(90℃)解冻,精子活率显著低于解冻温度为40～75℃(P<0.05),畸形率显著高于解冻温度75℃(P<0.05);低温(40、75℃)下随着解冻时间延长,精子活率增高,但差异不显著;高温(90℃)下解冻,精子活率与解冻时间长短关系更为明显,时间越长,精子活率越低。精子畸形率、存活时间与解冻时间无显著关系。[结论]在生产实践中根据具体情况选用适合的解冻温度和解冻时间,建议使用75℃/3～5s解冻。 相似文献
14.
玻璃化法超低温保存龙眼胚性愈伤组织的初步探讨 总被引：12，自引：2，他引：12
采用玻璃化法对不同基因型的龙眼胚性愈伤组织超低温保存进行了初步探讨.将保存一定时间的胚性愈伤组织于常温下用60%玻璃化溶液(2PVS2)装载30 m in,再于0℃下用PVS2溶液平衡60 m in;换新鲜的PVS2溶液,迅速投入液氮中保存;48 h后化冻.结果表明,具有原胚分化的胚性愈伤组织保存后的存活率明显高于普通胚性愈伤组织;40℃温水浴、25℃左右室温和自来水冲洗等3种不同的化冻方式对龙眼胚性愈伤组织玻璃化超低温保存后的存活率具有同样的效果. 相似文献
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选择20头荷斯坦高产奶牛,采用配对分组设计.对照组和试验组每组各10头.对照组使用原日粮,试验组产前21 d每天在日粮中添加繁奶康125 g,于分娩当天添加量增至300 g直到产后配种受胎,探讨繁奶康时奶牛产后生理机能及其血液生化指标的影响.结果表明:补充繁奶康,奶牛泌乳早期体况分高于对照组;血液尿素氮试验组显著低于对照组(P<0.05),高密度脂蛋白质、低密度脂蛋白质和过氧化氢酶试验组显著高于对照组(P<0.05);血糖、总蛋白、白蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶及过氧化物歧化酶两组无显著差异(P0.05).总之,高产奶牛补充繁奶康对其泌乳早期健康状况有较好的改善作用. 相似文献
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中国红豆杉种子超低温保存技术研究 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】探索中国红豆杉种质资源的超低温保存技术,为红豆杉种质资源的开发利用提供支持。【方法】采用多重单因素试验法,将中国红豆杉种子前处理后,采用9种不同的冷冻保护剂处理,之后分别进行0 ℃冷浴静置、25 ℃室温0.6 MPa抽真空和冰浴250 W超声波处理,处理时间分别为0,5,10和15 min;然后按照4种不同的冷冻方式投入液氮中冷冻保存,保存结束后分别采用37 ℃水浴快速、20 ℃流动自来水、5 ℃慢速和25 ℃室温静置进行解冻,最后探讨了在较优的3种冷冻保护剂条件下保存时间对红豆杉种子活力的影响。以氯化三苯基四氮唑（TTC）还原法测定冷冻保存后种子的活力。【结果】冷冻保护剂、保护剂处理方式和处理时间、冷冻方式、解冻方式、保存时间均对超低温冷冻保存后的红豆杉种子活力具有明显影响。9种冷冻保护剂中较优的是体积分数8%二甲基亚砜（DMSO）、体积分数5%乙二醇和PVS-4,冻存后中国红豆杉种子TTC还原量分别为（2.679 7±0.255 6）、（2.290 4±0.040 7）和（2.055 5±0.009 9） mg/g;冰浴250 W超声波处理10 min的效果最好,TTC还原量为（2.143 1±0.098 6） mg/g;4种冷冻方式中－20 ℃预冻1 h后投入液氮保存红豆杉细胞活性相对较高,TTC还原量为（2.454 4±0.069 5） mg/g。37 ℃水浴快速解冻后细胞活力更高,TTC还原量为（2.469 7±0.022 1） mg/g。【结论】红豆杉种子的最佳超低温保存技术条件为：采收后的新鲜种子干燥后于5 ℃条件下放置9个月打破其休眠,然后机械去掉种子硬壳,用蒸馏水浸泡12 h,脱去种子内皮,在无菌条件下用体积分数75%酒精消毒30 s,无菌水冲洗2～3次,沥干,移入冷冻管中,加入体积分数8% DMSO冷冻保护剂,封口,于冰浴250 W超声波条件下浸泡处理10 min,于-20 ℃预冻1 h后置于液氮中冷冻保存72 h,然后在37 ℃水浴中快速解冻。在此条件下,中国红豆杉种子活力最高,TTC还原量可达（2.469 7±0.022 1） mg/g,而且同等条件下,选用PVS-4冷冻保护剂更有利于红豆杉种子的超低温长期（1个月以上）保存。 相似文献
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大白菜非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的优化 总被引：2，自引：1，他引：1
非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的检测效果受到凝胶聚合速度、片段迁移率等多种因素影响。以大白菜为供试材料,研究比较了凝胶聚合速度及PCR产物在不同浓度凝胶上的检测效果。不同浓度的凝胶是由2种〔40%(19∶1)和30%(29∶1)〕贮存液分别配制的4种浓度(5%,7%,9%,11%)。结果表明,在4～30℃,凝胶聚合速度随温度的升高而加快;APS保持不变,不同温度下TEMED∶APS合适配比也不同:4℃(冬季)时,TEMED/APS的合适配比是1∶10,25℃(春秋)、30℃(夏季),选择1∶20的配比为宜;2种不同贮存液配制的相同浓度凝胶检测效果不同,30%(29∶1)优于40%(19∶1),由前者配制7%的凝胶上DNA片段分离效果好,带型清晰,分辨率高。 相似文献
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在鲫Carassius。啪￡峪适宜生存温度（室温为15—25℃）条件下,研究了10、20、30、40、50g／L的乌拉坦（Urethane）溶液（pH为7．0＋0．44）对鲫（体质量为230g±9．46g）的麻醉效果,探讨了乌拉坦对水生动物的麻醉作用,并提供日常实用的麻醉参数。结果表明：乌拉坦浓度为10～50g/L时,麻醉时间随着乌拉坦浓度的增大而缩短,复苏时间随着乌拉坦浓度的增大而延长,但浓度为50g／L时与浓度为40g／L时相比,鲫的复苏时间无显著性差异（P〉O．05）;浓度为10-40∥L时,各组鲫的复苏率均为100％,浓度为50g/L时,鲫的复苏率为88％;浓度为10-50g/L时,各组鲫7d的存活率均为100％。鲫在不同浓度（10～50g／L）的乌拉坦溶液中药浴一定时间后,将其暴露于空气中,经过一定时间后鲫可自动苏醒而弹起。其中除50g／L浓度组与40g／L浓度组之间,鲫的弹起时间无显著差异（P〉0．05）外,其余浓度组之间鲫的弹起时间均有显著差异（P〈0．05）;各浓度组药浴时间为10min与5min之间,鲫的弹起时间无显著差异（P〉0．05）,10g／L组的药浴时间为25min与20min之间,鲫的弹起时间无显著差异（P〉0．05）,各浓度组其余药浴时间之间均有显著差异（P〈0．05）。各试验组鲫7日存活率均为100％。药浴后的鲫能够恢复正常行为状态,表明乌拉坦对鲫行为的影响无明显的后遗效应。综合各项试验结果,表明乌拉坦对鲫的麻醉安全浓度为40g／L。 相似文献