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为了选择一种省时省力、简单有效的皱边石杉内生真菌菌丝体总DNA提取方法,采用氯化苄法提取其总DNA,对比研究石英砂研磨与超声波振荡2种破壁方式对其DNA的提取效能。结果表明,采用石英砂研磨法提取的DNA,其点样孔附近残余杂质较多、拖尾现象严重;超声波破壁法提取的DNA质量总体较好,DNA条带在23.1 kb处集中,多糖、蛋白质等杂质污染少,拖尾现象轻微。比较而言,超声波破壁法可快捷、高效提取皱边石杉内生真菌菌丝体DNA,适于植物内生真菌DNA大规模快速提取,尤其对质地坚硬的菌落较石英砂研磨更有效。提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳、ITS序列扩增,表明超声波破壁法提取的DNA与石英砂研磨法一样,均可获得良好的PCR扩增结果。 相似文献
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甘蓝型油菜成熟籽粒DNA快速提取方法探讨 总被引：1，自引：0，他引：1
以室温保存不同年份的甘蓝型油菜种子为材料,采用改良的CTAB法和DNA抽提试剂盒分别提取甘蓝型油菜籽粒DNA,探讨适合甘蓝型油菜籽粒DNA提取的方法。结果表明,不同保存年份种子提取的DNA含量无显著差异;受种皮色泽的影响也较小;用改良的CTAB法比试剂盒所提DNA产量高,结构完整性好,成本较低。PCR扩增检测结果表明两种方法获得的DNA均能满足一般的分子实验。因此,从油菜干籽粒中直接提取DNA可以节约时间,显著提高工作效率,为快速高效地进行甘蓝型油菜种质资源和遗传多样性分析奠定了基础,同时,也利于快速鉴定推广品种是否带有外源基因。 相似文献
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从苹果属腊叶标本中提取DNA的改良CTAB法研究 总被引：1，自引：1，他引：1
为了探求从保存年代较长并富含多糖多酚的苹果属植物腊叶标本中提取基因组DNA的方法,在传统CTAB法的基础上加以改良,无液氮研磨材料后加入预冷CTAB free缓冲液和提高沉淀时盐浓度,所得模板直接用于扩增nrITS区和cpDNA matK基因。经紫外分光光度和琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明用改良方法提取的DNA在质量和产量上优于常规方法并能满足后续扩增反应的要求。该方法不需要液氮研磨,节省了人力和成本,提前加入除杂缓冲液对去除多酚的效果良好,增加沉淀时盐的浓度能有效去除多糖,表明改良CTAB法适合苹果属腊叶标本叶片总DNA的提取。 相似文献
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利用PCR仪快速提取甜菜基因组DNA 总被引：2，自引：1，他引：1
为了寻找一种快速提取甜菜基因组DNA的方法,以甜菜干种子、幼苗、种仁以及甜菜叶片干粉为原料,利用PCR仪结合碱裂解法快速提取甜菜基因组DNA,利用微量分光光度计检测取DNA的浓度,并用甜菜SSR引物对提取的DNA进行扩增。结果表明,在4 种材料中均检测到了DNA,干种子、幼苗、种仁以及叶片干粉中提取的DNA平均浓度分别为432、197、158、448 ng/μL,无论是DNA原液还是稀释到20 ng/μL的工作液,均能在SSR-PCR反应中扩增出清晰的条带。该方法提取甜菜基因组DNA简单、快速,仅需要NaOH和HCl两种药品,提取的DNA完全可以用于SSR-PCR反应,为快速鉴定甜菜品种纯度和真实性提供了技术支持。 相似文献
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瘤胃微生物总DNA提取方法的比较 总被引：6，自引：0，他引：6
目前如何获得完整的瘤胃微生物总DNA是对瘤胃微生物在分子水平研究中关键的一步。瘤胃微生物总DNA分子片段很大,大概在15kb~20kb,因此需要选择一种合适的提取方法来获得完整的总DNA片段。笔者研究采用物理方法如玻璃珠研磨震荡法、反复冻融法、超声波破碎法、液氮研磨法等,化学方法如表面活性剂十二烷基磺酸钠（sodium dodecyl sulfate,SDS）、溴化十六烷三甲基铵（Cetyltrimethyl Ammonium Bromide,CTAB等）,酶解法（溶菌酶、蛋白酶K等）相结合,并对其进行比较,选择最佳的提取方法,使其符合以后PCR扩增要求以及其它后续研究工作。试验结果表明用玻璃珠研磨震荡加CTAB提取液的方法、反复冻融加SDS提取液的方法提取的瘤胃微生物总DNA的效果高于其它方法,并且通过电泳以及PCR检测,所提取的DNA的量适于进一步的分子生物学研究。 相似文献
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一种玉米叶片基因组DNA快速提取新方法的初步研究 总被引：8，自引：0，他引：8
在玉米分子标记辅助育种工作中,需要对大量群体的个体样本进行分子标记分析,其中DNA的高效快速提取是关键的技术环节。以异硫氰酸胍为主要提取试剂,结合使用组织研磨器(Qiagen Tissuelyser),建立了一种玉米叶片基因组DNA的快速提取新方法。利用此方法提取玉米叶片基因组DNA,具有使用药品少、操作步骤简单、快速、成本低、DNA质量稳定等优点,通常情况下每人每个工作日可以提取300个DNA样品。此DNA提取方法可有效地用于玉米分子标记分析。 相似文献
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利用组织研磨仪快速处理水稻种子样品,采用高通量的磁珠纯化系统提取样本DNA,提取的核酸通过紫外吸收检测其纯度,应用普通PCR检测方法和实时荧光PCR方法对水稻内源基因SPS、靶基因ATAF1进行检测。结果表明,普通PCR方法和实时荧光PCR方法均表现快速、准确、特异性高的特点。 相似文献
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玉米单株幼芽DNA快速提取新方法 总被引：11，自引：0，他引：11
为了攻克利用DNA指纹技术进行玉米种子纯度鉴定中存在的技术难关,对玉米单株幼芽DNA快速提取方法进行了研究,结果表明：利用新方法提取DNA,不用液氮、不用研磨、不用离心、不用沉淀,不用SDS、不用CTAB、不用氯仿,并且提取的DNA不降解、完全可以满足利用SSR分子标记进行DNA指纹分析的需要。一个人提取100株幼芽(1个检测样品)DNA只需30min左右,1d可以提取2000株幼芽(20个检测样品)的。DNA,为DNA指纹技术在玉米种子纯度及真伪快速鉴定中的广泛应用解决了关键性技术难题。 相似文献
11.
为探讨烟田油菜免耕适宜密度,以行距为固定的烟垄行、穴距为33.33 cm,穴定植留苗2株、3株、4株、5株4种不同定植密度,进行了烟田油菜免耕直播试验研究.结果表明,烟田油菜免耕直播最佳密度,在现有施肥水平和管理条件下,以穴定植3株,定植密度6000株/667m2最佳. 相似文献
12.
采用营养液培养试验比较了低锌营养下芥菜、白菜、甘蓝型3个油菜(Brassica napus L.)品种幼苗的生物量，抗氧化酶活性，根系活力，叶绿素含量及对锌的吸收、利用差异。试验结果表明，3个油菜品种由于基因型不同，在耐低锌营养能力方面存在显著性差异。在低锌时(10-6mol/L Zn2+)，幼苗植株地上部干重以芥菜型>甘蓝型>白菜型，地上部干重分别较无锌对照处理增加17.8%(芥菜型)、9.9%(白菜型)、3.3%(甘蓝型)。芥菜型叶CAT、POD、SOD活性，叶绿素含量及根系活力也明显高于甘蓝型和白菜型油菜。锌积累量及锌利用率也以芥菜型远远大于其它2个品种，锌素利用效率分别为12.3%（芥菜型），8.0%(白菜型)，4.9% (甘蓝型)。苗期油菜叶CAT、POD、SOD等抗氧化酶活性、叶绿素含量及根系活力可以作为筛选耐低锌营养油菜基因型的评价指标之一。 相似文献
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不同浓度腐殖酸对油菜苗期生长及生理特性的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
以油菜品种Cao221167为试验材料,探究水培条件下腐殖酸对作物苗期生长及生理特性的影响。通过设置不同浓度的腐殖酸(0;1‰;2‰;3‰;4‰;5‰)研究其对油菜幼苗生物量、株高、根系特征、叶绿素含量、MDA含量以及抗氧化酶活性等的影响。[结果]结果表明,1‰浓度腐殖酸时显著影响油菜幼苗的生物量(地上部干鲜重分别比对照增加18%和12.20%,地下部干鲜重分别比对照增加41.67%和54.70%),添加腐殖酸可以明显提高油菜幼苗根系活力;浓度为1‰时显著促进根系的生长(根长、总根长和根表面积分别比对照增加20.36%、70.49%、30.43%)。在1‰～5‰浓度范围内油菜细胞内抗氧化酶活性先减小后增大,叶绿素含量先增大后减小。因此,一定浓度的腐殖酸可以促进油菜的生长,且1‰～2‰浓度的腐殖酸是油菜苗期生长的适宜浓度,浓度为3‰～5‰时对油菜幼苗的生长具有胁迫作用。 相似文献
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为了研究内生菌对植物的生理作用,获得无内生菌干扰的植物种子,以油菜种子为材料,采用干热和湿热的方法去除种子固有内生菌。结果表明,50℃干热处理3天,60℃处理1~3天都能有效去除内生菌,去除率达99%以上,而种子的萌发率达86%,与对照组相比无显著变化;40℃湿热处理3天,50℃处理1~3天,内生菌的去除率99%以上,但湿热处理后种子的萌发率最高只有4%。因此采用干热处理是去除种子内生菌的有效方法,并为无菌苗的培养奠定基础。 相似文献
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种衣剂对免耕直播油菜幼苗生长的影响 总被引：3，自引：1，他引：2
为探明种衣剂对免耕直播油菜幼苗生长、苗体酶活性及氮、磷、钾、硼等含量的影响,用丸化型种衣剂WHY-11和薄膜型种衣剂YCY-11分别包衣杂交油菜和常规油菜种子,进行免耕直播栽培试验。结果表明,与对照相比,丸化型种衣剂和薄膜型种衣剂包衣处理后,油菜防控病虫害的能力分别提高了32.73%~79.44%和10.91%~70.61%,油菜幼苗茎粗分别提高了7.96%~11.54%和3.45%~6.90%,叶面积分别提高4.21%~38.31%和20.56%~21.08%,鲜重分别提高了11.84%~46.86%和18.80%~25.83%;而高脚苗率分别降低了5.66%~10.23%和15.11%~18.90%;苗体氮、磷、钾、硼含量分别提高了7.44%~19.22%和0.95%~5.52%,2.0%~2.8%和18.74%~38.83%,3.57%~4.49%和2.85%~4.30%,7.82%~9.07%和9.05%~10.72%;苗体内过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性分别提高了17.64%~44.56%和27.61%~33.05%,85.54%~86.46%和19.62%~66.56%,8.46%~19.35%和14.99%~27.73%。表明2种种衣剂具有促进油菜幼苗生长、增强抗逆性、提高苗素质等作用,其作用程度在杂交品种和常规品种间存在一定差异;丸化型种衣剂的综合作用效果优于薄膜型种衣剂。 相似文献
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A novel screening test is described for the discrimination of transgenic phosphinothricin tolerant oilseed rape from non transgenic rape seedlings. The method is based on the germination of rape seeds on filter paper soaked with a 0.005% phosphinothricin solution. Under these conditions inhibition of seedling development by the herbicide can be observed after 10 days. The germination test gains an advantage over the routinely used herbicide spraying, because it is rapid, needs little space and allows efficient screening of huge numbers of seeds. The assay has been successfully applied to the screening of different transgenic and non transgenic rapeseed varieties/lines and has been compared to other methods such asBasta® spray test, drop test, ELISA-technique and PCR-amplification of the pat gene. This test allows on one hand large screening programmes to monitor the foreign gene in the environment and on the other quality control of seedlots before market introduction of herbicide tolerant oilseed rape. 相似文献
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基于扩展DEA模型的四川省油菜生产效率研究 总被引：1，自引：1，他引：0
为了客观评价四川油菜生产能力、市场竞争力,找到影响油菜生产效率提高的主要因素,运用扩展的DEA模型,对2008—2014 年间四川油菜生产效率进行了实证分析,同时将四川与中国油菜主产区中其他6 个省的生产效率进行了比较分析。结果表明：从整体来看四川油菜生产规模没有发挥到最佳状态,导致综合效率无效,实际单产低于潜在水平;另投入结构失衡程度较为严重,人工成本冗余量大。在省域层面上,湖北省油菜生产各效率较为突出,达到了生产前沿且生产较为稳定,其次是青海、江西,四川处于第四位,在比较区域中只具有比较优势。建议通过合理改善要素投入结构,适度调整生产规模,继续强化技术创新,提高生产机械化水平等途径提高四川油菜生产效率。 相似文献
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Summary Hybridization between radish and oilseed rape has been cumbersome, requiring elaborate embryo rescue techniques. With a modified flower culture method, we have achieved successful hybridization between radish and (transgenic) oilseed rape without the laborious and technically demandingin vitro ovule or embryo rescue techniques.The hybrid nature of the intergeneric hybrids was demonstrated using morphological traits, and DNA analyses. The described method will facilitate the generation ofRaphanobrassica hybrids useful for biosafety studies of the potential for transgenes to spread in weedyCruciferae as well as for breeding programs aimed at introducing useful radish genes, e.g. nematode resistance genes, into oilseed rape. 相似文献