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[目的]探索基因重组工程菌高密度发酵工艺,为得到高浓度和高产量的链球菌(Streptococcus)G蛋白(SPG)奠定基础。[方法]通过一级摇瓶、二级种子罐培养,以及将菌种转接到发酵罐并进行分批补料高密度培养,探讨了IPTG加入量等条件对发酵的影响,考察了接种量、氧气、pH、培养方式等发酵工艺。[结果]高密度发酵能得到至少80 g/L的菌体,最高达到150 g/L,每升发酵液可得到1 g的SPG。SPG高密度发酵的生产条件为:接种量10%,通气量1 vvm,溶氧控制在30%～45%,发酵过程控制pH 7.0～7.2,IPTG的诱导浓度为0.2 mmol/L,时间为4 h,发酵后SPG总蛋白能达到菌体蛋白的20%以上。[结论]利用该生产工艺可得到高浓度菌体和高产量SPG。 相似文献
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[目的]选育富硒灵芝高产菌株并研究其液体发酵性能。[方法]应用添加Na2SeO3的培养基筛选富硒能力较强、菌体生物量及菌体多糖产量均较高的菌株,并研究其发酵性能。[结果]筛选到菌株Ganoderma lucidumZ-4-25,在液体培养基中添加浓度0.08%的Na2SeO3即能有效促进菌体生长,在浓度0.16%的Na2SeO3液体培养基中培养192 h,灵芝菌粉有机硒含量达到13 000μg/g菌体。在添加浓度0.08%的Na2SeO3条件下,10 L发酵罐发酵216 h,菌体生物量干重达到26.82 g/L,灵芝菌粉有机硒含量达到9 800μg/g菌体。[结论]该研究为富硒灵芝的液体发酵生产奠定了基础。 相似文献
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Fibrolase表达菌自诱导摇瓶发酵研究 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]解决Fibrolase表达时的渗漏问题,实现高密度发酵。[方法]先在培养基中培养Fibrolase大肠杆菌胞内可溶表达工程菌,再按1%的接种量接种到ZYM-5052培养基中培养,定时取样,研究可溶表达工程菌表达量、菌体量与培养时间的关系,进行纯化和活性分析。[结果]自诱导表达能明显提高菌体收获量和目的蛋白表达量,在培养14 h时表达量和菌体量达到最大值,纯化的重组Fibrolase具有明显的纤溶活性。[结论]该方法能有效抑制表达渗漏问题,实现高密度发酵。 相似文献
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DNA疫苗制备工艺研究 总被引：1，自引：0，他引：1
以禽流感DNA疫苗pCAOH5转化大肠杆菌JM109后,利用发酵罐进行发酵培养。将菌体悬浮裂解中和后,经澄清和浓缩处理,利用阴离子交换色谱对其进行纯化。结果表明实验室规模的技术路线完全能够为质粒DNA的工业化制备奠定技术基础。 相似文献
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为了取得较好的复性效果.对重组牛生长激素的纯化及变复性条件进行了研究.结果表明;发酵菌体高压匀浆破碎、离心得到的包含体在7.5 mol/L尿素中变性24 h后.以100 mmol/L Tris·HCI pH 10.0稀释至尿素浓度4.5 mol/L,4℃复性48 h,对20 mmol/L Tris·HCI pH 9.0透析除盐可以成功对重组牛生长激素复性;采用截留分子量100 kD、5 kD超滤膜对复性重组牛生长激素浓缩,FPLC纯化后可得到高纯度的目标蛋白. 相似文献
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[目的]为探明蜡样芽孢杆菌的液体发酵规律。[方法]以玉米粉+豆粕粉+硫酸锰+硫酸镁+磷酸二氢钠+磷酸氢二钠+植物油为发酵培养基,在(30±1)℃、初始pH值7.2、通气量1.5 m3/h、罐压0.04 Mpa、发酵周期54 h条件下,对蜡样芽孢杆菌MYSLY-02进行发酵培养。测定发酵过程中菌体数量及芽孢形成率等的变化。[结果]培养0~6 h时,芽孢杆菌菌体小、数量少,糖度基本不变;培养6~36 h时,菌体数量急剧增多,菌体增大增长,并开始形成芽孢,糖大量消耗;培养36~54 h时,菌体数量基本稳定,菌体基本形成芽孢,糖消耗减慢;培养54 h后,菌体数量减少,部分芽孢开始脱落。反应结束时,细菌浓度达到9.5×109CFU/ml,芽孢形成率达到92%。[结论]确定了蜡样芽孢杆菌液体发酵的最佳条件。 相似文献
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《江苏农业科学》2015,(8)
抑制素(INH)是性腺组织分泌的一种糖蛋白,可通过抑制促卵泡素分泌和性腺组织发育,在动物繁殖活动中起着重要的调控作用。通过对INHα亚基免疫,中和动物体内的INH,可解除INH对动物繁殖活动的抑制作用,从而提高动物的繁殖力。为获得大量重组的INHα亚基蛋白,满足生产的需要,本研究对发酵罐高密度发酵工艺进行探索,并分别对发酵培养基的类型、乳糖诱导浓度、诱导时间进行优化。结果表明,采用TB培养基发酵至20 h,菌体D600 nm值达到最大,为22.84,菌体总湿质量为25.48 g/L,显著高于其他2种培养基,综合比较细菌生长趋势、菌体总湿质量以及培养基成本等因素,TB培养基较适用于重组INH的发酵罐生产;终浓度为10 g/L的乳糖诱导5 h可达到最高蛋白表达量,占菌体总蛋白的50%以上,发酵结束时D600 nm值达到36,细菌总湿质量达到28.66 g/L。 相似文献
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[目的]开发菌丝霉素抗菌肽，以替代抗生素在饲料生产中添加使用。[方法]以高产菌丝霉素毕赤酵母基因工程菌PPle-BC01为供试菌株，在15 L实验室发酵罐优化发酵工艺的基础上，通过50 L、5 t、60 t发酵罐高密度发酵工艺进一步优化放大试验，实现了60 t罐规模的稳定生产。经层析柱分离、纯化，得到相对纯度≥90%的纯品。纯品水解后的游离氨基酸样品，经PITC衍生化处理后，再经过HPLC检测及氨基酸组成摩尔百分比计算与氨基酸混合标准品比对，分析其氨基酸组成。纯品经多肽蛋白质相对分子质量分析测试，测得plectasin单同位素相对分子量。纯品经蛋白浓度、抗菌效价测定、比活计算以及产品抗菌效价测定，获得产品中plectasin含量，同时测试了解其产品特性。[结果]60 t发酵罐稳定3批次试生产发酵液菌体湿重峰值分别为43.34%、43.78%和43.78%,抗菌效价峰值分别为10 566.99、10 986.45和10 788.56 U/mL;喷雾干燥产品收率分别为12.19%、12.30%和12.50%,抗菌效价分别为100 672.10、103 561.20和99 765.50 U/... 相似文献
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高效氨氮降解菌酿酒酵母培养条件初步研究 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]为了提高酿酒酵母降解氨氮能力,对高效氨氮降解菌酿酒酵母培养条件进行初步研究。[方法]采用单因素试验考察不同碳源、氮源、无机盐和生长因子对JMl4生长的影响;并在此基础上,采用正交试验设计对酿酒酵母的发酵培养基进行优化。[结果]蔗糖、硫酸铵、氯化钙和生物素有利于酿酒酵母的生长,碳源对JMl4的生长影响最明显。优化后的发酵培养基配方为：蔗糖20g／L,硫酸铵10g／L,氯化钙6g／L,生物素0．1g,／L,NaCl0．1g／L,MgSO。0．5g／L;在此最佳配方条件下,酵母菌数可达到7．4JD×10。CFU／ml。[结论]该方法对酿酒酵母的发酵培养基进行了优化,为酿酒酵母的工业化生产应用提供了理论依据。 相似文献
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不同中和剂对L-乳酸发酵的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]比较氨水、碳酸钙、及其混合物调控pH值对L-乳酸发酵的影响。[方法]以拟干酪乳杆菌为供试菌,通过测定发酵液中的菌体浓度和L-乳酸含量比较研究了氨水、碳酸钙及它们的混合物对其发酵生产L-乳酸的影响。[结果]随着碳酸钙添加量的增大,发酵液的OD620 nm逐渐增大,产酸量不断增加,当碳酸钙添加量达0.7 mol/L时,发酵48 h后的OD620 nm为3.54,产酸量为108 g/L,其产酸量是对照组的5倍左右。添加25%氨水,发酵48 h后的OD620 nm为3.08,产酸量为98 g/L。随着发酵前期碳酸钙添加量的增加,发酵后期定期添加氨水调控pH值为6.0,发酵液的OD620 nm增大,产酸量增加,当碳酸钙添加量为0.4 mol/L时,OD620 nm达5.80,产酸量达121 g/L,其产酸量是对照组的6倍左右。[结论]该研究为利用不同中和剂调控L-乳酸发酵提供了理论依据。 相似文献
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[目的]研究黑莓果酒发酵过程中功能性成分的变化规律。[方法]以黑莓原汁复合20％梨汁为原料酿造黑莓果酒,跟踪考察黑莓果酒发酵过程中总糖、pH、单宁、总酚和花青素含量的变化。[结果]试验表明,至发酵结束黑莓果酒总糖降至约5g／L;pH主发酵期间在3．50～3．45范围内波动,陈酿期间降低至3．35;单宁在主发酵期间呈上升趋势,陈酿期间略有降低,陈酿180d后单宁含量稳定在5．58g／L;总酚在主发酵期间呈缓慢下降趋势,陈酿180d后总酚含量为0．88g／L;花青素在发酵前2d迅速下降,第3天起下降速度变慢,陈酿期间花青素含量呈缓慢下降趋势。[结论]研究可为酿造优质的黑莓果酒提供科学依据。 相似文献
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[目的]研究C／N比对Schizochytriumsp．JN-3发酵产DHA的影响,并经中试放大验证。[方法]分批发酵探求初始C／N比对Schizochytriumsp．JN-3发酵产DHA的影响,并进行200L中试放大考察该菌的工业发酵潜力。[结果]生物量和总脂含量在碳氮比为10时达到最大值,分别为31．8和20．1g／L,DHA含量在碳氮比为20时达到最高,为46．9％。200L中试放大后生物量为30．2g／L,总油脂含量18．4g／L,占细胞干重的63．2％,DHA含量为7．4g／L,占总油脂含量的40．2％。[结论]Schizochytriumsp．JN-3具有较好的工业化潜力。 相似文献
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[目的]探索高品质雪梨干酒的最佳发酵条件。[方法]采用正交试验设计,优化雪梨干酒发酵条件,并在此基础上,考察雪梨原汁加糖后不同初始糖浓度对发酵后酒中残糖浓度和酒精浓度的影响,以确定最佳的初始糖浓度。[结果]以雪梨原汁为原料的发酵生产雪梨干酒最佳条件为：pH值4.5,温度26℃,活性酵母接种量0.2g/L,发酵后生成的酒精浓度可达38.5g/L。加糖后雪梨汁初始糖浓度为200g/L最佳,发酵后干酒具有较高的酒精浓度和较低的残糖浓度,分别为95.0、10.2g/L。[结论]以雪梨为原料能生产出具有较高酒精度、较低残糖浓度的高品质雪梨干酒。 相似文献
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以葛根为基质的灵芝发酵和体外清除自由基活性研究 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]研制一种具有抗氧化作用的新型保健食品并研究其体外抗氧化活性。[方法]以灵芝为发酵菌株,葛根为发酵基质中的添加物,研究了葛根对灵芝菌丝体生长和发酵产物体外清除自由基活性的影响。[结果]葛根添加量为60g/L时,灵芝的生物量达最大值,即（9．76±0．37）g／L,比对照高2．82g／L。葛根具有清除羟自由基和超氧阴离子的能力,添加葛根的灵芝发酵产物的对羟自由基和超氧阴离子的清除效果明显比单独灵芝发酵好。当葛根浓度为20、40、60、80和100eeL时,发酵产物对羟自由基的清除率分别为67．2％、78．5％、84．9％、86．4％和87．3％,对超氧阴离子的清除率分别为35．42％、41．67％、46．88％、44．79％和45．88％。[结论]该研究为开发具有抗氧化作用的新型灵芝发酵保健食品提供了理论基础。 相似文献
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[目的]研究黑木耳液体发酵产胞外多糖的条件。[方法]利用单因素试验,研究碳源、氮源、无机盐、培养温度、初始pH、接种量、发酵时间等对黑木耳液体发酵产胞外多糖产量的影响。[结果]适宜的发酵培养基为:葡萄糖4%、豆饼粉0.7%、KH2PO40.4%、MgSO4·7H2O 0.5%、CaCO30.3%、棉籽壳粉1%;适宜的发酵条件为:培养基初始pH 6.0、温度28℃、接种量10%(V/V)、装液量90 ml(250 ml三角瓶)、发酵时间6 d,在此条件下胞外多糖产量可达4.835 g/L。[结论]该研究为黑木耳胞外多糖的工业化生产提供了必要的理论基础。 相似文献