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随着 DNA 检测技术的发展,脱落细胞 DNA检测方法逐步应用于微量生物物证提取,脱落细胞的提取位置限于作案人皮肤接触的部位.鉴于犯罪现场的复杂性,如何准确有效提取现场微量生物物证是现场勘验人员面临的难题[1-2].我们采用新型微量生物物证粘取器成功提取 3 例渗透不平整表面脱落细胞DNA生物物证,现报道如下. 相似文献
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石榴DNA提取方法的比较及抗氧化剂对DNA质量的影响* 总被引：8，自引：1，他引：8
比较了SDS-CTAB微量提取法和改进的SDS微量提取法提取的石榴叶片DNA质量，结果认为两种方法提取的DNA均可用于RAPD分析，但SDS微量提取法较适合于石榴叶片DNA的提取。试验中还研究了抗氧化剂PVP,α-巯基乙醇和抗坏血酸3种试剂单独使用及PVP与α-巯基乙醇混合使用对SDS-CTAB微量提取法的影响，发现与对照相比，单独加抗坏血酸及PVP与α-巯基乙醇混合使用能很好地防止DNA在提取过程中的褐化。 相似文献
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[目的]筛选出一种简便快捷的DNA微量提取方法。[方法]从不同处理甘薯植株的叶片中提取DNA样品并用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法检测其纯度和质量。[结果]正常光照下甘薯植株的DNA产量最高,48h黑暗处理的次之,24h黑暗处理的最低。在正常光照下和48h黑暗处理中项芽的DNA产量都明显高于叶片;在24h黑暗处理中,顶芽与叶片的DNA产量比较接近。叶片DNA的纯度高于顶芽,正常光照下和24h黑暗处理中DNA的纯度高于48h黑暗处理中的。DNA电泳图谱表明,正常光照下叶片DNA的电泳条带一般比顶芽的好。48h黑暗处理中顶芽和叶片DNA的电泳条带没有很大差异。[结论]该试验为大批量实生苗DNA的快速提取和多种分子生物学研究奠定了实践基础。 相似文献
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三种试剂盒提取粪便隐孢子虫微量DNA的效果比较 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]筛选一种高效、简单、快速、价格合理的粪便微量DNA提取试剂盒。[方法]用3种不同的试剂盒提取粪便DNA,通过比较所提取DNA的浓度、纯度、提取率及巢式PCR产物等评价提取效果。[结果]Genmed试剂盒提取的DNA浓度最高、PCR产物条带最亮,但提取时间相对较长,成本相对较高。天根试剂盒提取的DNA纯度最高,DNA浓度适中,成本适中,提取时间最短。碧云天试剂盒提取的DNA纯度、浓度均不高且提取时间最长,但成本最低。[结论]Genmed试剂盒提取粪便微量DNA最灵敏。天根试剂盒提取DNA适于DNA纯度要求较高的分子生物学研究。 相似文献
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在犯罪案件现场发现与嫌疑人(或受害人)相关联的植物物证,鉴定它们来源和进行个体识别,可为案件的调查取证提供有价值的证据或线索.该研究采用一种RAD-seq技术对18个桂花样品(15个已知样本、3个盲测样本)进行DNA建库和高通量测序,序列多态性分析,评估其遗传多样性,并用基于SNP和基于k-mer频谱的2种比较分析方法探讨了RAD-seq数据用于个体识别的科学性和对植物物证进行同一性认定的可行性.结果表明,2种方法都能成功识别3个盲测样本.相比较而言,基于k-mer频谱的方法在稳定性和自动化程度上要优于基于SNP亲缘关系树的分析方法,更易推广到公安物证鉴别应用中.RAD-seq技术结合该文的分析方法能够识别出未知植物物证样品A,B和C分别对应于植物物证桂花1,4和11,实现了对案件中关联植物物证进行精确检验鉴定的方法和一个小型鉴定实例,但其识别能力有待扩展到更大样本集和更多物种中. 相似文献
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用于PCR分析的水稻DNA简易提取法——CS法 总被引：1，自引：0，他引：1
以PCR技术为基础的DNA分子标记是迄今在作物转基因检测、标记辅助选择、农作物品种纯度鉴定等方面最具应用前景的分子标记技术，而快速、简易、低成本的DNA提取方法是其中的关键因素之一。本实验以水稻黄化苗为材料，用NaOH溶液抽提DNA，对其用于PCR技术的DNA标记的效果进行了分析。结果发现，用O．5M．NaOH对黄化苗进行直接处理，并用等量1M Tris—HCI进行稀释、中和，离心所得的上清液即可直接用于各种：PCR扩增和随后的DNA标记鉴别，包括转基因PCR片段检测、微卫星标记多态性分析(琼脂糖电泳法或毛细管电泳法)，这样提取的DNA可以在短期内保存，在PCR分析中其效果与用常规CTAB法提取的DNA相当。 相似文献
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为了建立快速高效稳定的高质量鸡胚盘DNA提取方法,试验通过收集第X期鸡胚胎,应用酚氯仿抽提法、微量组织DNA提取试剂盒法和优化的硅胶膜吸附法分别提取鸡胚DNA,所提DNA经0.8%的琼脂糖凝胶电泳初步检测,并经PCR进一步分析检验,对不同方法提取DNA的稳定性和质量进行评价。结果表明:微量组织DNA提取试剂盒法提取的基因组DNA比用酚氯仿抽提法提取DNA的方法具有更高的稳定性和更好的质量,而微量组织DNA提取试剂盒法与本试验建立的优化的硅胶膜吸附法提取的基因组DNA稳定性和质量相近,但本试验建立优化的硅胶膜吸附法,无需蛋白酶K消化胚盘组织,因而优化了步骤降低了成本。试验建立了一个简单高效稳定的高质量低成本的第X期鸡胚盘DNA提取方法,为后续的相关研究建立了一个有效的鸡受精蛋胚盘DNA提取方法。 相似文献
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变铅青链霉菌的DNA上存在着一种异常的修饰,使其在含有微量Fe~(++)的缓冲液中电泳时,双链DNA遭到降解。DNA的切割是位点特异性的。与已知修饰特征的DNA进行同步试验发现,变铅青链霉菌的这种特异性修饰与目前所发现的修饰系统(如DNA甲基化)均不相同,很可能是一种新的修饰系统。 相似文献
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一种新型DNA标记技术——限制性位点扩增多态性(RSAP)的建立与优化 总被引：7，自引：0，他引：7
为了避开基于限制性酶切位点分子标记技术的DNA酶切环节,简化其复杂的程序,试验以辣椒为材料,建立了一种新型DNA标记技术——限制性位点扩增多态性(RSAP),并对其反应体系进行了优化,对RSAP适用性、重复性进行了检验。结果显示,RSAP技术的引物为2条长度均为18 bp的引物,引物的3′端为4~6个碱基的限制性酶切位点序列,接着是12~14个碱基的随机序列,2条引物的限制性位点和随机序列不同;PCR扩增的前5个循环采用35℃的退火温度,随后的35个循环采用48℃的退火温度;在25μL反应体系中,模板DNA用量为20 ng,M g2+浓度为2.5 mm o l/L,dNTP s浓度为0.2 mm o l/L,T aq DNA聚合酶用量为1.5 U,2条引物浓度均为600 nm o l/L;RSAP技术重复性好,适用性广泛,是一种操作简便、产率中等、稳定可靠的DNA标记技术。 相似文献
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DNA分子诊断技术是通过直接分析道传物质的姿态性（即DNA碱基顺序的差异性）来诊断生物内在基因的排布规律及其外在性状的表现规律。根据其核心技术不同可将DNA分子诊断技术分成二大类。本文旨在介绍DNA分子诊断技术及其在品种纯度检验应用的基础上，探讨这种技术成为标准实用的纯度检验技术的可能性。 相似文献
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悬铃木AFLP分子标记技术体系的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
采用改进的CTAB方法,从悬铃木叶片中提取基因组DNA,所得DNA样品的A260/A280值为1.7～1.9,琼脂糖凝胶电泳主带清晰、DNA纯度高、较少降解、不含酶反应抑制剂,可被MseⅠ和PstⅠ两种限制性内切酶完全酶切,从20对引物中筛选出6对带型分布均匀、多态性高且分辨能力强的引物,分别为: M74P50,M89P57,M74P26,M36P16,M80P66,M23P66.通过酶切连接、预扩增、选择性扩增、银染等试验过程,成功建立了悬铃木AP反应体系,得到了清晰的指纹图谱,试验结果重复性好. 相似文献
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家猪AFLP分析体系的建立 总被引：13，自引：0，他引：13
以大白等6个猪品种为试验材料，建立了家猪扩增酶切片段长度多态性(AFLP)分析体系，对其分析过程中DNA提取、双酶切、连接、预扩增、选择性扩增、银染效果进行了检测。用E39M48引物组合构建了供试猪的AFLP指纹图谱。条带清晰可辨，扩增信号强，无背景干扰。 相似文献
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不同年代云南普洱茶DNA提取分离方法初探* 总被引：1，自引：0，他引：1
以不同年代(贮藏时间)的云南普洱茶为原料,通过改进的CTAB方法来提取分离云南普洱茶总DNA,试验表明,所采用的经改进的CTAB DNA微量提取法,可以得到高质量的云南普洱茶DNA。建立了适合云南普洱茶DNA的提取方法,为进一步研究云南普洱茶贮藏年代的遗传图谱奠定了基础。 相似文献
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马蹄金总DNA的快速提取 总被引：1，自引：0，他引：1
利用E .Z .N .A微量植物DNA提取试剂盒 ,在 1h内可快速可靠地从马蹄金 (DichondrarepensForst)植物样本或组织中提取纯度较高的总DNA。这套系统利用速度和多变的旋转技术来结合DNA吸附旋转柱中基质的核酸内容物 ,从而除去植物组织中的多糖、酚化合物、酵素抑制剂。所得DNA产物纯度高可直接用于PCR ,RAPD、AFLP等各种下游分析技术 相似文献
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[目的]通过优化CTAB提取法从少量的野山参须根提取DNA,使其保持野山参形态的完整。[方法]综合比较CTAB提取法及其他3种DNA提取法,筛选出较为适合少量药材DNA的提取方法。[结果]从5 mg人参根须提取DNA,栽培参DNA浓度为200~1 000ng/μL,野山参为50~100 ng/μL,电泳可检测到清晰的条带,满足浓度和纯度的要求。[结论]该研究采用改进的高盐SDS法能从5 mg微量人参须根材料中提取高质量DNA,满足浓度和纯度的要求,可作为其他药材微量组织提取DNA的参考方法。 相似文献