鹅生长激素基因的克隆、原核表达及其重组蛋白质的离子交换纯化     

李辉  陈蓉  应诗家  施振旦  赵伟 《江苏农业学报》2014,(6)

为了克隆鹅生长激素基因并表达其重组蛋白质,采集生长期鹅垂体组织,并利用TRIzol快速提取的总RNA为模板,反转录为c DNA。根据鹅生长激素基因编码的成熟肽序列(Gen Bank号:AY149895.2)设计1对引物,分别在上、下游引物的5'端引入Nhe I和Hind III酶切位点。经反转录扩增获得鹅生长激素基因的编码的成熟肽全序列。通过双酶切和连接将鹅生长激素编码区插入原核表达载体pRSET-A的Nhe I和Hind III位点之间,构建重组表达质粒pRSET-g GH并转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)。转化的菌株经IPTG诱导后表达重组鹅生长激素蛋白质,分子量约为2.93×104。经过DEAE-650M弱阴离子交换树脂纯化获得较高纯度的重组鹅生长激素蛋白质。  相似文献   

基因动物     

《中国畜禽种业》2008,4(9):60-60

什么是基因动物？就是把一些人类所需要的基因．转导到动物体内．使培养出的这种动物．能够生产出一些人类所需要的物质,这种动物叫基因动物。例如,人的生长激素,能够刺激人体长身体,增加身高,是一种很好的治疗侏儒症的药品。用引入基因的方法．培养出一种特殊的小鼠,在这种小鼠的奶液里,含有人类的生长激素,而且含量可以很高,一升小鼠奶可以提取0.5克人的生长激素。  相似文献   

苏云金芽孢杆菌aiiA基因的克隆及植物表达载体构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

欧阳乐军  沙月娥  郭耀权  邓玉金  曾富华 《广东农业科学》2011,38(21)

N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones,AHLs)是革兰氏阴性细菌致病过程中的关键信号分子,芽孢杆菌中广泛存在的aiiA基因编码AHL-Lactonase能够水解信号分子AHLs。利用PCR方法从苏云金芽孢杆菌中克隆了aiiA基因,序列分析表明该基因由753个碱基组成,编码含有250个氨基酸残基的蛋白质,核苷酸序列与已报道aiiA的同源性为89%～97%。将该基因连接到植物表达载体pCAMBIA1301中,成功构建了aiiA基因的植物表达载体pCAM-aiiA,为进一步通过转基因技术研究该基因的功能奠定了基础。  相似文献   

转基因植物     

《中国农业科技导报》2004,6(6):76-76

植物转基因技术是指通过一定的方法将从动物、植物或微生物中分离到的目的基因转移到植物的基因组中，使之表达并稳定遗传，从而赋予新性状的技术。目前植物转基因技术主要在以下方面达到应用。  相似文献   

转基因猪研究进展与前景展望   总被引：2，自引：0，他引：2  

王占贺  刘风华  梁金良  袁振国 《北京农学院学报》1999,14(4):81-87

转基因动物是指用实验手段,将外源基因导入动物生殖细胞,由此稳定整合到动物基因组中,并能遗传给子代的动物.自1982年Palmiter等[11]将含小鼠金属巯因启动子的DNA片断与生长激素基因融合的质粒用微注射法导入小鼠受精卵,并移植给受体而产生6只比同窝仔鼠生长快一倍的超级小鼠后,即引起世界轰动,使得转基因动物的内在潜力由此而得以证实,随即世界各国普遍开展了转基因动物的研究.  相似文献   

β-酪蛋白基因的研究进展   总被引：2，自引：0，他引：2  

周明亮  吴登俊  曾云琦 《内蒙古农业科技》2005,(2):12-14

Corden利用转基因技术首次从小鼠乳腺中分泌得到了人组织源性纤维酶原激活剂，开创了转基因技术的先河。在短短的20多年的时间，转基因技术得到了快速发展。随着转基因技术的广泛应用．越来越多的专家与企业关注到利用哺乳动物的乳腺生物反应器来生产重要的药用蛋白以及稀有蛋白食品。目前，哺乳动物的乳腺生物反应器主要采用β-乳球蛋白(BLG)、酪蛋白(CSN)、乳清酸蛋白(WAP)和乳清白蛋白基因的启动子和调控区。这些区域能够有效地促进外源基因在转基因动物乳腺组织中特异表达。β-酪蛋白(CNS2)是奶蛋白含量较多的一种酪蛋白，在各种哺乳动物的奶汁中都占有相当大的比例。  相似文献   

利用农杆菌浸种法将叶片衰老抑制基因P_(SAG12)-IPT导入普通小麦的研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

奚亚军  张启发  林拥军  侯文胜  路明 《中国农业科学》2004,37(8):1235-1235

 以普通小麦品种西农1376和西农2611为材料,利用农杆菌浸种法获得1株导入了叶片衰老抑制基因PSAG12-IPT转基因植株。经PCR、GUS组织化学染色和Southern杂交分析,证明目的基因已整合到小麦基因组中并在转基因植株中能够稳定遗传。转基因小麦在叶片细胞分裂素(异戊烯基腺嘌呤)含量、叶片衰老进程及农艺性状方面与对照无明显差异,初步表明叶片衰老抑制基因PSAG12-IPT,在转基因植株体内可能未表达或表达量不足。  相似文献   

理性认识转基因促进生物育种健康发展     

张春义 《农村经济与科技》2011,(3):65-66

纯粹的“天然食品”并不存在 转基因技术可以应用于动物、植物和微生物。作物转基因是在常规育种技术的基础上利用现代分子生物学技术,将某些生物的基因转移到作物的遗传物质中去,使其有效表达出相应的产物（蛋白质或核酸）,在产量、抗性、营养品质、消费品质等方面向人们所需要的方向转变。以转基因生物为直接食品或为原料加工生产的食品就是“转基因食品”。  相似文献   

转基因鸡的制作方法及应用     

王晓通娄义洲  王晓娜 《世界农业》2004,(2):48-49

转基因技术的发展令人瞩目,其中植物、微生物转基因技术成果已经产业化,为人类带来了巨大的经济效益。转基因动物特别是转基因家禽由于具有更为优秀的生产能力和良好的市场前景,从而成为国内外研究的热点。一、转基因禽类的制作方法1.通过显微注射生产转基因鸡(1)单细胞受精卵显微注射法。人们发现,当外源DNA注射到海胆、斑马鱼和爪蟾等脊椎动物受精卵细胞质中,当卵快速分裂时,外源DNA能暂时停留染色体外复制,并可低频率地结合到染色体基因组中。得益于上述研究的启示,在体外将外源基因注射到单细胞受精卵细胞质中,经过体外培养后,成功地…  相似文献   

显微注射导入生长激素基因产生转基因兔和鼠     

范必勤  王斌 《江苏农业学报》1995,11(3):1-6

本研究旨在建立显微注射转基因系统；获得表达人生长激素和猪生长激素基因的转基因兔和鼠；探索提高动物生长性能的可能性与可行性。家兔和小鼠作超数排卵和交配处理，收集原核胚。将小鼠金属巯因启动子与人生长激素和绵羊金属巯因启动子与猪生长激素融合的基因质粒注入雄原核，观察体外和体内发育结果。用斑点杂交、ＰＣＲ技术和放射免疫检测外源基因的整合和表达情况。试验结果，胚胎回收后立即作体外培养的囊胚发育率为９０％，基  相似文献