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张德礼 《中国预防兽医学报》1992,(3)
用8HA单位水貂肠炎病毒(MEV)细胞培养活毒标准抗原、8 HI单位兔抗MEV血清标准抗体、0.5%戊二醛化猪RBC进行微量血凝(HA)-血凝抑制(HI)试验诊断水貂病毒性肠炎(MVE),具有敏感、准确、简便、省时等特点,适于MVE的确诊、检疫、流行病学调查和免疫水平监察,可在接到病料后4小时内报告结果。因本试验只能用活毒标准抗原,所以需把好消毒关。防止散毒。 相似文献
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本研究旨在探索水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)的母源抗体消长规律及其亚单位疫苗免疫效果。以免疫母貂所生仔貂为研究对象,采集21、30、45、60日龄仔貂血清,测定水貂病毒性肠炎母源抗体HI效价(MEV HI);选取25只47~52日龄健康水貂接种制备MEV基因工程亚单位疫苗,免疫前后14 d采血测定MEV HI效价;免疫后14 d进行水貂肠炎病毒攻毒临床症状观察,并测定粪便HA效价;攻毒后14 d对濒死和存活水貂安乐死,采集十二指肠、空肠和回肠进行病理组织学观察和免疫组化检测。结果显示,免疫母貂所产仔貂的MEV HI效价随着日龄的增加逐渐降低,在21日龄时较高,45日龄时少部分仔貂MEV HI效价<1:32,60日龄时大部分仔貂HI效价≤ 1:4;使用制备合格疫苗免疫后14 d对照组水貂的MEV HI效价均不高于1:4,免疫组MEV HI效价升高至1:64~1:512;攻毒保护试验表明,免疫组水貂100%抵抗水貂肠炎病毒强毒的攻击,水貂的精神、饮食、粪便等均未见异常,且攻毒后粪便HA效价为1:8~1:16;病理组织学和免疫组化检测结果表明,MEV基因工程亚单位疫苗能够很好地阻止病毒在肠黏膜上皮细胞的复制和对肠黏膜上皮细胞的损伤。因此,免疫母貂所生仔貂21日龄时体内抗体效价最高,制备的疫苗免疫50日龄左右的水貂时能够突破母源抗体干扰并产生高水平的抗体,能够抵抗水貂肠炎病毒强毒株的攻击。 相似文献
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北京军区后勤部军马防治检验所病毒免疫室,将MEV无血清细胞培养活毒抗原应用于MVE微量HA/HI实验室诊断及MEV含量和灭活疫苗免疫效力检验已取得成功;在系统筛选出HA/HI试验最佳条件的基础上,研制成功了具有敏感、准确、简便、 相似文献
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血凝(HA)和血凝抑制试验(HI)主要是用于新城疫病原鉴定和抗体效价测定,新版《新城疫诊断技术》(GB/T16550-2020)对HA和HI试验判定结果进行了修改和细化,使其更加标准和规范。为尽快理解新版标准要求,熟练掌握操作要领,对新、旧版标准中HA和HI试验进行了比较,新版标准增加了对HA和HI试验4HAU抗原配制的标定、静置时间以及结果判定的改变。新版标准在操作步骤上更为精准详细,4HAU抗原配置更加准确,从而使得HI试验结果更加科学。本文结合实际检测,为广大实验室检验人员、大专院校学生及科研人员更好地理解新版标准,更熟练地操作,从而为提高试验结果准确性提供了参考。 相似文献
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为了解决基层兽医实验室检测人员在血凝与血凝抑制(HA和HI)试验中4单位病毒抗原的配置和标定问题的困扰,本试验对GB/T 18936-2020《高致病性禽流感诊断技术》中规定的4单位病毒抗原的配置和标定方法进行了探讨,试验结果表明,通过标定调整的4单位病毒抗原准确性高,从而减少血凝抑制实验的误差。 相似文献
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本研究证明,5周龄以上的无MEV健康貂、MEV隐性感染貂、MVE症状典型貂均可按种水貂病毒性肠炎无血清细胞培养灭活疫苗,适宜免疫程序为皮下或肌肉注射1ml。7万多只份MEV矿油苗和700多万只份MEV铝胶苗接种野外水貂、貉子和狐狸的临床免疫预防和紧急控制效力观测结果表明,两种佐剂MEV疫苗的免疫效力等同,不同效价(HA64~x—8192~x或TCID_(50)Log~(7.6~9.7))MEV疫苗的免疫产生期为3~10天,免疫期不低于6~12个月,2~8℃保存期不低于9个月,免疫保护率达100%。效价为HA64~x或TCID_(50)Log_(10)~(7.6)的MEV疫苗接种水貂后20~40天的血清HI抗体效价均值约为32~x,达此标准疫苗的免疫产生期为7~10天,免疫期为12个月,保存期为9个月,保护率为100%。 相似文献
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为评价水貂病毒性肠炎杆状病毒载体灭活疫苗(简称MEV亚单位疫苗)与水貂犬瘟热活疫苗(简称CDV活疫苗)混合免疫的效果,本研究将两种疫苗混合后在室温静置不同时间测定犬瘟热病毒(CDV)含量,并选用30只健康水貂随机分为6组进行比对试验,其中G1和G2组免疫MEV亚单位疫苗稀释CDV活疫苗的混合疫苗,G3组为CDV活疫苗单独免疫组,G4组为MEV亚单位疫苗单独免疫组,G5和G6组分别为CDV攻毒组和MEV攻毒组。免疫后21 d采血检测CDV中和抗体,同时对G1、G3、G5组进行CDV攻毒;免疫后14 d采血检测MEV血凝抑制(HI)抗体,同时对G2、G4、G6组进行MEV攻毒。结果:两种疫苗混合后在室温静置2 h, CDV含量无明显下降。免疫后21 d, G1和G3组CDV中和抗体效价达到1∶64.6~1∶128.8,CDV攻毒后混合疫苗和CDV活疫苗免疫组的保护率均为100%。免疫后14 d, G2和G4组的MEV HI抗体效价达到1∶128~1∶1 024,MEV攻毒后混合疫苗和MEV亚单位疫苗免疫组的保护率均为100%。研究表明,MEV亚单位疫苗稀释CDV活疫苗,混合免疫后各疫苗的免... 相似文献
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《畜牧兽医科技信息》2016,(6)
鸡新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验结果常常因为操作不规范、使用标准不准确等人为主观因素的影响,导致试验结果不准确,甚至失败。本文着重对鸡新城疫HA与HI试验血样的采集和处理、器材的选择、试剂配制、HA试验、HI试验等操作中的注意事项作以简要阐述,以供参考。 相似文献
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用胰酶处理鸡传染性支气管炎病毒(IBV)制成血凝(HA)抗原,HA=1:16384,用此抗原建立了微量血凝抑制试验(HI)方法检测IBV阳性血清。IBV阳性血清鸡胚病毒中和试验(NT)结果与HI效价呈正相关,相关系数r=0.29,HI效价达1:8以上可保护鸡胚抵抗200个MLD的IBV攻击,表明HI抗体是保护性抗体,该方法具有较大的实用价值。 相似文献
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影响鸡IBV血凝因素及HI试验抗原制备的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
选择没有自然血凝性的三个标准IBV毒株(M41、Gray、T株)和四个由西北农大禽病研究室分离的陕西省地方株[X、Fu、W和H株(有自然血凝性)],在非免疫鸡胚上增殖后,用蔗糖透析法浓缩10倍,再分别采用三种方法处理,制备IBV-HA抗原:1)用浓缩4倍的兔A型魏氏梭菌培养液滤液(R.W.F.C4)处理IBV;2)用2.5U/mlI型磷酸酯酶C(PLC1)处理IBV;3)用1%胰酶处理IBV。结果显示,除T株仍不具有血凝性外,其余毒株都有了较高的血凝价。IBVM41株、X株HA效价株高达2^8,Fu、Gray、W、H株的HA效价也达2^7—2^9。但是,用方法3)来制备HA抗原没有任何实用价值。因为1%胰酶本身具有非常强的非特异性凝集作用,非特异性HA价高达8log2。而采用R.W.F.C4和2.5U/ml PLC1处理IBV浓缩毒制得的IBV—HA抗原,除T株外,均能凝集鸡红细胞,且该凝集作用可被特异的IBV抗血清所抑制,而不能被ND、EDS—76、IBD等其它鸡病阳性血清所抑制,说明该抗原具有较强的特异性。本试验还对影响IBV血凝试验和血凝抑制试验的各种因素进行了研究。比较了用R.W.F.C4和用2.5U/ml PLC1处理IBV制备HA抗原血凝价,结果显示二者的血凝价是一致的,所以完全可以用廉价的兔A型魏氏梭菌培养液代替昂贵的PLC1作为抗原处理液。本试验还采用IBV—M41株和陕西省地方肾型株X株制备IBV—HA双价抗原,结果表明,用上述IBV—HA二价抗原所测出的各毒株抗血清的HA效价和用各毒株所制得的IBV—HA单价抗原所测出的相应毒株抗血清的HI效价差异不显著,说明IBV二价HA抗原的抗原交叉性广泛,可用于IB的免疫监测和诊断。本试验还将在同一条件下获得的免疫鸡血清分别采用HI和CEKC—SN二种方法所测得的抗体效价进行了比较,结果经统计学分析表明:HI效价与CEKC—SN效价呈正相关,相关系数为0.6585,且HI法比ECKC—SN法省时、省力。 相似文献
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鸡新城疫是由新城疫病毒引起鸡群的一种急性、败血性和高度接触性传染病。有血凝素(HA)的病毒能凝集人或动物红细胞,血凝现象能被相应抗体抑制称为血凝抑制试验,新城疫病毒粒子表面具有血凝素,可以用HA、HI试验进行新城疫抗体的检测。血凝抑制(HI)试验是监测ND免疫状态的一种简便、快速的血清学方法。但其检测结果的准确性受很多方面的影响:设备的选择及试验前的准备,红细胞悬液的制备、保存和使用,标准抗原、待检样品的准备,环境温度,结果判断方法等方面的影响。 相似文献
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用马动脉炎病毒(EAV)免疫SPF豚鼠,4周后采血做血凝抑制试验(HI),其抗血清可以抑制血凝抗原对小鼠红细胞的凝集反应,抗原和抗血清在4℃感作24h后可以检测到最高的HI抗体效价,同时结果显示HI抗体与中和抗体产物呈正相关。对561份来自新西兰、吉尔吉斯、沙特阿拉伯及内蒙古、新疆的马血清用HI试验和微量血清中和试验(NT)进行EAV抗体检测,HI和NT阳性符合率为94.7%,血凝抑制抗体与中和抗体效价呈显著的正相关。 相似文献
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Yoshiyuki Goto 《国外兽医学(畜禽传染病)》1991,11(4):28-29
中山(Chuzan)病毒能凝集包括牛在内多种动物的红细胞,对牛红细胞的血浆(HA)活性依赖于NaCl克分子浓度,当该浓度为0.6M时最强,但与PH和温度无关,从2头母牛和库蒙中分离到2株中山病毒,其HA抗原性难以区分,所有感染该病毒的牛的血凝抑制HI抗体 价都升高,其变化与中和试验(NT)抗体效价相似,HI和NT抗体的相关性很高,抗体可保持1年以上,因此,HA试验可代替NT试验用于检测牛的中山病毒感染。 相似文献