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相似文献
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1.
试验用玻璃化冷冻保存山羊胚胎142枚,其中35枚移植受体13只,妊娠率和产羔率分别为61.5%(8/13)和40%(14/35);107枚(桑椹胚44枚和囊胚63枚)在液氮中保存3和4.5年后解冻与培养。结果表明,桑椹胚形态和发育正常率分别为47%(21/44)和38.6%(17/44),囊胚分别为63.5%(40/63)和47.6%(30/63)。囊胚解冻后形态正常率和发育率显著高于桑椹胚(P<0.05)。  相似文献   

2.
本试验采用一步添加防冻剂(10%甘油)、12.5%蔗糖一步细管内脱除甘油,37℃温水快速解冻法,对393枚处于不同发育时期的优良胚胎做了冷冻研究,旨在探索不同发育时期的胚胎对一步细管内冷冻解冻耐受性存在的差异,为哺乳动物胚胎冷冻和移植提供资料。解冻后体外培养结果表明,晚期桑椹胚(包括致密桑椹胚和致密后桑椹胚两个阶段)的抗冻能力最强,体外发育率致密桑椹胚为80.0%(32/40)、致密后桑椹胚为78.0%(32/41);早期桑椹胚和早期囊胚次之,体外发育率为62.2%(28/45)和66.1%(39/59);囊胚和扩展囊胚的抗冻能力最低,体外发育率仅为51.6%(31/60)和54.5%(18/33)。  相似文献   

3.
家兔胚胎细胞核移植的研究   总被引:3,自引:1,他引:2  
研究改进了兔胚胎细胞核移植的技术体系,并对核移植胚胎的体外培养以及克隆胚胎的体内发育进行了试验。结果表明:卵母细胞去核率为88.9%(8/9),重组胚融合率为76.7%(176/229),将融合的重组胚与兔胎儿成纤维细胞共同培养,其2 ̄4细胞发育率、8 ̄16细胞发育率以及桑椹胚和囊胚的发育率分别为65.7%(23/35)、28.6%(10/35)、22.9%(8/35),显著高于“TCM-199+10%FCS”系统培养的43.3%(13/30)、26.7%(8/30)、16.7%(5/30)。16及32细胞期卵裂球的重组胚可发育到产仔,将111枚重组胚移植给9只同期处理的受体母兔,2只妊娠,其中1只产出2只足月克隆仔兔,1只在产前1周(妊娠22d)流产。  相似文献   

4.
生产条件下,徒手二分割安哥拉山羊晚期桑椹胚和囊胚。用手术方法将裸半胚移植于受体羊子宫角。产羔受体率为29.4%(10/34),共产羔11只,其中1对为同卵双生,半胚成羔率为20.O%(11/55)。早期囊胚、囊胚和扩张囊胚的半胚,移植后半胚成羔率分别为28.6%(2/7)、33.3%(7/21)和9.5%(2/21)。于受体羊黄体侧子宫角移植2枚半胚或两侧各移植1枚半胚时,半胚成羔率分别为33.3%(8/24)和16.7%(3/18)。  相似文献   

5.
小鼠电融合胚胎发育影响因素的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
电融合技术,是获得四倍体胚胎的主要手段.本试验研究了各种不同因素,对小鼠电融合胚发育的影响.结果表明,电刺激前后,使用不同的操作液对融合胚发育有影响.电刺激前使用M2液、电刺激后在Whitten氏液中融合,然后转入CZB液中培养,这一操作体系(M/W—CZB)效果最好,融合胚的囊胚发育率为80.5%,显著高于M/W—W,W/W—W,W/W—CZB组,后者的囊胚发育率分别为0,0,54.5%(P<0.05).试验还发现,刺激强度为1.0kv/cm,80μs;1.0kv/cm.40μs和0.8ky/cm,80μs时,融合囊胚的发育率分别为79.0,81.9和71.1%.HCG注射后47h、48h的2—细胞胚胎的融合胚发育率,显著高于(P<0.01)HCG注射后42h、44h和46h的,囊胚发育率分别为82.9,80.6,0,0和22.8%.  相似文献   

6.
用FSH-PGF_(2α)超排黑白花奶牛22头,以非手术方法采得7~8日龄胚胎68枚,其中45枚胚胎用于一步冷冻试验。水浴解冻后共回收40枚胚胎。用1.0mol/L蔗糖一步除去保护剂,胚胎形态完好率为90%(36/40);荧光染色阳性率为87.5%(7/8);体外培养发育率为75%(6/8);冻胚移植受体妊娠率为43.5%(10/23)。  相似文献   

7.
安哥拉山羊胚胎徒手分割和移植试验   总被引:5,自引:0,他引:5  
生产条件下,徒手二分割安哥拉山羊晚期桑椹胚和囊胚。用手术方法将裸半胚移植于受体羊子宫角。产羔受体率为29.4%,共产羔11只,其中1对为同卵双生,半胚成羔率为20.0%(11/55)。早期囊胚、囊胚和扩张囊胚的半胚,移植后半胚成羔率分别为28.6%(2/7)、33.3%(7/21)和9.5%(2/21)。  相似文献   

8.
小鼠2细胞胚卵裂球电融合的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
分别用800v/cm、40~80μs的单个电脉冲;800v/cm、160~320μs的单个电脉冲;1000v/cm、160~320μs的单个电脉冲;1200v/cm、160~320μs的单个电脉冲;1000v/cm、160~320μs的2个电脉冲所获得的胚胎融合率分别为84.6%(33/39),100.0%(59/59),97.4%(74/76),95.1%(39/41),64.7%(11/17)。融合胚作培养后,2细胞胚的发育率分别为15.2%(5/33),39.0%(23/59),47.3%(35/74),43.6%(17/39),18.2%(2/11)。以1000v/cm,160~320μs的单个脉冲诱导注射LH39~43h,44~48h回收的2细胞胚,胚胎融合率分别为100.0%(27/27),96.4%(27/28);发育率分别为44.4%(12/27),33.3%(9/27)。2细胞胚卵裂球融合的适宜条件为1000v/cm和160~320μs的单个脉冲。  相似文献   

9.
牛磺酸对牛体外受精早期胚胎发育的影响   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
研究了牛体外受精后早期胚胎体外发育时向其基础培养液中加入牛磺酸对胚胎桑椹胚率、囊胚率和孵化囊胚率的影响。试验一:以TCM-199+10%FBS为基础培养液(对照组),再加入7、14mmol/L的牛磺酸(试验组),试验组与对照组的桑椹胚率分别为48.1%、47.4%和43.2%;囊胚率分别为26.4%、22.3%和21.0%;孵化囊胚率分别为21.8%、18.7%和0%。试验二:IVF后2细胞、4~8细胞及8~16细胞期,在基础培养液中分别添加7mmol/L的牛磺酸时,桑椹胚率分别为48.7%、57.1%、52.0%,囊胚率分别为25.1%、30.7%、27.9%,孵化囊胚率分别为25.9%、28.6%、25.0%;而添加14mmol/L牛磺酸组时,桑椹胚率分别为50.4%、56.4%、55.4%,囊胚率分别为26.5%、31.3%、27.7%,孵化囊胚率分别为27.5%、31.1%、29.9%。结果表明,体外发育培养液中添加7mmol/L牛磺酸可显著提高桑椹胚率和囊胚率(P〈O.05),并且在4~8细胞期添加14mmol/L牛磺酸最为合适。  相似文献   

10.
奶牛和小鼠半胚低温冷冻的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
本实验对小鼠裸半胚采取了多种不同的处理方式,其中冷冻前不培养、冷冻前经短时间培养和冷冻前经长时间培养的冷冻半胚解冻后培养发育率分别为14.55%、26.67%和6.12%;装透明带半胚和装透明带后再用琼脂包埋半胚的解冻后培养发育率分别为56.67%和64.29%;小鼠半胚快速冷冻解冻的培养发育率为62.00%。此外.将10枚奶牛半胚装带、包埋、冷冻解冻后,移植给5头受体.结果有1头妊娠;奶牛整胚冷冻后分割的半胚移植妊娠率为28.57%(4/14)。  相似文献   

11.
水牛胚胎分割技术的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
为探讨水牛桑椹胚去致密化和不同分割方法对水牛切割胚发育效果的影响,将体外受精获得的水牛桑椹胚(第5d)和囊胚(第6~7d)分割后进行体外培养,观察其发育情况。结果显示:(1)水牛桑椹胚经去致密化处理后,其分割成功率(67.69%vs.51.71%)和囊胚发育率(58.30%vs.41.13%)均显著高于未处理组(P〈0.01),但囊胚细胞数差异不显著(P〉0.05);(2)以直接分割法和单臂分割法分别分割桑椹胚和囊胚,其分割成功率、囊胚发育率和囊胚细胞数三者均无显著差异(P〉0.05)。可见,水牛桑椹胚去致密化有利于切割胚的成活和发育,而直接分割法和单臂分割法均可用于水牛桑椹胚和囊胚的分割。  相似文献   

12.
取自猪卵巢含卵丘细胞且胞质均匀的、胞质不均匀和不含卵丘细胞胞质均匀3类卵母细胞,台盘蓝染色的存活率分别为100%,10%和40%,3者差异极显著。A,B,C,D4种培养液培养的成熟率分别为16.2%,61.5%,55.2%,41.5%,差异极显著。E,C,F3种培养液培养的成熟率分别为35.5%,47.8%,52.6%,在E培养液中加入PMSG和E_2能显著地提高成熟率。C液与卵泡液[加入2×10 ̄(-6)mol/(L·s)FSH]培养的成熟率分别为50%,44.4%,受精后的卵裂率分别为16%,10%,成熟率、卵裂率间均无显著差异。卵母细胞体外成熟培养36,40,44h后授精,其相应的受精率分别为26.7%,44.4%,45.8%;卵裂率分别为0.30%,20%;以培养40,44h的效果稍好,但三者差异不显著。  相似文献   

13.
小鼠胚胎冷冻保存试验   总被引:2,自引:0,他引:2  
应用4~10周令的杂种 CB6/Han 和纯种 C57BL/Han 小鼠73只进行试验,共采胚胎523枚,将发育正常,形态完好的157枚胚胎低温冷冻保存。解冻后回收率为83.4%,其中45%(59枚)形态完好,(囊胚56%,桑椹胚20%)。将其培养24—48小时后,71.2%(42枚)继续发育到扩张囊胚(其中囊胚为76.5%,桑椹胚为37.5%)。应用3′6′—二乙酰基荧光素(FDA)染色进行胚胎质量评定,对胚胎无损害。  相似文献   

14.
选用杜洛克2~16细胞期胚胎卵裂球作核供体,湖北白猪卵母细胞作核受体,通过显微操作和电融合法构成重组胚。体外培养时,以融合前2h,1h激活及融合前不激活的卵母细胞做核受体的重组胚,发育率分别为64.6%(31/48),55.3%(26/47)和34.5%(19/55)。61枚重组胚移入同步发情的5头受体母猪输卵管,1头于妊娠117d产下5头核移植仔猪。结果表明,激活卵母细胞作核受体优于未激活卵母细胞。成熟卵母细胞的胞质对于移入的核具有重排能力  相似文献   

15.
家兔胚胎细胞核移植的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
兔超排后收集卵母细胞和16细胞胚,以Mc-Grath-Solter和Willadsen两种去(注)核方法,将16细胞胚细胞核经电融合植入去核成熟卵母细胞内,经体外培养或中间受体培养,使移核胚发育.结果表明:(1)兔胚核移植中上述两种去(注)法的成功率无差异;(2)hcG注射后13~15h,67.8%的卵母细胞保留有第一极体;(3)强度为0.63kV/cm,持续160μs的一次电脉冲可使70.8%的注核胚融合,同样的电脉冲刺激卵母细胞的活化率为61.1%;(4)兔移核胚在中间受体内或体外均可发育,在中间受体内有23.0%可以发育到桑椹胚或囊胚.  相似文献   

16.
小鼠胚胎切割取样后体外培养发育能力的研究   总被引:2,自引:1,他引:2  
本文对小鼠胚胎切割取样细胞数量的多少,取样后胚胎在室温中停留时间以及透明带存留与否的体外发育情况进行了研究,目的在于为牛胚胎性别鉴定切割取样时供借鉴和探讨。实验中的胚胎依据切割取样的细胞数分10个细胞以内和大于10个细胞以上两个组。其体外培养发育率分别为95.7%(67/70)和76.2%(32/42),两者差异极显著(P<0.01);其中晚期桑椹胚、早期羹胚、扩展囊胚的体外发育率分别为87.7%(64/73)、86.2%(25/29)、100%(10/10),三者之间差异不显著(P>0.05);培养前在室温下停留3~7h和9h的体外培养发育率分别为94.8%(73/77)、57.1%(20/35),两者差异极显著(P<0.01);胚胎取样后透明带存留和脱失的体外培养发育率分别为87.9%(51/58)和83.3%(45/54),两者差异不显著(P>0.05)。  相似文献   

17.
咖啡因预处理解冻精液对牛体外受精的影响   总被引:12,自引:0,他引:12  
用2.5mM咖啡因处理解冻牛精液10min,或5.0mM咖啡因处理30min,精子经离心后加入到不含咖啡因的受精液中进行体外受精,均获得较高卵裂率(分别为89.1%、89.9%)及囊胚率(分别为44.4%、45.9%),并且第7天一级囊胚数较多。  相似文献   

18.
用酶分离小鼠早期胚胎的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
用酶分离小白鼠2--细胞、4--细胞和8--细胞胚胎,获取单个卵裂球,将其培养在含有牛血清蛋白质的CZB培养基微滴内。培养的小白鼠胚胎发育情况有3种:(1)正常发育;(2)泡囊化;(3)不发育。在体外培养条件下2--细胞单个卵裂球有86.5%发育成2--细胞;有35.1%发育成4--细胞,有8.1%发育到8--细胞,有5.4%发育到桑椹胚;4--细胞胚的单个卵裂球中有83.3%发育到2--细胞,37.5%发育到4--细胞,12.5%发育到8--细胞,8.3%发育到桑椹胚;在8--细胞胚的单个卵裂球中有46.7%发育到2--细胞,26.7%发育到4--细胞,13.3%发育到8--细胞、6.7%发育到桑椹胚。实验结果表明用酶分离小白鼠早期胚胎,所获卵裂球具有一定的继续发育能力,而且没有透明带也能发育。  相似文献   

19.
24头初情期前的枫泾小母猪以PMSG、HCG进行超排处理,平均获得23.4枚卵子,人工授精后28 ̄50h超排的卵母细胞的受精率为98.1%,受精卵发育至桑椹胚和囊胚的比例为89.7%。采用外科手术将180枚受精卵移植至8头同期发情的枫泾母猪子宫,其中有5头妊娠,产仔44头,胚胎移植妊娠率为62.5%  相似文献   

20.
用快速冷冻方法,冷冻小鼠的2-细胞胚、4-细胞胚、8-细胞胚、桑椹胚和囊胚,低温保护液分别含有0.5,1.5,2.5,4mol/L丙二醇,含10%的犊牛血清和0.25mol/L蔗糖,对于8-细胞以前的小鼠胚胎,快速冷冻保存时丙二醇的浓度在2.5mol/L和4mol/L时效果较好,随着小鼠早期胚胎(囊胚以前)的发育,抗低温冷冻的能力加强。  相似文献   

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