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以羽衣甘蓝（Brassica oleracea var. acephala）自交不亲和系（S13-b S13-b）为试验材料,利用RT-PCR的方法分离其ARC1基因cDNA序列（命名为BoARC1,GenBank登录号为EU344909）。BoARC1 cDNA序列中含有1个1 992 bp的开放读码框（ORF）,编码1个含有663个氨基酸的蛋白质。羽衣甘蓝BoARC1与油菜BnARC1的氨基酸序列具有94%的一致性;Southern杂交结果显示BoARC1在基因组中只存在单一拷贝;Northern杂交结果显示BoARC1特异性地在柱头组织中表达;在酵母双杂交试验分析中,BoARC1能够与SRK3、SRK 13-b和SRK910的胞内激酶域发生相互作用。 相似文献
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野生西瓜种质PI296341-FR抗枯萎病菌生理小种2的遗传规律 总被引：1，自引：0，他引：1
以抗枯萎病的野生西瓜种质PI296341-FR和高度感病的高品质西瓜自交系97103为亲本杂交,获得P1,P2,F1,B1,B2,F2等6世代及RILs（F2S8）永久分离群体。采用植物数量性状主基因 + 多基因混合遗传模型,进行6世代联合分析和RILs（F2S8）联合分析,探讨PI296341-FR对西瓜枯萎病菌生理小种 2 的抗性遗传规律。6世代分析结果表明,对生理小种2的抗性遗传符合1对加性主基因 + 加性—显性多基因遗传模型,主基因遗传率在B1,B2和F2群体中分别为31.8%,23.4%和48.6%,加性效应为0;多基因遗传率为16.5% ~ 43.9%,加性效应为2.24,显性效应为–0.75。RILs（F2S8）联合分析显示,对生理小种2的抗性遗传符合3对连锁的等加性主基因遗传模型,主基因遗传率为66.2%,加性效应–0.51,主基因间重组率0.16。两种遗传模型分析结果显示：PI296341-FR对西瓜枯萎病菌生理小种2的抗性遗传由主基因和微效基因共同控制,微效基因加性效应与显性效应的绝对值均高于主基因。 相似文献
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茄子果形遗传研究 总被引：4，自引：2，他引：2
以果形差异显著的3个茄子高代自交系106（扁圆）、114（短筒）和111（长筒）为试验材料,用人工和计算机图像测定相结合获得果形指数和三角果形指数,通过P1、P2、F1、B1、B2和F2世代联合分析,研究茄子果形性状遗传规律。结果表明：组合Ⅰ（106 × 114）和组合Ⅱ（114 × 111）果形分离群体的果形指数以及组合Ⅰ分离群体的三角果形指数均呈单峰偏态分布,说明茄子果形属于数量性状,存在主基因效应;茄子果形性状符合D-2遗传模型,即符合一对加性主基因 + 加性—显性多基因模型;主基因遗传力以F2代最高,多基因遗传力以B2代最高。茄子果形性状遗传总体表现出多基因遗传特征,果形选择效率在F2代中最高。 相似文献
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甘蓝花粉管钙感应蛋白CaM 与SRK 相互作用研究 总被引：2，自引：0，他引：2
为研究甘蓝花粉管钙感应蛋白CaM 与SRK 相互作用的分子机理及其可能相互作用的区域,
从自交不亲和甘蓝材料‘E1’中分别克隆得到CaM12 基因450 bp 及S 位点受体激酶（SRK7）基因全长
序列2 118 bp,并亚克隆得到SRK 胞外域（eSRK）和胞内激酶域（iSRK）,构建原核表达载体pGEX-CaM12、
pCold-eSRK 和pCold-iSRK,转化E. coli BL21（DE3）进行原核表达,表达产物纯化后进行体外相互作用,
结果表明CaM12 能够与SRK7 进行相互作用,但作用区域是iSRK7 而不是eSRK7。为进一步验证其相互
作用,本研究利用酵母双杂交系统,构建pGBKT7-CaM12、pGADT7-eSRK7、pGADT7-iSRK7 和
pGADT7-SRK7 酵母表达载体,转化相应酵母Y2HGold 和Y187 感受态细胞后未出现自激活和毒性现象,
相互作用结果与原核表达检测一致。同时将CaM12 的3 个EF-hands 结构域突变体CaM12-2-、CaM12-23-
和CaM12-234-与iSRK7 分别构建酵母表达载体pGADT7-CAM12-2-、pGADT7-CAM12-23-、pGADT7-
CAM12-234-,检测其相互作用。结果表明CaM12 EF-hands 突变体CaM12-2-、CaM12-23-和CaM12-234-
在酵母双杂交系统中均不能与iSRK7 片段发生相互作用,说明CaM12 的EF-hands 结构域突变后失去结
合Ca2+能力而不能与iSRK7 相互作用。该研究可为自交不亲和机理提供新的参考依据。
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白菜NRT2基因的克隆及表达模式分析 总被引：1，自引：1，他引：0
以白菜（Brassica campestris ssp. chinensis Makino）品种‘苏州青’为试材,采用RT-PCR技术,获得1个高亲和硝酸盐转运蛋白基因（NRT2）的cDNA序列,全长1 593 bp,推断其编码530个氨基酸,命名为BcNRT2。序列分析表明：BcNRT2基因与甘蓝型油菜BnNRT2基因和拟南芥AtNRT2.1基因核苷酸序列的相似性分别为98%和90%,氨基酸序列的相似性分别为99%和95%,表明植物中NRT2基因保守度较高。实时定量PCR表达分析表明,BcNRT2在白菜根部的表达量最高,为诱导型表达。低浓度NO3-（0.2 mmol · L-1 KNO3）处理0.5 h后其表达量迅速上升,BcNRT2可能为NO3-感受器。高浓度NO3-（20 mmol · L-1 KNO3）处理后其表达量更高,持续时间较长,可能是受到低亲和硝酸盐转运蛋白NRT1.1的调控而产生的高水平响应。原生质体的瞬时表达显示,BcNRT2蛋白位于细胞膜上。 相似文献
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不同光强与温度处理对‘肉芙蓉’牡丹叶片PSⅡ光化学活性的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
以‘肉芙蓉’牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.‘Roufurong’）叶片为材料,研究了100、700和1 400 μmol · m-2 · s-1光强下不同温度（15、20、25、30、35和40 ℃）处理对叶片光合特性和叶绿素荧光参数的影响。结果表明：随光强增加,叶片最大光化学效率（Fv/Fm）、光系统Ⅱ实际光化学效率（ΦPSⅡ）、光下开放的PSⅡ反应中心激发能捕获效率（Fv′/Fm′）和光化学猝灭系数（qP）均显著下降,其中强光1 400 μmol · m-2 · s-1下最低。与室温（25 ℃）处理的叶片相比,低温（15 ℃）和高温（40 ℃）处理叶片Fv/Fm、ΦPSⅡ、Fv′/Fm′、qP急剧下降。同时,随光强增加,PSⅠ激发能分配系数α显著性降低,PSⅡ激发能分配系数β却显著升高,激发能分配严重偏离平衡。强光高温胁迫下,虽然叶片热耗散（NPQ）能力迅速增加,但是由于光化学效率的下降,光化学反应对激发能的利用大幅度下降,同时,由于两光系统激发能分配严重偏离平衡状态,过多的激发能分配给PSⅡ,导致PSⅡ激发压（1–qP）增大,加剧了PSⅡ伤害程度。 相似文献
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研究了一氧化氮（NO）和过氧化氢（H2O2）在吲哚丁酸（IBA）诱导万寿菊（Tagetes erecta L.）外植体不定根形成过程中的作用及其相互关系。结果表明：外源IBA与NO、H2O2一样对万寿菊外植体不定根形成有促进作用,且IBA与NO,IBA与H2O2协同增效。NO清除剂cPTIO和H2O2清除剂CAT均能抑制IBA对不定根形成的促进作用。同样,cPTIO和CAT亦能抵消IBA对NPA抑制不定根形成的逆转作用。可见,NO和H2O2是IBA诱导万寿菊不定根形成的必要条件。IBA处理提高了外植体内源NO和H2O2的含量,说明IBA是通过增加内源NO和H2O2水平实现对不定根形成的促进作用。cPTIO和L-NAME抑制了IBA对H2O2含量的促进作用,而CAT和DPI却不能抑制IBA对NO含量的促进作用。可见,NO和H2O2是IBA诱导万寿菊不定根形成的两个下游信号分子,且NO可能位于H2O2的上游。 相似文献
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菜豆抗炭疽病基因SCAR标记在品种抗性鉴定中的应用 总被引：4，自引：0，他引：4
利用5个来自于普通菜豆抗炭疽病基因SCAR 标记（SCA1000、SH181100、SAB3400、SB12350和SCF101072）引物组,对143份荚用菜豆资源进行DNA水平的鉴定。同时使用苗期接种方法,验证了143份资源的抗病性。结果表明：共有61份资源检测到SCAR标记。在这些资源中,有40份具有SCA1000标记,40份具有SCF101072标记,19份兼有SCA1000和SCF101072标记,其余的82份未检测到SCAR标记。这143份资源中均未检测到SAB3400、SB12350和SH181100扩增带。群体抗性鉴定结果显示：143份资源中,抗病的有16份。其中含有2个SCAR标记,群体抗性结果表现抗病的有5份,含有1个SCAR标记,并且群体抗性结果表现抗病的有3份。通过本研究明确了：荚用菜豆中Co-2和Co-10基因含量比较丰富,除扁圆荚类型紫荚菜豆中Co-2基因含量多于Co-10基因外,这两个抗病基因在其它类型的菜豆中分布比较均匀。在油豆类型和扁圆荚类型绿荚菜豆资源中,同时含有此两个抗病基因标记的较多。在油豆类型资源中,含有两个抗病标记,并且群体抗性表现抗病的最多。 相似文献
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钙对盐胁迫下西瓜光合特性和果实品质的影响 总被引：7，自引：0，他引：7
采用营养液水培方式,以小型西瓜（Citrullus lanatus Mansfeld）品种‘秀丽’为试材,研究了营养液增补Ca2+对盐胁迫（100 mmol · L-1 NaCl）下西瓜幼苗光合特性,叶绿素荧光,花粉萌发,果实品质的影响。结果表明,当营养液中Ca2+浓度由4 mmol · L-1升高到6 mmol · L-1时：①显著提高盐胁迫植株叶片的气孔导度（Gs）、胞间二氧化碳浓度（Ci）、净光合速率（Pn）、PSⅡ的最大光化学量子产量（Fv/Fm）、PSⅡ的实际光化学效率（ΦPSII）、相对电子传递速率（rETR）、光化学猝灭系数（qP）和非光化学猝灭系数（qN）,降低气孔限制值（Ls）和光抑制（1–qP/qN）;②显著提高盐胁迫果实质量及果实中抗坏血酸、可溶性固形物、可溶性总糖、可溶性蛋白质和游离氨基酸的含量,降低有机酸的含量;同时降低果实中Na+含量,提高果实中Ca2+、Mg2+、Fe、Cu、Mn含量;③明显促进盐胁迫花粉萌发和花粉管伸长。表明Ca2+可有效降低盐胁迫对光合作用的气孔限制,缓解盐胁迫对光合器官的伤害,使叶片保持较高的光合性能;促进盐胁迫下西瓜的生殖生长,有利于果实的生长发育及矿质营养平衡,进而改善果实品质。因此,Ca2+可通过调节光合代谢和生殖代谢来提高西瓜植株的耐盐性。 相似文献
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甘蓝中硫氧还蛋白编码基因THL1的分子特性及表达研究 总被引：3，自引：0，他引：3
采用PCR和RT2PCR技术, 以‘E1’甘蓝基因组DNA和柱头cDNA为模板对THL1基因进行扩增克隆, 得到的片段长度分别为732 bp和455 bp。序列分析表明, 克隆的DNA和cDNA序列与甘蓝‘西园四号’THL1的DNA和cDNA同源性分别为97.9%和98.3%, 两条序列内含子的大小不同; 同时, 前者第2内含子不符合典型的GT2AG规则: 即第2个内含子3′端碱基为AT。将THL1基因cDNA序列定向克隆到原核表达载体pET-43.1a ( + ) , 构建融合表达质粒pET43.1a ( + ) -THL1, 在大肠杆菌BL21中表达出分子量为74kD的融合蛋白, 经胰岛素检测, THL1有氧化还原活性, 表明THL1在大肠杆菌中得到了正确表达。 相似文献
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eSRK（S位点受体激酶胞外域）、SCR/SP11（S位点富含半胱氨酸蛋白-S位点蛋白11）和THL1（类硫氧还蛋白）是甘蓝自交不亲和性信号传导过程重要的3个元件。利用PCR技术获得两种甘蓝SCR2（class-Ⅱ）、eSRK2（class-Ⅱ）、THL1、SRKJ（class-Ⅰ，SRK6激酶域）和eSRK28（class-Ⅰ）的编码序列，并分别构建以pGBKT7为载体的SCR2、THL1的重组诱饵质粒和以pGADT7为载体的eSRK2、eSRK28、SRKJ的重组猎物质粒。利用酵母双杂交系统验证eSRK2-SCR2、eSRK28-SCR2、SRKJ-THL1的相互作用。重组质粒在宿主细胞中未产生毒性及自激活作用，表明重组表达载体构建成功；组合Y2HGold〔pGBKT7-SCR2〕×Y187〔pGADT7-eSRK2〕在三缺平板（SD/-Trp-Leu-His/x-α-gal/AbA，TDO/x/A）上生长出蓝色克隆，激活了报告基因AUR1-C、MEL1、HIS3；组合Y2HGold〔pGBKT7-SCR2〕×Y187〔pGADT7-eSRK28〕能够在二缺平板（SD/-Trp-Leu）上生长，但在三缺平板上不生长，表明不同单倍型SRK-SCR可能不发生相互作用；组合Y187〔pGADT7-SRKJ〕×Y2HGold〔pGBKT7-THL1〕能够在四缺平板上生长，激活了4种报告基因（AUR1-C、MEL1、HIS3、ADE2）。相同的单倍型SRK与SCR之间能够相互作用，不同的单倍型之间不会发生相互作用；酵母中报告基因表达的数目和类型的差异反映了class-Ⅱ型内部的SCR-SRK和class-Ⅰ的SCR-SRK互作强度，Ⅰ型高于Ⅱ型；THL与SRK之间存在较高的互作强度。这为Ⅰ型和Ⅱ型不同的自交不亲和性表型所依赖的3个起始信号传导元件之间的识别程度差异提供了直接证据和新内容。 相似文献
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大白菜细胞核基因互作雄性不育系选育及应用模式 总被引：42，自引：3，他引：39
从大白菜农家品种‘万泉青邦’中发现了显性不育基因Sp及其与显性上位可育基因Ms的互作规律,概括出大白菜细胞核基因互作雄性不育系应用模式。育成Sp、Ms基因互作甲型两用系AB158及乙型可育株系AB8102-1-7-1,并用其配制成功大白菜细胞核基因互作雄性不育系88-1A。88-1A具有稳定的100％不育株率和不育度,结实正常,其优良杂交种F_18801已大面积制种应用。 相似文献
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研究了不同菌剂及不同菌剂浓度处理对高羊茅草坪剪草堆肥的催化腐熟效果。结果表明:接种菌剂A时,菌剂量与原料的比为0.2:1000,堆肥的感官变化和生物降解度最明显,堆肥的腐熟效果最好。接种菌剂B时,菌剂量与原料的比为0.4:1000,堆肥的温度变化和生物降解度最明显,堆肥的腐熟效果最好。接种菌剂C时,菌剂量与原料的比为0.025:1000,堆肥的感官变化和生物降解度最明显,堆肥的腐熟效果最好。在3种菌剂中,菌剂C的菌剂量与原料的比为0.025:1000时,堆肥的腐熟效果比菌剂A和菌剂B都好。 相似文献
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MLPK(M–位点受体激酶)是芸薹属自交不亲和正向调控关键元件,其参与自交不亲和信号传导的分子机制尚不明确,同时自交不亲和下游信号元件也有待于进一步分离。为了探索分离MLPK互作蛋白的思路和方法,构建了不含核定位信号的MLPK短截蛋白(MLPK-T),并利用酵母双杂交检测到MLPK与臂重复蛋白1(ARC1)作用,通过全基因组鉴定分别获得了96个甘蓝、101个白菜、70个琴叶拟南芥和62个拟南芥PUB蛋白,其中含有臂重复序列的PUB蛋白共为127个。通过系统进化分析,筛选到8个含臂重复序列的甘蓝BoPUB蛋白,其8个基因全部在柱头内表达,且成功利用酵母双杂交检测到MLPK与3个含臂重复序列的BoPUB蛋白Bol008579、Bol016165和Bol023511相互作用。 相似文献
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为了研究不同贮藏时间及花瓣张开角度对花粉活力的影响,采用I2-KI染色法和蔗糖培养基培养法对花瓣张开角度为A(0°~45°)、B(45°~90°)和C(90°~180°)的番茄花粉活力及花粉管长度进行测定。试验结果表明,不同贮藏时间及花瓣张开不同角度间的花粉活力存在显著差异。花瓣张开角度A的花粉活力随着贮藏时间增加呈先升高后降低的趋势,以室温贮藏3 d的花粉染色率最高。花瓣张开角度B和C则以采摘当天活力最强,5 d后所有花粉活力均低于5%,基本丧失萌发能力。新采摘的有活力花粉散落于蔗糖15 g/L+H3BO30.03 g/L+CaCl20.02 g/L+琼脂6 g/L的培养基表面,1~2 min即开始萌动,20 min时,花粉管长度已达到花粉粒直径的2.75倍,60 min时达到7.5倍。花粉管在培养基上相互接触会出现相互作用,抑制部分花粉管生长。 相似文献
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AIM: To investigate the effects of 3-phosphoinositide-dependent protein-1 (PDK1) on the biological characteristics of non-small-cell lung cancer cell line A549 and the underlying mechanisms.METHODS: The expression levels of PDK1 in lung normal epithelial cell line BEAS-2B and different lung cancer cell lines H460, SPCA1 and A549 were determined by Western blot and real-time PCR. Small interfering RNA was used to down-regulated PDK1 expression in the A549 cells, and then cell viability and apoptosis were measured by CCK-8 assay and flow cytometry, respectively. The expression of cell cycle-and apoptosis-related molecules at protein level and the activation of Akt/FoxO1 pathway were measured by Western blot. Insulin-like growth factor-1 (IGF-1, one of the most potent Akt activators) was used to evaluate the interaction between PDK1 and Akt/FoxO1 pathway.RESULTS: Compared with lung normal epithelial cell line BEAS-2B, PDK1 expression in the lung cancer cell lines was obviously increased (P<0.05). Knockdown of PDK1 suppressed cell viability and cell cycle, but promoted the apoptosis of the A549 cells. The results of Western blot showed that the protein levels of cyclin D1, CDK4, p-Rb, Bcl-2, p-Akt and cytoplasmic p-FoxO1 were significantly decreased after knockdown of PDK1, with increases in the protein levels of P27, cleaved caspase-3 and nuclear FoxO1. Pre-incubation with IGF-1 partly reversed the effect of PDK1 knockdown on Akt/FoxO1 pathway and increased the viability of A549 cells.CONCLUSION: In human non-small-cell lung cancer A549 cells, knockdown of PDK1 suppresses cell viability and promotes cell apoptosis by regulating the expression of cell cycle-and apoptosis-related molecules via Akt/FoxO1 pathway, suggesting that PDK1 may be a potential target for diagnosis and theatment of lung cancer. 相似文献