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1.
陆文静 《农业科技译丛(杭州)》1997,(4):18-23
本实验从小麦根分离得到了一种具有溶解不溶性无机酸盐的细菌，Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ。并研究比较了该解磷细菌和遗传重组Ｅ．ｃｏｌｉ。其次比较了Ｅ．ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ与已知酸的释放磷的能力。在第一部分研究工作顺Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９菌株内构建了Ｅ．ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ染色体ＤＮＡ中的磷酸盐溶解原粘粒文库。具有溶解磷酸直遥克隆于ＪＭ１０９在含有羟磷灰石（ＨＹ）的标准培养基 相似文献
2.
在发现健康桑蚕幼虫消化道中存在β－溶血性的肠球菌的基础上，首次证实了肠球菌中只在厌氧条件下发生β－溶血反应菌的存在．Ｃｒａｉｇｉｅ试管法和毛细管法进一步确认了分离肠球菌菌株的生物性运动．“００８２”分离菌株在接种菌量较多、培养温度较高和碱性较大（ｐＨ值９～１０）条件下显示了较强的运动性．因此，它也将较容易地附着在桑蚕幼虫的围食膜上 相似文献
3.
分别制备了遗传工程稻ＧＥＲ－１及其ＤＮＡ供体（慈利玉米）、ＤＮＡ受体（水稻湘早籼８号）的叶绿体ＤＮＡ（ｃｐＤＮＡ），对三者之间的多种限制性内切酶酶切图谱比较表明，ＧＥＲ－１的ｃｐＤＮＡ基本与ＤＮＡ受体水稻一致．进一步克隆了ＣＥＲ－１的ｐｓｂＡ基因，并构建其酶切图谱、测定其３′非翻译区（３′ＵＴＲ）序列，初步认为该基因的序列结构与水稻相同，从而排除了ＧＥＲ－１的性状变异是由其ｐｓｂＡ基因发生变化所致的可能．此外，对叶绿体ＤＮＡ的制备及酶切消化作了较深入的探讨 相似文献
4.
5.
李法圣 《北京农业大学学报》1995,21(3):317-331
本文描述了我国取食柳树和蒿的线角木虱９新种：柳管锥线角木虱Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｃｅｒａ ｔｕｂｃｏｎｉｃａ，疆柳线角木虱Ｅｕ．ｊａｎｉｓａｌｉｃｉｓ，柳条线角木虱Ｅｕ．ｇｒａｍｍｉｃａ，柳兜线角木虱Ｅｕ．ｃｕｃｕｌｌａｔａ，黄斑线角木虱Ｅｕ．ｆｌａｖｉｐｕｎｃｔａｔａ．黄花蒿线角木虱Ｅｕ．ａｒｔｅｍｉｓｉｃｏｌａ，蒿叶线角木虱Ｅｕ．ａｒｔｅｍｉｓｉｓｕｇａ，龙蒿线角木虱Ｅｕ．ｄｒｅｐａｎｏｉｄｅｓ和 相似文献
6.
目的：从重组人Ｂｃｌ－２质粒中制备对基因重组和ＤＮＡ测序等有用的ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体。方法：先将重组人Ｂｃ１－２质粒转化ＤＨ５α菌株,小规模制备此质粒ＤＮＡ,然后从低熔点琼脂糖凝胶中回收其中用ＥｃｏＲⅠ酶切的线性ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体,用Ｔ４ＤＮＡ连接酶催化连接并再次转化ＤＨ５α细菌,并用限制酶切鉴定,最后进行冻存和大量制备及纯化。结果：限制酶切分析证明两次转化的细菌分别是含重组人Ｂｃｌ－２质粒和ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体的工程菌。实验还大量制备了这两种质粒或载体ＤＮＡ,并用聚乙二醇沉淀法进行了纯化。结论：利用分子生物学技术成功地从重组人Ｂｃｌ－２质粒制备出ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体。 相似文献
7.
欧洲油菜花粉cDNA文库的构建 总被引：4，自引：0，他引：4
从欧洲油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓ）成熟花粉中提纯出ｍＲＮＡ．ｐｏｌｙ（Ａ）＋ｍＲＮＡ在ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）引导下，用反转录酶合成ｃＤ－ＮＡ第一链，用大肠杆菌ＲＮＡ酶Ｈ和大肠杆菌ＤＮＡ聚合酶Ｉ置换合成ＣＤＮＡ第二链．加上ＥｃｏＲＩ／ＮｏｔＩ接头。最后将双链ＤＮＡ克隆子λｇｔｌｌ载体中。用Ｂｃｐｌ作探针，杂交筛选构建的ｃＤＮＡ文库。 相似文献
8.
分别制备了遗传工程稻ＧＥＲ－１及其ＤＮＡ供体（慈利玉米）、ＤＮＡ受体（水稻湘早籼８号）的叶绿体ＤＮＡ（ｃｐＤＮＡ），对三者之间的多种限制性内切酶酶切图谱比较表明，ＧＥＲ－１的ｃｐＤＮＡ基本与ＤＮＡ受体水稻一致。进一步克隆了ＣＥＦ－１的ｐｓｂＡ基因，并构建其酶切图谱、测定其３＇非翻译区（３＇ＵＴＲ）序列，初步认为该基因的序列结构与水稻相同，从而排除了ＧＥＲ－１的性状变异是由其ｐｓｂＡ基因发生变化所致 相似文献
9.
目的：从重组人Ｂｃｌ－２质粒中制备对基因重组和ＤＮＡ测序等有用的ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体。方法：先将重组人Ｂｃｌ－２质粒转化ＤＨ５α菌株,小规模制备此质粒ＤＮＡ,然后从低熔点琼脂糖凝胶中回收其中用ＥｃｏＲ Ⅰ酶切的线性ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔⅡＫＳ（－）载体,用Ｔ４ＤＮＡ连接酶催化连接并再次转化ＤＨ５α细菌,并用限制酶切鉴定,最后进行冻存和大量制备及纯化。结果：限制酶切分析证明两次转化 相似文献
10.
在发现健康桑蚕幼虫消化道中存在β－溶血性的肠球菌的基础上，首次证实了肠球菌中只在厌氧条件下发生β－溶血反应菌的存在。Ｃｒａｉｇｉｅ试管法和毛细管法进一步确认了分离肠球菌菌株的生物性运动。“００８２”分离菌株在接种菌较多、培养温度较高和碱性较大（ｐＨ值９￣１０）条件下显示了较强的运动性。因此，它也将较容易地附着在桑蚕幼虫的围食膜上。 相似文献
11.
利用电脉冲交质粒ｐＨＴ３１０１和ｐＨＥ－４Ｄ分别转入大肠杆菌和苏云金杆菌,结果显示大肠杆菌ＤＮＡ的转化率为１０＾４－１０＾５．μｇ＾－１,苏云金杆菌的ＤＮＡ的转化率为１０＾２－１０＾３．μｇ＾－１,同时利用该法消除Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ菌株ＴＧ１和Ｂｔ菌株ＩＳＰ７８／１１中的ｐＨＴ３１０１质粒,消除率分别为８８．６％和６６．４％。比较了转化和质粒消除的条件并构建了一个工程菌。 相似文献
12.
柑桔小实蝇生物学特性及其防治研究 总被引：20，自引：0，他引：20
柑桔小实蝇Ｄａｃｕｓ（ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ）ｄｏｒｓａｌｉｓ（Ｈｅｎｄｅｌ）在云南景谷１年发生５代，以老熟幼虫和蛹在土壤中越冬或越夏。２月中至８月中旬，成虫产卵于芒果果实内，致使芒果腐烂。室内用４０％氧化乐果、５０％杀螟松和８０％的敌敌畏１０００、１５００倍液，对成虫的毒杀率达１００％，幼虫达８８．７３％，蛹为１０．０％。大田防治用１０００倍液，同时用性信息素进行诱杀，保果效果达９５．７４％。 相似文献
13.
家蚕核多角体病毒Lef—1和DA26基因的克隆及部分序列分析 总被引：2，自引：1，他引：2
ｌｅｆ－１和ＤＡ２６基因分别位于ｅｇｔ基因的上游和下游．从ｐＵＡｃ－ｅｇｔ中分离出ＥｃｏＲＩ－ＸｂａＩ１．１ｋｂ的ｅｇｔ基因片段，进行缺口平移标记，获得探针。与ＢｍＮＰＶＤＮＡ经ＨｉｎｄⅢ酶切、电泳、转移至ＮＣ膜的ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交，发现ＢｍＮＰＶＤＮＡ的ＨｉｎｄⅢＤ片段呈阳性。从ＢｍＮＰＶ基因组中分离出１０．４ｋｂ的ＨｉｎｄⅢＤ片段，用ＥｃｏＲＩ酶切得到ＨｉｎｄⅢ－ＥｃｏＲＩ２．２ｋｂ、ＥｃｏＲＩ１．４ｋｂ和ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄⅢ６．８ｋｂ３个片段，分别克隆于ｐＵＣ１９中，命名为ｐＵＨＥ２．２、ｐＵＥ１．４和ｐＵＥＨ６．８。经双链测序并与ＡｃＮＰＶ相关基因序列进行比较，发现ｌｅｆ－１基因被克隆于ｐＵＨＥ２．２中，ＤＡ２６基因克隆于ｐＵＥＨ６．８中。从所测定的ｌｅｆ－１和ＤＡ２６基因的启动子及５＇端部分序列来看，它们在ＡｃＮＰＶ和ＢｍＮＰＶ之间有极高的同源性。 相似文献
14.
用粘端连接法将构建于Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＦＤＢ２１３菌檄中的玉米谷氨酰胺合成酶（ＭＧＳ）ｃ－ＤＮＡ亚克隆于由农力质粒改造的ＰＢＩ１２１载体中。测定的７２个转化菌中７株（９．２％）插入ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片段。亚克隆后的质粒ＤＮＡ用ＨｉｎｄⅢ和ＢｓｔｘＩ酶解可确定其ｃ－ＤＮＡ片段的插入方向。结果显示：Ｐ９、Ｐ１５、Ｐ１６与Ｐ１７为正向插入,Ｐ２为反向插入的菌株。Ｐ６质粒ＤＮＡ进一步用直接基 相似文献
15.
拟输日本芒果蒸热杀虫处理试验研究 总被引：9，自引：0，他引：9
用蒸热处理的方法,可杀死接入鲜芒果中的桔小实蝇Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ（Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ）ｄｏｒｓａｌｉｓ（Ｈｅｎｄｅｌ）的卵和幼虫。经测定,１龄幼虫较２４ｈ卵和２～３龄幼虫对蒸热高温更具忍耐力。在蒸热果实中心温度升至４７℃时,保持１０ｍｉｎ,可将４９６０２．６头２龄幼虫完全杀死。处理试验的结果,完全符合日本政府的植物检疫要求。 相似文献
16.
本研究从鸡的消化道中分离出２ 株植物乳酸杆菌（ Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｌａｎｔｅｒｕ ｍ ） 、１ 株粪链球菌（ Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃｉｕ ｍ） ，鉴定后进行菌种产酸耐酸、菌种安全性、菌种组合筛选试验，结果表明：所选菌株是安全的、在ｐ Ｈ４ ．４ ～７ ．２９ 的范围内可以生长，且３ 株菌配合产酸效果最好；然后用这３ 株菌与动物营养教研室现有２ 株酵母菌（ Ｓａｃｃｈａｒｏ ｍｙｃｅｓ） ，选择１∶１ 的配合比例，以玉米为发酵底物，制成１ 种新型复合菌发酵剂。 相似文献
17.
在探讨原生质体制备、融合及再生条件的基础上，采用聚乙二醇（ＰＥＧ）对耐高温的酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）ＨＵ－ＴＹ－１Ａ菌株和淀粉发酵力最强的糖化酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｄｉ－ａｓｔａｔｉｃｕｓ）５２０６－１Ｂ菌株进行种间或同株间的原生质体融合，获得了数株ＨＵ－ＴＹ－１Ａ和５２０６－１Ｂ的同株以及种间融合株，融合率为（１．３～９．０）×１０￣（－６）．通过测定融合株的细胞体积大小、ＤＮＡ含量、遗传稳定性和营养要求等表明：融合株细胞体积和ＤＮＡ含量约为两亲株之和；种间融会株具有双亲株的遗传特性；融合株的倍性为２ｎ，３ｎ，４ｎ及５ｎ。 相似文献
18.
鸡白细胞介素-2 cDNA克隆 总被引：8，自引：1，他引：7
用哺乳动物细胞表达克隆系统克隆了鸡ＩＬ－２ｃＤＮＡ。以ＣｏｎＡ（２０μｇ／ｍＬ）诱导ＳＰＦ鸡脾脏淋巴细胞,第２０小时收集细胞,提取ｍＲＮＡ,以ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＰｌａｓｍｉｄＳｙｓｔｅｍｆｏｒｃＤＮＡＳｙｎｔｈｅｓｉｓ试剂盒合成ｃＤＮＡ,定向连结于穿梭质粒ｐＳＶ·ＳｐｏｒｔⅠ,构建ｃＤＮＡ文库。将文库分组提取重组质粒,转染ＣＯＳ－７细胞,表达ｃＤＮＡｓ。以淋巴细胞增殖试验检测表达产物ＩＬ－２活性。经过３轮筛选,获得１４个具有ＩＬ－２活性的克隆。选择其中４个进行酶切分析,结果显示这４个ｃＤＮＡ大小分别为１．５,１．０,０．８和０．８ｋｂ。 相似文献
19.
对肉仔鸡群暴发呼吸道病进行了部分细菌病源的分离鉴定，结果共分离出５种细菌，其中３种分别鉴定为埃希氏大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｅｈｉａｃｏｌｉ），克雷伯肺炎杆菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）和摩根氏变形杆菌（Ｍｉｒａｂｉｌｉａｐｒｏｔｕｓ）．另外两种尚待进一步鉴定． 相似文献
20.
以水稻抗瘟性近等基因系Ｈ７Ｒ和Ｈ７Ｓ为材料,采用ＰＣＲ－差别筛选（ＰＣＲｂａｓｅｄｄｉｆｅｒ－ｅｎｔｉａｌｓｃｒｅｅｎｉｎｇ）的方法分离和克隆水稻受稻瘟病菌诱导的抗性相关基因．第一轮筛选获得４２个差异表达的ｃＤＮＡ克隆,经ＰＣＲ扩增,转膜,反向Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交后,得到１２个阳性ｃＤＮＡ克隆．本文对ＰＣＲ－差别筛选的优缺点以及进一步的鉴定工作亦作了讨论． 相似文献