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正犬瘟热和水貂病毒性肠炎是在毛皮动物养殖业中广泛流行的两类急性、接触性传染病,病原分别是犬瘟热病毒(CDV)和水貂肠炎病毒(MEV)。疫苗接种是主要的预防手段[1-2]。但当前市售MEV灭活苗更新速度慢、灭活剂致癌,不能诱导细胞免疫反应;CDV弱毒苗易受母源抗体干扰,存在一过性免疫抑制、返祖散毒等问题[2-4]。因此,笔者设计了安全、特异性高的CDV-MEV二联多表位抗原,并对其免疫效 相似文献
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为建立检测水貂犬瘟热病毒(mink canine distemper virus, CDV)的微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)定量方法，以便提供水貂CDV在诊断检测方面的技术支持，本研究根据实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)检测方法原理，建立了水貂CDV数字PCR方法，并优化了反应条件，评估了特异性、敏感性以及重复性。结果表明：ddPCR方法检测CDV的最适引物浓度为900 nmol/L,探针浓度为250 nmol/L,退火温度为55℃,升降温度为2.5℃/s,最低检测下限为4.4拷贝/μL;除CDV特异性扩增，其他常见病毒特异性检测结果均为阴性；重复性试验的变异系数均小于5%。采用该微滴数字PCR和荧光定量RT-PCR方法对30份犬、貂、狐、貉等组织(其中CDV阳性样品7份)样品进行检测，检测结果与临床检测结果相符。本研究建立的微滴数字PCR方法对CDV定量检测特异性强、灵敏度高，重复性好，可以用于水貂CDV临床样品的核酸检测，对水貂CDV发病早期的诊断提供新的定量检测方法。 相似文献
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取山东某貂场疑似犬瘟热病毒（canine distemper virus,CDV）感染的水貂肝脏等组织病料,通过RT-PCR检测呈CDV阳性,且无水貂细小病毒存在,将病料接种原代CEF细胞、传代系Vero细胞和DF1细胞3种细胞进行病毒分离,通过优化细胞培养条件,最终在Vero细胞上传代培养成功,出现露珠状典型细胞病变（CPE）。分离毒应用RT-PCR、PCR产物测序、抗体中和试验（SN）、间接免疫荧光试验（IFA）及病毒包涵体检查等多种方法进行了CDV的鉴定,结果显示CDV阳性,表明分离到的病毒为水貂CDV,并将其命名为CDV LD-1株。 相似文献
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为了建立易于犬瘟热病毒(CDV)培养增殖的细胞系,试验采用BHK-21细胞为亲本细胞,将表达水貂信号淋巴细胞激活分子(SLAM)的真核表达质粒pDisplay-mink SLAM转染到细胞中,通过G418压力筛选并结合有限稀释法等方法成功构建出稳定表达水貂SLAM的单克隆细胞系BMS,并采用间接荧光免疫和PCR等方法进行初步鉴定。结果表明:应用该细胞系可有效提高CDV分离效率,并成功分离得到山东诸城水貂、狐狸CDV各1株。 相似文献
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为评价水貂病毒性肠炎杆状病毒载体灭活疫苗(简称MEV亚单位疫苗)与水貂犬瘟热活疫苗(简称CDV活疫苗)混合免疫的效果,本研究将两种疫苗混合后在室温静置不同时间测定犬瘟热病毒(CDV)含量,并选用30只健康水貂随机分为6组进行比对试验,其中G1和G2组免疫MEV亚单位疫苗稀释CDV活疫苗的混合疫苗,G3组为CDV活疫苗单独免疫组,G4组为MEV亚单位疫苗单独免疫组,G5和G6组分别为CDV攻毒组和MEV攻毒组。免疫后21 d采血检测CDV中和抗体,同时对G1、G3、G5组进行CDV攻毒;免疫后14 d采血检测MEV血凝抑制(HI)抗体,同时对G2、G4、G6组进行MEV攻毒。结果：两种疫苗混合后在室温静置2 h, CDV含量无明显下降。免疫后21 d, G1和G3组CDV中和抗体效价达到1∶64.6～1∶128.8,CDV攻毒后混合疫苗和CDV活疫苗免疫组的保护率均为100%。免疫后14 d, G2和G4组的MEV HI抗体效价达到1∶128～1∶1 024,MEV攻毒后混合疫苗和MEV亚单位疫苗免疫组的保护率均为100%。研究表明,MEV亚单位疫苗稀释CDV活疫苗,混合免疫后各疫苗的免... 相似文献
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为评价水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)冻干制剂在临床应用中的安全性和免疫效果,分别在吉林、辽宁两省选择饲养规模相似的3个毛皮兽场进行疫苗安全性(10头份)和免疫效力实验(1头份)研究,接种后观察动物的临床症状,检测抗体水平并随机选择部分水貂进行攻毒试验。结果显示,超剂量接种水貂未见有明显的临床症状,对水貂的生产性能无明显影响;水貂免疫疫苗后21 d即可获得达到免疫保护的抗体水平;免疫180 d仍能维持较高水平的抗体,且能够保护动物抵抗强毒攻击。试验表明,水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)冻干制剂具有较好的临床保护效果。 相似文献
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为了建立水貂源犬瘟热病毒(CDV)的大规模悬浮培养技术，实现细胞高密度生长和病毒高效增殖，本研究应用Cephodex微载体悬浮培养鸡胚成纤维细胞系DF-1细胞，增殖弱毒株CDV3。整个过程采用摇瓶培养法，通过对病毒培养温度、病毒收获时间等关键技术条件进行优化，确立最佳培养条件。结果表明，DF-1细胞37℃培养至72 h,接种CDV3,35℃继续培养72 h收获病毒，病毒滴度每0.1 mL可达105.0 TCID50。CDV微载体悬浮培养技术的初步建立，为高效水貂犬瘟热疫苗的研发生产奠定了重要的基础。 相似文献
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犬瘟热病毒的分离及部分特性研究 总被引：2，自引：0，他引：2
本试验通过消除组织培养中某些干扰因素,用鸡胚成纤维细胞(CEF)直接从水貂病料中分离出3株犬瘟热病毒,即QM—CDV、YM—CDV和ZM—CDV,并以3株国外犬瘟热弱毒作为参考株,对所分离毒株的部分生物学特性进行了研究.结果表明,QM—CDV、YM—CDV和ZM—CDV在鸡胚成纤维细胞上生长良好,产生明显的细胞病变(CPE),也可在猴肾传代细胞(Vero)和人羊膜细胞(FL)上增殖并出现细胞病变;在电镜下观察,病毒粒子具有囊膜和纤突,直径在130～180nm之间;细胞中和试验表明,分离毒与国外弱毒具有相同的血清型;分离毒株的水貂病料经脑内接种均使幼犬发病,出现明显的临床症状. 相似文献
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中国水貂养殖业与先进国家的差距 总被引：1，自引：0，他引：1
本文从水貂种群、水貂生产水平和饲养管理水平、水貂饲料加工及饲料营养配制、水貂饲养机械化水平、技术人才培训、水貂的卫生防疫和福利待遇以及水貂养殖行业的管理以及水貂皮产品的出口贸易、国内贸易、走私贸易等方面入手,分析了中国水貂养殖业以及水貂皮产品贸易的现状,并指出了中国水貂养殖业与貂皮产品同北欧、北美水貂养殖大国和强国之间的差距,在对比中找出了中国水貂养殖业与水貂皮产品贸易中存在的亟待解决的问题和影响中国水貂养殖业与水貂皮产品未来健康可持续发展的原因。最后提出了实现中国水貂养殖业和水貂皮产品贸易可持续发展的切实可行的有参考价值的对策。 相似文献
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病毒性传染病一直以来是危害毛皮动物养殖业发展的重要传染病。据罗国良（2008）等对2006—2007年我国水貂主要疾病发生和流行情况调查显示,我国死亡的水貂中,其中水貂犬瘟热、细小病毒性肠炎和阿留申病死亡数分别占总死亡数的9．5％、11．8％和10．0％。表明水貂细小病毒性肠炎是造成水貂死亡量最大的疾病。 相似文献
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