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豌豆品种(系)的RAPD分析 总被引：1，自引：0，他引：1
以１８个豌豆栽培品种及野生种材料为ＤＮＡ样品来源,采用７个１０碱基随机引物进行ＰＣＲ扩增。基因组ＤＮＡ的多态性,利用ＲＡＰＤ标记鉴定其品种间及品种内的遗传变异性。７个引物共扩增出６６位点,其中多态性位点５６个,占８４．８％。每个ＰＣＲ扩增产物分别以０和１记录存在与否。扩增产物间成对比较产生非相似性矩阵（Ｊａｃｃａｒｄ相似系数表）,此矩阵用于构建遗传相似性的树状系图谱（遗传树）。通过遗传树的构建将１０个Ｐ．ｓａｔｉｖｕｍ与８个Ｐ．ｆｕｌｖｕｍ群居为截然不同的两大组。 相似文献
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芥菜遗传多样性的RAPD分析 总被引：4，自引：1，他引：3
随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）是一种新的分子标记技术,利用ＲＡＰＤ标记对芥菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｊｕｎｃｅａ Ｃｏｓｓａ）１６个变种的遗传多样性进行了分析,从６０个１０ｂｐ随机引５物中筛选出２７个有效的,这２７个有效引物共扩增出３３６条ＤＮＡ带,其中２７５条为多态性带,占总数的８１．８５％,平均每个引物扩增出的ＤＮＡ带数为１２．４４,不同引物扩增出各自不同的ＤＮＡ指纹图谱,大部分图谱均有特征或特 相似文献
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草鱼和鲤RAPD引物筛选及鱼种特异性分子标记 总被引：1，自引：0，他引：1
以草鱼和鲤为材料,提取基因组ＤＮＡ,制备ＲＡＰＤ－ＰＣＲ模板,对３个随机引物盒共６０个１０－ｍｅｒ引物进行了ＰＣＲ扩增,共筛选出７个较理想的可用于鱼种内或鱼种间群体遗传分析的随机引物．用这７个引物所获得的草鱼和鲤的ＲＡＰＤ指纹图谱平均带纹总数分别为４．２８±１．８９和６．７１±４．１９,多态性带纹总数分别为１．７１±１．６０和５．１４±４．７４．ＲＡＰＤ指纹图谱特征反映出草鱼比鲤具有更高的遗传纯度．７个引物共扩增出草鱼特异性带纹１８条,鲤特异性带纹３２条．大量特异性带纹的检出表明,两个鱼种间存在较大的遗传差异,同时也为鱼种间基因转移（特别是全基因组ＤＮＡ导入）提供了分子检测的候选遗传标记 相似文献
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芸薹种(Brassica campestris,2n=20)蔬菜遗传多样性的RAPD初步分析 总被引：1，自引：0，他引：1
本文对芸薹种（ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａ ｍ ｐｅｓｔｒｉｓ ,２ｎ ＝ ２０） 蔬菜基因组 Ｄ Ｎ Ａ 进行了 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ 初步分析, 并就 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ－ Ｐ Ｃ Ｒ 反应条件的优化进行了探讨。结果表明：各个亚种或变种的品种之间存在着丰富的遗传多样性。 相似文献
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棉药黄萎病菌致病类型及其分子指纹分析 总被引：1，自引：0，他引：1
对２０个大丽轮枝菌菌株的致病性进行了测定和ＲＡＰＤ指纹扩增,完成了供试菌株致病类群与其ＲＡＰＤ指纹组间的相关性分析。结果表明,根据２０个菌株对５个棉花品种的抗感反应及其平均病情指数分为４种不同的致病类群;用１０个随机引物对２０个菌株进行ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增,产生９２条ＤＮＡ带（其中５１条为多态带）;用计算机进行聚类分析,２０个供试菌株聚类为９个ＲＡＰＤ指纹组。相关性分析表明,致病类群与ＲＡＰＤ指纹 相似文献
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甘蓝型油菜核不育基因的PCR标记初报 总被引：1，自引：0，他引：1
用Ｏｐｅｒｏｎ公司ＯＰＡ－０１－ＯＰＪ－２０ ２００个１０个碱基对随机序列引物对甘蓝型油菜隐性核不育涪优ＡＢ,显性核不育３７ＡＢ,广恢系９８－８０２６,９８－３７４９及Ｆ１材料基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ扩增的结果,共获得１３３４条扩增带,平均每引物扩增带约６．７条扩增带表明油菜存在较为丰富的遗传多样性。引物ＯＰＡ－０５,ＯＰＡ－１２,ＯＰＡ－１３,ＯＰＡ－２０等分别扩增出了大小不同的多态性带,初步认 相似文献
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选用８１种随机引物,利用ＲＡＰＤ技术对１３种栽培大豆品种的基因组ＤＮＡ多态性进行了分析,结果表明大多数的随机引物均得到了良好的ＰＣＲ扩增结果,显示出不同的栽培大豆品种之间基因组ＤＮＡ既有高度的同源性,又具有良好的多态性．通过Ｎｅｉ氏遗传共享度分析,使用ＵＰＧＭＡ（ｔｈｅｕｎｗｅｉｇｈｔｅｄｐａｉｒｇｒｏｕｐｍｅｔｈｏｄｆｏｒａｒｉｔｈｍｅｔｉｃａｖｅｒａｇｅｓ）进行聚类分析,得到了ＵＰＧ－ＭＡ系统树和实验材料之间的遗传关系． 相似文献
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以水稻抗瘟性近等基因系Ｈ７Ｒ和Ｈ７Ｓ为材料,采用ＰＣＲ－差别筛选（ＰＣＲｂａｓｅｄｄｉｆｅｒ－ｅｎｔｉａｌｓｃｒｅｅｎｉｎｇ）的方法分离和克隆水稻受稻瘟病菌诱导的抗性相关基因．第一轮筛选获得４２个差异表达的ｃＤＮＡ克隆,经ＰＣＲ扩增,转膜,反向Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交后,得到１２个阳性ｃＤＮＡ克隆．本文对ＰＣＲ－差别筛选的优缺点以及进一步的鉴定工作亦作了讨论． 相似文献
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大豆育种过程中亲子遗传关系的RAPD研究初报 总被引：5，自引：0，他引：5
试验以组合８００２４×中１９亲本及其育成品系Ｂ_１，Ｂ_２为材料，用ＲＡＰＤ技术对其亲子关系进行了研究．１０个随机引物（１０ｂｐｓｅ）的ＰＣＲ扩增结果表明，双亲在遗传上有较大差异，母本８００２４有１３条特征带，父本中１９有６条特征带．其在子代中能够重组，使Ｂ_１，Ｂ_２均具有双亲ＲＡＰＤ标记的特征．但经过多代选择，双亲ＲＡＰＤ特征在育成的子代品系中的分布是不均衡的．Ｂ_１更多地继承了母本８００２４的绝大部分ＲＡＰＤ特征，遗传上更近于母本．Ｂ_２则表现出倾向于父本．这一结果与田间观察结果基本一致，说明用ＲＡＰＤ追踪育种过程，探讨亲子遗传关系是可行的．另外，试验观察到子代品系在继承双亲ＲＡＰＤ特征的同时，还出现了新的子代所特有的ＲＡＰＤ特征．产生这种超亲ＲＡＰＤ特征的真实原因及其意义有待进一步研究． 相似文献
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用２５０个Ｏｐｅｒｏｎ引物,对以培矮６４ｓ为母本配制的两系稻杂种及有关亲本等１２份供试材料进行ＲＡＰＤ分析,从中筛选出引物ＯＰＮ－２０．它不但能使培矮６４ｓ和以它为母本的杂种种子同其它种子加以区别,同时还扩增出恢复系山青、特青的多态性特征带,使它们的Ｆ１种子与母本培矮６４ｓ分开．并讨论了ＲＡＰＤ技术在两系杂交稻种子纯度鉴定上的应用 相似文献
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RAPD分析应用于厚皮甜瓜若干品种或品系间的比较 总被引：10，自引：0，他引：10
用１４种１２个碱基的随机引物对厚皮甜瓜４个品种及１３个品系进行随机扩增多态性ＤＮＡ（ＰＡＰＤ）分析。结果表明,可用其中６种引物将４个品种（Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｑｕｅｅｎ、Ｅａｒｌ’ｓ Ｆａｖｏｕｒｉｔｅ、Ｃｒｅｎｓｈａｗ、Ｐａｋｉｓｔａｎ－９８１）及Ｅａｒｌ’ｓ Ｆａｖｏｕｒｉｔｅ的３个品系（春系３号、磐田２号、夏系７－２）加以鉴别。在不同引物所扩增的特有或缺少的特异性条带（Ａ０９－１６００、Ａ０９－ 相似文献
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甘蔗白条病(Xanthomonas albilineans)PCR,ELISA,DIA检验技术研究(英文) 总被引：1，自引：0，他引：1
应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术检测甘蔗白条病（Ｘ．ａｌｂｉｌｉｎｅａｎｓ）蔗茎无症带菌样品和纯培养及总ＤＮＡ;并以改良半选择性培养基（ｍＸＡＭ）定量．比较了ＰＣＲ,ＥＬＩＳＡ,ＤＩＡ的检测效率和可靠性．表明ＰＣＲ能够特异性检出白条黄单胞包括标准菌株３３９１５ＡＴＣＣ和血清型Ｉ,Ｉ等１９个菌株．但是不能扩增其它５个分离自蔗茎的腐生黄单胞和１３个其它属种的植物细菌．能够检出少至１０ｐｇ靶细菌总ＤＮＡ或２０个活细菌．ＰＣＲ检测灵敏度较ＥＬＩＳＡ和ＤＩＡ高１００～１０００倍．田间样品检测结果与实际发病符合度为９３．４６％．这一分子检测技术适用于国内外甘蔗种质资源交换和口岸检疫以及病害流行学研究 相似文献
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四川主栽小麦品种RAPD标记遗传差异研究 总被引：16，自引：4，他引：12
采用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ） 标记,对四川近５０ 年来年推广面积６－６７ 万ｈｍ２（１００万亩）以上的４０ 个小麦主栽品种遗传差异进行了初步探讨。结果表明,５５ 个随机引物中,有３２个引物（ 占５８－２％ ） 扩增产物具有多态性。３２ 个引物共扩增出１８５ 条带,其中９３ 条带（ 占５０％ ）具有多态性,每个引物可扩增出１ ～１１ 条多态性带,平均２－９ 条。４０ 个品种ＲＡＰＤ 标记遗传距离（ＧＤ） 变异为０－０１９ ～０－４７５ ,平均ＧＤ 值为０－２２１。聚类分析表明,在ＧＤ 值０－２３ 水平上,４０ 个品种可聚为５ 类。一些随机引物对有些品种能进行特异性扩增。引物ＯＰＮ１４ 对小麦１ＢＳ 扩增能产生特异性ＤＮＡ 片段,能完全鉴定出４０ 个供试品种中的９ 个１ＢＬ／１ＲＳ小麦－ 黑麦易位系品种。据此认为,ＲＡＰＤ标记可以作为小麦品种鉴定的指纹图谱。 相似文献
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桃属植物随机扩增多态性DNA分析的最适反应条件 总被引：6，自引：3，他引：3
以Ｙｕｕｚｏｒａ 桃为试材对桃属植物随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ） 分析的最佳反应条件进行了研究．结果表明桃属植物ＲＡＰＤ分析的最佳反应条件为：总反应混合溶液５ｕＬ 时,添加模板ＤＮＡ１０ ～３０ ｎｇ,Ｔａｑ ＤＮＡ 聚合酶１ ～１ ．５ 个单位,随机引物１０ ～２０ ｐｍｏｌ,ｄＮＴＰ１００ ～２００ ｕＭ,ＭｇＣｌ２ ２ ．０ ～３ ．０ ｍ Ｍ 及５ ｕＬ１０ 倍反应缓冲液条件下扩增５０ ～５５ 个循环,能够获得具有良好的稳定性和重复性的ＤＮＡ扩增产物．ＰＣＲ反应溶液的各组成因素如低于最适浓度范围时会导致扩增带数的减少甚至无带,如高于最适反应浓度范围,则会出现带的弥散或缺失． 相似文献
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新城疫病毒Ｕｌｓｔｅｒ株经ＳＰＦ鸡胚增殖和超速离心纯化后，以酚－ＳＤＳ法提取其基因组ＲＮＡ，作为反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的模板。根据其已发表的Ｆ和ＨＮ基因核苷酸序列，合成一个长为３０ｍｅｒ的寡核苷酸（位于Ｆ基因内）和一对分别长为２８、３０ｍｅｒ的寡核苷酸（位于ＨＮ基因两侧）分别作为反转录引物和ＰＣＲ引物。扩增反应产物经琼脂糖凝胶电泳分析，出现一条长为１．９３ｋｂ的特异性条带，与预期相符。并将此特异性条带克隆入质粒载体ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）中，并经限制性核酸内切酶分析（ＲＥＡ）。ＲＴ－ＰＣＲ和ＲＥＡ结果证实其为新城疫病毒Ｕｌｓｔｅｒ株的血凝素－神经氨酸酶基因。 相似文献
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芸薹种蔬菜遗传多样性的RAPD初步分析 总被引：1，自引：0，他引：1
本文对芸薹种蔬菜基因组ＤＮＡ进行了ＲＡＰＤ初步分析,并就ＲＡＰＤ－ＰＣＲ反应条件的优化进行了探讨。结果表明：各个亚种或变种的品种之间存在着丰富的遗传多样性。 相似文献
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苦竹类植物RAPD分析及其系统学意义 总被引：14，自引：1，他引：13
利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术,分析了苦竹类植物中产于日本的大明竹Ｐｌｅｉｏｂｌａｓｔｕｓ ｇｒａｍｉｎｅｕｓ（Ｂｅａｎ）Ｎａｋａｉ、、长苦竹Ｐｌ．ｓｉｍｏｎｉｉ（Ｃａｒｒ．）Ｎａｋａｉ,中国产的苦竹Ｐｌ．ａｍａｒｕ（Ｋｅｎｇ）Ｋｅｎｇｆ．、宜兴苦竹Ｐｌ．ｙｉｘｉｎｇｅｎｉｓ Ｃｈｕ ＆Ｃｈａｏ、斑苦竹Ｐｌ．ｍａｃｕｌａｔｕ（ＭｃＣｌ．）Ｃｈｕ＆Ｃｈａｏ。采用２０个引物（１０ｂｐ）进行扩增出的ＤＮＡ片段,用于种间遗传相似性分析。结果表明：（１）苦竹与宜兴苦竹关系密切;（２）大明竹与其它４种关系较远;（３）形态为分上将中、日产苦竹分成两类没有得到ＲＡＰＤ分析的支持。 相似文献
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培矮64s为不育系的两系杂交稻杂种纯度的RAPD鉴定 总被引：17，自引：0，他引：17
用２５０个Ｏｐｅｒｏｎ引物,对以培矮６４ｓ为母本配制的两系稻杂种及有关亲本等１２份供试材料进行ＲＡＰＤ分析,从中筛选出引物ＯＰＮ－２０。它不但能使培矮６４ｓ和以它为母本的杂种种子同其它种子加以区别。同时还扩增出恢复系山青,特青的多态性特征带,使它们的Ｆ１种子与母本培矮６４ｓ分开。并讨论了ＲＡＰＤ技术在两系杂交稻种子纯度鉴定上的应用。 相似文献
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根据苏云金杆菌（Ｂａｃｉｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）杀虫晶体蛋白基因的结构特点,合成了ｃｒｙⅠ基因５′端特异引物和３′端共同引物,利用ＰＣＲ扩增,使不同基因引物产生不同长度的扩增产物,通过扩增产物片段的分子量大小来确定菌株所含杀虫基因类型．本研究对福建农业大学生物技术中心分离和保存的２０个菌株进行了ｃｒｙⅠＡ（ａ～ｃ）基因类型的ＰＣＲ鉴定．结果表明：４个菌株含有ｃｒｙⅠＡ（ａ）、ｃｒｙⅠＡ（ｂ）和ｃｒｙⅠＡ（ｃ）基因,２个菌株含有ｃｒｙⅠＡ（ａ）和ｃｒｙⅠＡ（ｃ）基因,其余菌株不含所鉴定的基因类型． 相似文献