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1.
以百合抗病无性系和感病无性系为试验材料,开展了百合抗尖孢镰刀菌枯萎病的蛋白质组学研究,以期明确抗病无性系参与抗病反应的关键蛋白。利用蛋白质双向凝胶电泳技术,对被百合尖孢镰刀菌诱导0、24、48和72 h的抗病无性系和感病无性系进行差异蛋白分析。经质谱检测及数据库检索,鉴定了25个差异蛋白质点,其中10个鉴定为未知功能的蛋白,其余15个依据其相关功能分为4类,即防御反应相关蛋白、光合作用相关蛋白、糖类及能量代谢相关蛋白和热激蛋白。其中参与防御反应的病程相关蛋白（推定的抗病蛋白RPS2、推定的抗晚疫病同族蛋白R1C-3、过氧化物酶Q、抗坏血酸过氧化物酶和NBS-LRR类似蛋白）可能是百合抗病无性系介入抗病防御反应的关键蛋白。 相似文献
2.
紫外线照射对梁平柚果皮基因表达的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
采用SSH技术以紫外照射的梁平柚[Citrus grandis（L.）Osbeck]果皮作为实验方（tester）,以未被照射的正常果皮作为驱动方（driver）,构建了一个梁平柚果皮紫外诱导基因的正向差减文库。经菌液PCR检测后随机挑取200个阳性克隆测序,获得168条表达序列标签（ESTs）。比对这168条ESTs,发现有分属于57个基因的114条ESTs与已知基因高度同源,54条ESTs同源性较低或没有同源性。功能分析发现,这些ESTs主要参与抗逆防御、生长发育、细胞凋亡、转录与翻译、细胞分化、信号传导、能量代谢、糖类及氨基酸代谢以及次生代谢等。 相似文献
3.
《果树学报》2017,(12)
【目的】了解细交链孢菌侵染枣果实过程的差异表达基因。【方法】以白熟期‘蜂蜜罐’枣的果实为材料,人工接种细交链孢菌,分别在接种0.5、1、2、3和4 d后取样,通过抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建了病原菌诱导的差异表达的c DNA消减文库。【结果】PCR鉴定随机挑取的阳性克隆,显示插入片段大小为200~900 bp。随机挑选200个阳性克隆进行测序,利用BLASTx在Gen Bank Nr数据库进行序列比对分析,共获得118个Unigenes。对这些ESTs进行功能分类发现细交链孢菌侵染下诱导表达基因涉及植物细胞内的多种代谢和应答过程,其中包括抗病/防御类、信号传导途径类、新陈代谢类、蛋白质合成和加工类及细胞结构的组成等,尤其以抗病/防御类基因所占比例最大(27.17%)。【结论】通过SSH研究了缩果病病原侵染果实过程的差异表达基因,鉴定到一些与枣缩果病相关的基因,为进一步研究相关基因及今后筛选防治枣缩果病提供理论基础。 相似文献
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以99个百合远缘杂种F1代-麝香百合×亚洲百合(LA)杂种为试材,采用栽培基质接种病原菌的方法对杂种后代的镰刀菌抗性进行了鉴定。结果表明:百合无性系温室人工接种技术成功应用于该远缘杂种,其母本麝香百合‘White Fox’对镰刀菌表现出高感,而父本亚洲百合‘Connecticut King’具有较强抗性,并成功遗传给杂种后代,在后代基因型中实现一系列分离;在后代杂种群体中,大部分基因型对镰刀菌表现出不同程度的抗性,F1代镰刀菌抗性基因表达率为70.1%。表明镰刀菌抗性由数量基因控制,通过杂种系间杂交实现百合镰刀菌抗性的渐渗育种切实可行。 相似文献
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利用SSH分离TDZ诱导金钗石斛成花相关基因 总被引：1，自引：0，他引：1
以金钗石斛（Dendrobium nobile Lindl.）腋芽为材料,利用抑制消减杂交（SSH）技术构建了TDZ处理后金钗石斛腋芽的正向和反向SSH文库。通过PCR和反向Northern杂交验证后,得到的正向文库的314个阳性克隆和反向文库的59个克隆测序后经过聚类,最终得到39条受TDZ正向调控的EST序列,以及21条受其反向调控的EST序列。对其中某些差异基因进行半定量RT-PCR,结果显示这些基因的表达受TDZ的影响。利用Blastn和Blastx进行比对分析,其中20个没有同源序列,属于未知功能基因。其余序列的同源基因编码的产物参与包括光合作用、合成代谢、转录调控等多种生物学过程。在反向文库中分离到1个MADS-box基因的同源序列和1个Sos同源基因,而正向文库中存在多个反转录转座子,这些结果表明TDZ可以影响开花过程中的某些转录因子和信号基因的表达,进而促进金钗石斛开花。 相似文献
6.
百合品种抗病基因同源序列分析及抗枯萎病的鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
采用鳞片接种法对36个百合品种及5个野生种进行枯萎病（Fusarium oxysporum f. sp. lilii）接种鉴定,筛选抗性优异资源。结果表明：百合品种及野生种中蕴藏丰富的抗枯萎病种质资源。利用RGA-PCR方法对百合遗传多样性进行分析,10对RGA引物在41个品种及野生种中共扩增条带159条,其中多态带156条,占总带数的98.1%。以相似系数0.71聚类,41个百合品种及野生种划分为7类。抗性表型与RGA相似性聚类结果表明,利用品种的抗性表型聚类,趋于抗病性相近的聚为一类;利用RGA相似性聚类,趋于遗传背景相近的聚为一类。百合品种RGA的DNA指纹多态性与枯萎病抗性遗传表型多样性无明显的对应关系。对亲本材料进行抗性鉴定和抗病基因同源序列多态性分析,能更准确地反映亲本的遗传背景,为百合枯萎病抗性基因鉴定及品种培育提供一定的理论依据。 相似文献
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为了研究黄瓜花叶病毒（CMV）诱导的岷江百合（Lilium regale）病程相关蛋白PR10基因在抗病毒防御反应中的作用,对岷江百合叶片接种CMV,采用RACE技术获得岷江百合LrPR10的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR对LrPR10在各器官特异性以及CMV和水杨酸（SA）处理后的表达模式进行了测定分析。结果表明：LrPR10全长756 bp,可编码由157个氨基酸组成的蛋白质,该蛋白具有病程相关蛋白典型的Bet_v1_like保守结构域;LrPR10在岷江百合鳞茎中相对表达量最高,在嫩叶中最低;该基因可以被CMV和SA诱导上调表达,岷江百合、卷丹（L. lancifolium）和宜昌百合（L. leucanthum）在CMV接种处理后LrPR10的相对表达量分别在4 d、4 d和1 d达到最大值,分别为处理前的58倍、27倍和292倍,在SA处理后LrPR10的相对表达量都在8 h达到最大值,分别为处理前的34倍、8倍和38倍。以上结果表明LrPR10在岷江百合抗黄瓜花叶病毒防御反应过程中发挥作用。 相似文献
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食用百合种质资源对枯萎病抗性的鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
采用组织分离法和传统的形态学鉴定法获得食用百合枯萎病的致病菌,再分别利用鳞片接种法和离体叶片接菌法鉴定不同食用百合种质资源对枯萎病的抗性能力,以期筛选出抗性强的食用百合种类和品种。结果表明:尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)为食用百合枯萎病的主要致病菌;"兰州"为高抗,"铁炮""卷丹""广西高片""万载柳片"为中抗,"天台山龙牙""万载中片""万载高片""吉安龙牙"为中感;离体叶片接菌法抗性鉴定结果可知"铁炮"与"卷丹"为中抗,"兰州"为中感,其余7种"龙牙"百合品系均表现为高感。 相似文献
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黄瓜霜霉病抗性相关基因的初步研究 总被引：2，自引：0，他引：2
以黄瓜高抗霜霉病自交系为材料,构建了两个抑制差减文库,经反向Northern杂交筛选、测序和序列比对,筛选到3个未知功能抗病相关基因。荧光实时定量RT-PCR分析结果表明,未知功能抗病相关基因2I15（GD254229）、3C19（GD254243）和1O08（GD254207）在抗病自交系接种霜霉病病原菌后,可早期高丰度特异上调表达,而在感病自交系中特异上调表达丰度较低或被特异抑制表达。水杨酸（SA）可诱导1O08特异上调表达,抑制2I15和3C19的表达;茉莉酸（JA）处理可诱导1O08特异上调表达,而抑制2I15的表达。ABA处理可显著诱导3C19和1O08特异上调表达,而抑制2I15的表达。机械伤害、高盐、冷害和热激等其它非生物胁迫可显著抑制或诱导这些基因的表达,因此推测,所筛选到的功能未知基因可能具有参与生物和非生物胁迫反应的作用 相似文献
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为了验证百合鳞茎休眠解除过程中基因表达的差异性，以细叶百合休眠鳞茎和休眠解除鳞
茎为材料，利用抑制消减杂交技术构建了百合鳞茎休眠及解除正、反向抑制消减文库。文库富集了差异
基因，消减效率符合要求，插入片段集中于250 ~ 1 000 bp 之间。对正、反向文库随机挑选阳性克隆测序，
各获得100 个表达序列标签（EST），在NCBI 上进行BLASTx 分析，并用KOBAS 系统将获得的unigene
定位到Pathways 中。分析结果表明，休眠文库ESTs 功能主要涉及胁迫响应方面，如苯丙氨酸代谢途径、
促分裂素原活化蛋白激酶途径等与休眠有关。休眠解除文库在糖代谢、激素响应及信号转导方面表达量
较高，如亚油酸代谢途径、淀粉及蔗糖代谢途径等参与了休眠解除过程。 相似文献
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百合镰刀菌枯萎病防治药剂的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
采用含毒介质法测定18种杀菌剂对百合枯萎病病原菌(Fusarium oxysporumf.sp.lilii)的生物活性,50mg·L-140%菌核净可湿性粉剂(WP)的抑菌率为74.12%,125mg·L-112.5%腈菌唑乳油(EC)的抑菌率为73.05%。通过盆栽试验(拌土法和浸球法)进一步测定8种杀菌剂对百合枯萎病的防治效果,40%菌核净WP、30%恶霉灵水剂(AS)、50%福美双WP2g·kg-1拌土,12.5%腈菌唑EC1g·kg-1拌土防治百合枯萎病效果良好,防效分别为100.00%、95.80%、83.33%和85.50%。其中,二甲酰亚胺类杀菌剂菌核净和三唑类杀菌剂腈菌唑防治百合镰刀菌枯萎病为首次报道。 相似文献
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番茄枯萎病菌分离鉴定及嫁接砧木抗病性评价 总被引：1，自引：0，他引：1
从河北省番茄栽培面积较大的定兴和肥乡地区枯萎病病株中分离纯化菌株,通过形态学和分子生物学等方法对病原菌进行鉴定,并采用浸根法鉴定了10个番茄砧木的枯萎病抗性。结果表明,从定兴和肥乡分离到的菌株均为尖孢镰孢菌,采用尖孢镰孢菌生理小种特异性引物进行PCR扩增,证明2个菌株都为尖孢镰孢菌番茄专化型(Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici)生理小种3;筛选得到了3个枯萎病高抗砧木品种,7个抗病砧木品种。 相似文献
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西瓜抗枯萎病育种研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
对西瓜枯萎病菌生理小种分化、鉴定方法、抗病机理、抗性遗传规律、分子标记在抗病育种中的应用和抗源新材料创制等方面的研究进展进行了综述和评价,并介绍了国内外西瓜抗枯萎病育种已取得的成绩和最新进展,在此基础上对西瓜抗枯萎病育种研究的进一步发展进行了讨论与展望。 相似文献
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基于已获得的二倍体西瓜与抗枯萎病基因Fon-1紧密连锁的分子标记,进一步完成了Fon-1基因的精细定位。利用两个四倍体西瓜材料（易感病的NF3为受体,抗病的JH为供体）,构建以NF3为轮回亲本的回交群体,使用新开发出的SNP标记对各世代群体进行分子标记辅助选择,及苗期抗病性接种鉴定。结果发现,在分离世代群体中通过接种鉴定获得抗病株比例较分子标记检测值低12.64% ~ 15.34%,这可能是由于基因剂量效应造成的。抗病基因杂合位点对枯萎病抗性依次为：三显体（AAAa）> 二显体（AAaa）> 单显体（Aaaa）。目前分子标记尚无法检测杂合基因型的剂量效应,容易将感病的单显体（Aaaa）误判为抗病株。在构建的673株BC1F2代自交群体中检测到29株纯合基因型（AAAA）抗病单株,占总检测株数的4.31%,与苗期抗病性接种鉴定结果符合度达到100%。 相似文献
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西瓜枯萎病是西瓜产业中最为重要的土传病害之一，利用抗病品种仍然是最理想的防治途径，然而新培育的抗病品种引入其他地区后抗性容易丧失，因此了解新品种抗性特点有助于品种推广应用。本试验通过菌土接种法鉴定了8 个西瓜品种对枯萎病生理小种1 的抗性，并利用分子标记进行验证。结果显示，6 个供试西瓜新品种表现为中抗，与分子标记检测结果一致。其中申选958、申蜜968 和申蜜6 号在3 次不同时间的重复试验中抗性表现差异较大，表明其抗性对环境因子尤其是温度和湿度较敏感。申抗988 与申选958 具有相同的抗病亲本，且分子标记检测基因型一致，但在相同环境条件下二者抗性表现差异也较大，表明由于亲本材料不同，品种间可能存在不同的微效基因或基因互作方式。 相似文献
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野生西瓜种质PI296341-FR抗枯萎病菌生理小种2的遗传规律 总被引：1，自引：0，他引：1
以抗枯萎病的野生西瓜种质PI296341-FR和高度感病的高品质西瓜自交系97103为亲本杂交,获得P1,P2,F1,B1,B2,F2等6世代及RILs（F2S8）永久分离群体。采用植物数量性状主基因 + 多基因混合遗传模型,进行6世代联合分析和RILs（F2S8）联合分析,探讨PI296341-FR对西瓜枯萎病菌生理小种 2 的抗性遗传规律。6世代分析结果表明,对生理小种2的抗性遗传符合1对加性主基因 + 加性—显性多基因遗传模型,主基因遗传率在B1,B2和F2群体中分别为31.8%,23.4%和48.6%,加性效应为0;多基因遗传率为16.5% ~ 43.9%,加性效应为2.24,显性效应为–0.75。RILs（F2S8）联合分析显示,对生理小种2的抗性遗传符合3对连锁的等加性主基因遗传模型,主基因遗传率为66.2%,加性效应–0.51,主基因间重组率0.16。两种遗传模型分析结果显示：PI296341-FR对西瓜枯萎病菌生理小种2的抗性遗传由主基因和微效基因共同控制,微效基因加性效应与显性效应的绝对值均高于主基因。 相似文献
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