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1.
卵泡抑素样蛋白5基因在鹅肥肝形成中表达调控的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
试验旨在探讨卵泡抑素样蛋白5(FSTL5)基因与鹅(Anser Cygnoides)肥肝形成的关系。试验选取30只健康、体重基本一致的70日龄朗德鹅,随机分为填饲组(15只)和对照组(15只)。在填饲到82日龄(填饲12 d)和94日龄(填饲24 d)时屠宰取样。此外,分离培养鹅原代肝细胞,并用葡萄糖、胰岛素和不同脂肪酸进行处理。结果显示:填饲后期肝脏和腹脂中FSTL5基因的表达量显著低于对照组(P<0.05),而胸肌中的表达量显著高于对照组(P<0.05)。在鹅原代肝细胞中,100 nmol/L胰岛素或0.25 mmol/L亚油酸能诱导FSTL5的表达(P<0.05)。综上所述,肝脏、脂肪与肌肉组织中的FSTL5表达在鹅肥肝形成后期受到显著影响,脂肪肝形成相关因子特别是胰岛素和亚油酸可诱导FSTL5的表达。研究结果为进一步研究FSTL5基因在鹅肥肝形成过程中的作用奠定了基础。 相似文献
2.
【目的】 研究卵巢肿瘤去泛素化酶7A(OTUD7A)基因与鹅肥肝形成的关系。【方法】 选取健康、体重一致的70日龄朗德鹅公鹅40只,随机分为2组,对照组自由采食,试验组进行填饲试验,其中填饲第1~5天每日采食量为500 g,第6~12天每日采食量为800 g,第13~19天每日采食量为1 200 g。在填饲第7、14和19天时,每组随机选取6只鹅屠宰,取肝脏,采用实时荧光定量PCR测定不同填饲阶段肝脏中OTUD7A基因的表达水平。采用Ⅳ型胶原酶消化法分离23胚龄的鹅原代肝细胞,分别用浓度为0(空白组)、125、250 mmol/L的葡萄糖,0(空白组)、50、100、200 nmol/L的胰岛素,0(空白组)、0.125、0.250 mmol/L的油酸、亚油酸及0(空白组)、0.25、0.50 mmol/L棕榈酸处理鹅原代肝细胞,并用实时荧光定量PCR检测这些脂肪肝形成相关因子对OTUD7A基因表达水平的影响。构建过表达OTUD7A基因的载体pcDNA3.1-OTUD7A,并将构建好的过表达重组质粒转染鹅原代肝细胞,通过转录组学测序(RNA-Seq)进行差异表达基因的筛选,并对获得的差异表达基因进行GO功能富集分析。【结果】 在填饲第7、14天时,鹅肝脏中的OTUD7A基因表达显著高于对照组(P<0.05)。与空白组相比,250 mmol/L葡萄糖处理以及0.125 mmol/L和0.250 mmol/L棕榈酸处理均显著提高鹅原代肝细胞中OTUD7A基因的表达水平(P<0.05)。转录组学测序结果表明,OTUD7A基因过表达后共筛选到34个差异表达基因,其中有19个基因表达上调、15个基因表达下调。GO功能富集分析发现,差异表达基因注释到对微生物的防御反应、对外界生物刺激的反应、T细胞分化、细胞外外泌体等条目,其中CLMP、PROCR、SH3BP1、ARHGAP28、ACE、OTUD7A、LOC106045877、LOC106048002基因的表达上调,TNFSF8、DDX60、PLAC8、RSAD2、MX1、RSAD2、GBP1基因的表达下调。【结论】 鹅肥肝形成过程中OTUD7A基因的表达水平升高,OTUD7A基因可能通过调控TNFSF8、RSAD2、MX1、GBP1、CLMP和PROCR等基因的表达参与鹅肥肝的形成。 相似文献
3.
《中国家禽》2016,(24)
试验旨在探讨鹅补体受体1(CR1)基因在鹅肥肝形成中的表达和调控机制。通过荧光定量PCR验证CR1在填饲19 d鹅肝脏中的表达情况,通过体外细胞(鹅原代肝细胞)试验探索脂肪肝相关因子(葡萄糖、胰岛素、油酸和棕榈酸)对CR1的诱导作用,同时通过分析CR1基因的上游序列预测其转录调控因子并通过药物处理进行验证。结果发现,CR1基因在填饲19 d肥肝中的表达量显著高于对照组;25 mmol/L葡萄糖以及各处理浓度的油酸(0.125、0.25和0.5 mmol/L)均可导致鹅原代肝细胞中CR1表达水平的显著上调,胰岛素对CR1的表达水平没有显著影响,而0.5 mmol/L棕榈酸则对CR1在鹅原代肝细胞中的表达有一定的抑制作用;序列分析发现,鹅CR1上游序列含有肝细胞核因子1(HNF1)的结合位点,且使用HNF1的活性调控剂(鹅去氧胆酸)处理鹅原代肝细胞后,鹅CR1基因的表达量显著上调。综上,本研究证实CR1基因在鹅肥肝形成过程中表达水平的显著上调,并对其可能的调控机制进行初步探索,为深入研究补体系统在鹅肥肝形成中的作用和机制奠定了基础。 相似文献
4.
《中国家禽》2020,(7)
为揭示PPARα基因对骡鸭肝细胞PPAR信号通路中脂质代谢基因的调控作用,试验以16日胚龄的骡鸭为材料,用Ⅳ型胶原酶法分离原代肝细胞,分离的原代肝细胞经形态学观察、糖原染色和白蛋白(ALB)检测鉴定后用于后续试验;构建4对干扰PPARα基因的siRNA,分别转染骡鸭原代肝细胞,转染12 h后用荧光显微镜检测转染效率,转染48 h后用油红O染色检测肝细胞脂质分泌情况,筛选干扰效率最高的siRNA,qRT-PCR检测该siRNA干扰PPARα基因后PPAR信号通路上脂质代谢相关基因的表达情况。结果显示:Ⅳ型胶原酶法分离的骡鸭原代肝细胞活性较好,ALB的分泌量维持在较高水平,糖原染色发现大量细胞存在双核和多核状态,干扰效率最高的PPARα-1344组与对照组相比脂质分泌量减少,原代肝细胞中LPL、FABP、FAS和ACBP基因表达量极显著下调(P0.01),SCD基因表达量显著下调(P0.05),APO-A1、CYP7A1和CPT1基因表达量差异不显著(P0.05)。研究表明:分离的骡鸭原代肝细胞纯度好、活性高,PPARα基因可能促进脂肪在肝脏中沉积,与骡鸭的肥肝形成密切相关。 相似文献
5.
本文旨在探讨鹅肝细胞的分离与原代培养方法,并对分离的肝细胞三酰甘油(TG)合成功能进行检测.采用改进的Seglen二步法分离纯化来自10日龄仔鹅肝脏的肝细胞,并进行原代培养.在倒置显微镜下观察肝细胞形态变化,MTT比色法测定细胞活性,用脂肪酸培养肝细胞并检测其形态、活性和细胞内TG含量的变化.结果显示,分离出的肝细胞形态完整、贴壁良好、活性高,细胞活性曲线与理论“S”型细胞生长曲线基本符合.另外,脂肪酸能增加肝细胞体积、活性和TG含量.结果表明,本研究成功分离了鹅肝细胞并进行了原代培养,肝细胞生酯功能正常. 相似文献
6.
填饲后朗德鹅肝脏和小肠组织中MTP基因表达研究 总被引：2，自引：0，他引：2
为了探讨填饲对MTP基因表达的影响,本研究采用RT-PCR法检测了填饲后MTP基因在朗德鹅肝脏和小肠组织中的表达情况,并对6种体组成参数和甘油三酯等4种血清生化指标进行了检测.结果表明:填饲后,各体组成参数和血清生化指标的水平都显著升高;MTP基因在朗德鹅的肝脏和小肠组织中都有表达;填饲后肝脏组织中MTP基因的表达无显著性变化(P>0.05),而小肠组织中的MTP基因的表达水平却显著升高(P<0.05).结论:填饲引起MTP基因在小肠和肝脏中的变化差异可能与肝细胞中可利用脂类物质的水平、其它调控因子及填饲的高脂食物有关. 相似文献
7.
本研究旨在研究不同浓度葡萄糖和胰岛素诱导鹅肝脂肪变性过程中苹果酸酶(Malic enzyme,ME)的活性及其mRNA表达情况,以探讨ME在鹅肝脂肪变性中的作用。根据鸡ME基因序列保守区设计引物,通过RT-PCR、克隆测序等技术扩增鹅ME基因;分离、培养四川白鹅原代肝细胞,添加不同浓度葡萄糖和胰岛素诱导肝细胞脂肪变性,检测细胞内甘油三酯(TG)含量、ME活性及其mRNA表达情况。结果发现,鹅ME基因跟原鸡同源性最高;与对照组相比,葡萄糖及其与胰岛素协同作用均能显著促进肝细胞内甘油三酯(TG)沉积,且呈现出剂量递增效应,而胰岛素对细胞内TG含量影响不明显;与对照组比较得出:ME的活性和mRNA表达水平随着葡萄糖浓度升高而增加,30mmol.L-1葡萄糖具有明显的促进作用(P<0.05);低浓度(50nmol.L-1)胰岛素显著增加ME的活性和mRNA表达水平(P<0.05),当胰岛素浓度达到200nmol.L-1时,ME的活性和mRNA表达水平受到一定抑制;葡萄糖和低浓度胰岛素(50nmol.L-1)协同能促进ME的活性和mRNA表达水平。本研究扩增获得了鹅ME基因部分序列,且发现葡萄糖和胰岛素协同可以增强ME的活性和mRNA表达水平,从而显著增加肝脏中TG的含量,诱导鹅肝脂肪变性。 相似文献
8.
填饲对朗德鹅血液指标、组织营养成分以及肝脏组织学的影响 总被引：4，自引：1，他引：3
通过对6只110日龄朗德鹅进行高能饲料填饲,测定和观察血清生化指标、肝脏、胸肌和腿肌中营养成分和肝脏组织学变化。结果显示,填饲20d后鹅肝脏重量显著提高(P0.01),血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、总胆固醇和高密度脂蛋白水平显著增加(P0.01),其中γ-谷氨酰转肽酶在填肥过程中呈现出先升高后降低,与人类肝脏酶学研究结果一致;脂肪主要在肝脏沉积,其他组织无明显差异,蛋白质在肝脏中相对增加;填饲朗德鹅肝脏细胞胀大,肝细胞胞浆中充满大量大小不等的脂肪滴。这些结果为鹅生理和病理研究、肥肝生产及其遗传选育提供基本参考。 相似文献
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《黑龙江畜牧兽医》2019,(23)
为了明晰营养因素是否同时影响内源性反转录病毒(Endogenous retrovirus, ERV)和免疫相关基因的表达,试验以采集的浙东白鹅肝脏样品为材料,采用荧光定量PCR方法测定了不同营养状态(禁食或脂肪酸处理)对鹅肝脏或肝细胞中两个ERV Pol序列(ERVK18P、ERVK25P)和免疫相关基因STAT3表达的影响。结果表明:与未禁食的70日龄浙东白鹅相比,禁食24 h会抑制肝脏中ERVK18P、ERVK25P和STAT3基因的表达;用亚油酸处理鹅原代肝细胞14 h,也会显著抑制ERVK18P、ERVK25P和STAT3基因的表达。说明营养因素可以影响ERV和免疫相关基因STAT3的表达,ERV可能是营养因素调控鹅肝脏中STAT3基因表达的潜在介导物。 相似文献
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Zidi Jin Long Liu Cheng Xu Chunchi Yan Shuo Li Tuoyu Geng Daoqing Gong 《Animal Science Journal》2021,92(1):e13672
Goose fatty liver is a specific type of nonalcoholic fatty liver that is protected from harmful effects associated with severe steatosis. Our previous findings suggest that suppression of the complement C5 may be relevant, but the mechanism is unclear. Therefore, in this study, we first verified the expression pattern of complement genes (including C5) during goose fatty liver formation and then determined the liver fat content and fatty acid composition by high-performance liquid chromatography (HPLC), followed by selecting the differential metabolites to treat HepG2, goose and mouse primary hepatocytes, aiming to explore the mechanism of C5 and inflammation suppression in goose fatty liver. The data confirmed the suppression of complement genes (including C5) in goose fatty livers. Moreover, fat content was significantly higher in fatty liver versus normal ones, with oleic acid and palmitic acid dominantly accounting for the difference. In line with this, high concentration of palmitate led to down regulation of C5 expression in goose primary hepatocytes whereas upregulation in mouse primary hepatocytes and HepG2 cells. In conclusion, regulation on C5 expression by fatty liver related factors including high level of palmitic acid may contribute to the protection of goose liver from severe hepatic steatosis. 相似文献
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Xiao Lin Ya Xing Yihui Zhang Biao Dong Minmeng Zhao Jian Wang Tuoyu Geng Daoqing Gong Yun Zheng Long Liu 《Animal Science Journal》2021,92(1):e13674
Glucose oversupply promotes formation of fatty liver, and fatty liver is usually accompanied with hyperglycemia. However, the mechanism by which glucose promotes formation of fatty liver is not very clear. In this study, fatty liver was successfully induced in Landes goose by 19 days of overfeeding with corn-based feed, the overfed geese had a significantly higher level of blood glucose than the normally fed geese (control group). In goose primary liver cells, high level of glucose promoted fat deposition and induced the expression of SREBF2(or SREBP2), a key regulator of lipid metabolism, and its intronic gene, miR-33. Moreover, overexpression of miRNA-33(miR-33) promotes lipid accumulation in goose primary liver cells. Consistently, miR-33 inhibitor suppressed glucose induced lipid accumulation in liver cells. Interestingly, the relative abundance of miR-33 in goose fatty liver was significantly higher than that in normal liver, while the relative mRNA and protein abundances of CROT, the target gene of miR-33, in goose fatty liver were significantly lower than those in goose normal liver. Taken together, these findings suggest that miR-33 mediates glucose promotion of lipid accumulation in goose primary liver cells, and that glucose participates in formation of goose fatty liver by regulating the expression of miR-33/CROT. 相似文献
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鹅副粘病毒病流行病学和血清学研究 总被引：23，自引：0，他引：23
1997年7月以来,来我校兽医院就诊的76例鹅副粘病毒病,群体内发病率和死亡率很高,10日龄以内的雏鹅发病率和死亡率均达到100％,平均发病率和死亡率分别为对27.7％和18．2％。种鹅群感染后能引起产蛋率迅速下降。与鹅同时饲养的鸡也能感染发病。不同患病阶段鹅的HI抗体逐渐升高,高峰期平均抗体滴度为212,然后逐渐下降,并在27-8的水平上维持一段时间。接种疫苗能有效地控制该病。 相似文献
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实验旨在探究对豁眼鹅体重和体尺性状进行选育的有效分子标记,根据GenBank鹅GH基因的cDNA序列以及前人的研究设计引物,以饲养于辽宁省和江苏省同批出雏的豁眼鹅,共计552只为实验材料,利用PCR-SSCP方法对GH基因外显子2进行SNPs检测,并将纯合基因型进行克隆测序。结果表明:豁眼鹅GH基因外显子2共有2个SNPs突变位点,得到10种基因型AA、BB、CC、DD、AB、AC、AD、BC、BD和CD,等位基因D的频率较高;经χ2检验,公、母鹅群体以及整个群体均处于Hardy-Weinberg平衡状态;将氨基酸序列突变和未突变的基因型分别合并后得到的3种基因型与10周龄体重和体尺性状进行关联分析发现,基因型对体重和部分体尺性状均有极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)影响;在公鹅和母鹅群体中,合并后的AB型与BB型分别为高生产性能基因型,可以作为对豁眼鹅体重和体尺性状进行选育的分子标记。 相似文献
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本研究旨在克隆鹅长链酯酰辅酶A合成酶4(ACSL4)基因,探讨其与鹅肝脂质沉积的关系和品种间的表达差异。本实验通过RT-PCR、实时定量等技术扩增鹅ACSL4基因CDS、检测了该基因在皮脂、腹脂、肝脏等10个组织中的表达情况及填饲对其在肝脏中表达的影响,并探讨其表达量与血浆胰岛素、鹅肝脏甘油三酯(TG)、肝重等指标间的相关性。结果表明:鹅ACSL4基因CDS全长2 013 bp,编码670个氨基酸。保守结构预测发现,其蛋白质与哺乳动物一样,也存在2个保守功能区(ATP/AMP motif和FACS motif),它与鸡、人、猪、小鼠、大鼠的同源性分别为96.9%、80.4%、80.1%、78.5%、78.4%;组织表达结果显示,该基因主要于大脑、腹脂、心肌、睾丸等组织中表达,而在肝脏中表达相对较低;填饲引起ACSL4 mRNA在鹅肝脏的表达丰度极显著增加(P<0.01);且与肝脏脂质沉积相关指标呈显著正相关(P<0.05),暗示其在鹅肝脂肪变性中可能扮演着重要的角色。 相似文献
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本研究以10对荧光标记微卫星引物分析了我国2个地方鹅种(狮头鹅和皖西白鹅)原产地与基因库(泰州)共4个群体的保种效果。检测判定了狮头鹅和皖西白鹅共240个个体的基因型,通过计算4个群体的优势等位基因频率(P)i、期望杂合度(He)、多态信息含量(PIC)、群体内近交系数(Fis)分析了狮头鹅和皖西白鹅群体内和群体间的遗传变异,采用配对试验均数差异t检验比较了基因库保种群体与原产地群体的遗传差异,基因库保种群体与原产地群体间的Pi无显著差异(P0.05);He、PIC均略高于原产地群体,但差异均不显著(P0.05);Fis低于原产地群体,差异不显著(P0.05)。结果说明,基因库较好地保存了这2个品种并在一定程度上丰富了品种的遗传多样性,表明对我国地方鹅种采取异地小群保种的方法是可行的。 相似文献
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为获得具有抗病毒活性的鹅干扰素,本实验参考GenBank中鹅IFN-α基因序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增扬州鹅IFN-α的全基因。将去除信号肽的IFN-α克隆至pET32a(+)以构建pET-mGoIFN-α,重组菌经IPTG诱导表达重组蛋白,纯化后的蛋白(mGoIFN-α)免疫BALB/c小鼠,利用ELISA方法测定小鼠血清抗体效价,westernblot检测抗体特异性。同时,将IFN-α全长基因克隆至pcDNA3.1(-)以构建pcDNA-GoIFN-α,间接免疫荧光试验检测rGoIFN-α在鹅胚成纤维细胞(GEF)中的表达,细胞病变抑制法检测其抗水泡性口炎病毒(VSV)活性。结果显示:本研究扩增得到576bp的扬州鹅IFN-α全基因与486bp的成熟基因片段;原核表达的mGoIFN-α为36.3ku,免疫小鼠后可产生具有良好特异性与抗原活性的多克隆抗体,效价为1:16000;pcDNA-GoIFN-α可在GEF中表达,并具有较高的抗VSV活性。本研究为制备安全、高效的重组鹅干扰素,为研制鹅病毒性疾病的新型生物制剂奠定了基础。 相似文献