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1.
抗鸡传染性喉气管炎病毒单克隆抗体的研制及在诊断上的应用 总被引：2，自引：1，他引：1
鸡传染性喉气管炎王岗株病毒（ＩＬＴＶ）经ＳＰＦ鸡肾细胞增殖，差速离心及蔗糖密度梯度离心纯化；电镜观察，以纯化的病毒４次免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠，按常规方法进行细胞融合，采用有限稀释法克隆，经ＥＬＩＳＡ筛选出３株（８Ｅ２、１３Ｇ６，９Ｃ４）分泌抗ＩＬＴＶ特异ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞，特异性试验表明经闪与鸡的传染性支气管炎，痘病毒，新城疫病毒马立克氏病病毒，白血病病毒及鸡肾细胞均无交叉反应。在获得三株单抗建立单 相似文献
2.
抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的研制及其特性鉴定 总被引：1，自引：1，他引：0
以新生乳猪增殖猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）,通过蔗糖密度梯度离心将其纯化,获得较为完整的病毒颗粒。病毒ＥＬＩＳＡ效价为１∶３×１０５,蛋白含量为３．９６ｇ／Ｌ。将提纯的ＰＥＤＶ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,取免疫鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合,融合率为９５．６％。用间接ＥＬＩＳＡ进行筛选,共检出３８个阳性孔,阳性率为２８．８％。对其中１５个阳性值较高的孔进行３次再克隆,阳性率达１００％,最后获得１５株稳定分泌特异性抗ＰＥＤＶ单抗（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞。ＥＬＩＳＡ阻断试验与交叉试验证明,其分泌的抗体具有高度特异性。腹水和细胞培养上清的ＥＬＩＳＡ效价分别为１∶１０３～１∶１０６和１∶１２８～１∶５１２。经鉴定,１５株ＭｃＡｂ的分子类型均为ＩｇＧ,均无免疫沉淀特性。杂交瘤细胞的染色体数目为９０～１１０,平均９５。尤为重要的是,这些杂交瘤细胞所分泌的抗体,有的对ＰＥＤＶ具有中和作用,能够阻断病毒对猪只的侵害作用。 相似文献
3.
以纯化的兔出血症病毒免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，应用杂交瘤技术获得了分泌抗ＲＨＤＶ单抗杂交瘤细胞１７株，其中有３株杂交瘤细胞分泌单抗的ＥＬＩＳＡ效价为１：４０９６００，１：４０９６；５株单抗具有血凝抑制活性。兔抗ＲＨＤＶ高兔血清对１７株ＭｃＡｂ的ＥＬＩＳＡ抑株为ＩｇＧ２ｂ。各株ＭｃＡｂ与欧洲棕色兔病病毒无抗原交叉反应，也无沉淀反应特性。 相似文献
4.
马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原Ⅰ型特异性和群共同性决定簇的单克隆抗体 总被引：3，自引：1，他引：2
用能表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）的重组杆状病毒感染的Ｓｆ９细胞免疫小鼠，制备针对ＭＤＶｇＢ的单克隆抗体。以Ⅰ型马立克氏病病毒ＧＡ株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原，同时以免疫荧光试验（ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来筛选杂交瘤细胞，结果获得了ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ均为阳性的２株单克隆抗体细胞株，定名为ＢＡ４和ＢＤ８。在ＩＦＡ和免疫沉淀试验中，单抗ＢＤ８与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型ＭＤＶ均呈阳性反应；单抗ＢＡ４只对Ⅰ型ＭＤＶ（包括ＣＶＩ９８８疫苗株）呈阳性反应。免疫沉淀反应进一步确证２株单抗识别的是ＭＤＶ糖蛋白Ｂ抗原。 相似文献
5.
采用腹腔的接种１次脾内注射禽呼肠孤病毒（ＡＲＶ）蛋白免疫小鼠，经３次融合后，共筛选８株分泌抗禽呼肠孤病毒（单克隆抗体杂交瘤细胞株，这８株ＭｃＡｂ均可与ＡＲＶＳ１１３３株，ＦＤＯ株发生反应，而与ＩＢＤＶ，ＭＤＶ，ＥＤＳ－７６病毒不发生反应，经亚类鉴定，ＡＥ７，ＡＦ８，ＢＤ１，ＤＨ１０，ＥＥ５为ＩｇＧ１；ＡＤ６，ＣＧ４为ＩｇＣ２ａ，ＡＧ７为ＩｇＧ２ｂ。腹水效价在１０＾３～１０＾５之间。 相似文献
6.
用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株抗小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）单克隆抗这些单抗仅与ＧＰＶ反应，与其它细小病毒（ＰＣＰＶ、ＦＰＶ、ＰＰＶ）和其它禽病毒（ＮＤＶ，ＩＢＤＶ，ＤＨＶ、ＤＰＶ）均不反应，腹水单抗的ＥＬＩＳＡ效价达１０＾－５－１０＾－７，琼扩沉淀效效价达１：２０－１：５１２，鹅胚中和效价达１：３０－１：１２２，鹅体中和效价为１：５４－－１：９６。ＧＰＳ１和ＧＰＧ５２株单抗对人工感染ＧＰＶ的雏鹅具有良 相似文献
7.
抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立 总被引：6，自引：1，他引：5
将纯化的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）组织毒免疫的ＢＡＬＢ／ｃ鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，用ＥＬＩＳＡ，病毒中和试验检测分泌抗体，获得了６株稳定分泌抗ＩＢＤＶ单隆抗体的杂交瘤细胞，命名为ＮＩＢ－１，ＮＩＢ－２，ＮＩＢ－３，ＮＩＢ－４，ＮＩＢ－５，ＮＩＢ－６；６株ＭＣＡｂ均具ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性，亚类鉴定表明，前４株属于ＩｇＧ２ａ，后２株属于ＩｇＧ１。杂交瘤细胞冻存６个月后复苏，均 相似文献
8.
应用间接免疫荧光法检测鸡传染性贫血病病毒抗体的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
用鸡传染性贫血病病毒（ＣＩＡＶ）ＭＳＢＩ－ＴＫ５８０３毒株感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ；细胞涂片为抗原，建立了检测ＣＩＡＶ抗体的间接免疫荧光法（ＩＩＦＡ）。应用该ＩＩＦＡ方法对人工感染的ＳＰＦ鸡进行了检测１５只１日龄ＳＰＦ鸡在接种后第７、１４天时均呈阴性反应；２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，２１天时２只鸡呈弱阳性反应，２８天时均呈弱阳性反应，３５天时呈明显阳性反应；１４只４０日龄ＳＰ 相似文献
9.
蓝舌病病毒单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定 总被引：7，自引：0，他引：7
以纯化的蓝舌病病毒（ＢＴＶ）１１型ＶＰ７免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,动用淋巴细胞杂交瘤技术,借助间接ＥＬＩＳＡ筛选,获得了３株分泌抗ＢＴＶ１１ ＶＰ７的群特异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株,命名为Ｃ１２Ｄ９、Ｂ４Ｆ３、Ｅ１Ａ７。这３株杂交瘤细胞株连续传代３个月再经液氮冻存６个月后复苏培养,仍能稳定分泌特异性ＭｃＡｂ。３株ＭｃＡｂ均具有ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性,其中Ｃ１２Ｄ９株上清液的ＥＬＩＳ 相似文献
10.
应用杂交瘤技术获得了３株抗传染性法氏囊病病毒（ＣＪ８０１株）的单克隆抗体。３株单抗与鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡马立克氏病病毒均无交叉反应。ＣｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅＥＬＩＳＡ表明、３株单抗所对应的抗原位点互不重叠。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ试验表明、３株单抗所对应的抗原位点都位于ＶＰ２ｂ上。 相似文献
11.
应用提取纯化的抗ＩＢＤＶ ＩｇＧ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，其脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞在ＰＥＧ作用下融合，应用ＥＬＩＳＡ法检测筛选，经有限稀释法克隆２次，获得了２株（２Ｂ６株、５Ｆ４株）分泌抗ＩＢＤＶ独特型抗体的杂交瘤细胞株，并能诱生Ｂａｌｂ／ｃ小鼠产生高效价的含抗ＩＢＤＶ独型抗体腹水。 相似文献
12.
分泌抗鸡Ig单抗杂交瘤细胞系的建立与单抗生物学特性的鉴定 总被引：7，自引：0，他引：7
从传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞系１Ｄ１０、１Ｇ１中得到了３株能稳定分泌抗鸡免疫球蛋白（Ｉｇ）ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系１Ｂ７、１Ｄ７、３Ｇ６。其抗体类和亚类均属ＩｇＧ２ｂ，腹水的ＥＬＩＳＡ效价≥１∶２５６００，琼扩效价为１∶８～１∶１６。３株ＭｃＡｂ能与鸡血清中的Ｉｇ出现沉淀反应，琼扩在２４ｈ以内出现清晰的沉淀线，而不能和鸭、鸽、鹌鹑等禽类及异种动物血清出现沉淀线。纯化的鸡ＩｇＧ、ＩｇＭ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后，分别用纯化并经辣根过氧化物酶（ＨＰＲ）标记的１Ｂ７、１Ｄ７、３Ｇ６单抗酶结合物进行免疫印迹试验证明，３株单抗识别的均为ＩｇＧ、ＩｇＭ分子的轻链 相似文献
13.
用猪细小病毒免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，融合其脾细胞和ＳＰ２／Ｏ骨髓瘤细胞，筛选出５株分泌抗猪细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞系，用交叉ＨＩ法对２株ＭｃＡｂ作特异性分析，该ＭｃＡｂ只特异地与ＰＰＶ发生反应，而不与日本乙型脑炎，犬细病毒发生反应，用以建立检测猪小病毒本的ＥＬＺＳＡ，与ＨＩ比较，其敏感性及特异性无很高。 相似文献
14.
用单克隆抗体识别出一种与马立克病肿瘤细胞相关的淋巴细胞表面… 总被引：2，自引：0，他引：2
从经马立克病病毒（ＭＤＶ）诱发的种瘤细胞系ＭＳＢ－１细胞免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合中，筛选到一株杂交瘤细胞１４Ｂ３６７。在酶标抗体和荧光抗体反应中，单抗１４Ｂ３６７对ＭＳＢ－１细胞及ＭＤＶ诱发的另二株肿瘤细胞系ＲＰ４和ＲＰ１细胞表现明显的阳性反应，但与鸡白血病病毒及网状内皮增生病病毒诱发的肿瘤细胞系ＲＰ９和ＲＰ１３，以及ＳＰＦ鸡的脾、胸腺、腔上囊细胞仅产生微弱的交叉反应。免疫转印试验和免疫沉 相似文献
15.
将猪细小病毒（ＰＰＶ）免疫的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与ＳＰ２／０细胞在聚乙二醇作用下融合，用血凝抑制试验（ＨＩ）筛选，以有限稀释法克隆３次，得到５株分泌抗ＰＰＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ），选择抗体分泌较高的４Ｆ４、Ａ４或Ｅ８进行较详细的研究，结果表明，其核内染色体数为９３和８７，抗体属性为ＩｇＧ１，其中１株为Ｋ轻链，用交叉ＨＩ法对２株ＭｃＡｂ作特异性分析，该ＭｃＡｂ只特异地与ＰＰＶ发生反应，而不与日本乙 相似文献
16.
抗新城疫病毒糖蛋白单克隆抗体的研制及其特异性分析 总被引：5，自引：0，他引：5
应用纯化的新城疫病毒Ｆ４８Ｅ９株免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｐ骨髓瘤细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法检测筛选到４２株分泌抗ＨＤＶ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。并对各株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类，血凝抑制效价，溶血抑制效应ＥＬＩＳＡ效价及中和效价加 测定，结合单克隆抗体的Ｗｅｓｔｅｒｂ ｂｌｏｔ反应结果出抗ＮＤＶ ＨＮ蛋白１１株，抗Ｆ蛋白２０株。 相似文献
17.
用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株抗小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）单克隆抗体。这些单抗仅与ＧＰＶ反应，与其它细小病毒（ＣＰＶ、ＦＰＶ、ＰＰＶ）和其它禽病毒（ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＤＨＶ、ＤＰＶ）均不反应。腹水单抗的ＥＬＩＳＡ效价达１０－５—１０－７，琼扩沉淀效价达１∶２０—１∶５１２，鹅胚中和效价达１∶３０—１∶１２２，鹅体中和效价为１∶５４—１∶９６。ＧＰＡ１和ＧＰＣ５２株单抗对人工感染ＧＰＶ的雏鹅具有良好防治效果。 相似文献
18.
李新华 《中国预防兽医学报》1998,(4)
用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株抗小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）单克隆抗体。这些单抗仅与ＧＰＶ反应，与其它细小病毒（ＣＰＶ、ＦＰＶ、ＰＰＶ）和禽病毒（ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＤＨＶ、ＤＰＶ）均不反应。腹水单抗的ＥＬＩＳＡ效价达１０－５～１０－７，琼扩沉淀效价达１２０～１５１２，鹅胚中和效价达１３０～１１２２，鹅体中和效价为１５４～１９６。ＧＰＡ１和ＧＰＣ５两株单抗对人工感染ＧＰＶ的雏鹅具有良好防治效果。 相似文献
19.
应用纯化的新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ９株免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法检测筛选到４２株分泌抗ＮＤＶ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。并对各株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类、血凝抑制效价（ＨＩ）、溶血抑制效价（ＨＬＩ）、ＥＬＩＳＡ效价及中和效价加进行了测定，结合单克隆抗体的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ反应结果鉴定出抗ＮＤＶＨＮ蛋白１１株，抗Ｆ蛋白２０株 相似文献
20.
利用常规法建立分泌抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）的单抗细胞株，选其中特异性强、稳定性好、分泌抗体效价高的两株单抗２（１）和２（４），用于建立单抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＩＢＶ，该方法仅与ＩＢＶ，呈阳性反应，而与鸡新城疫病毒、鸡传染性法氏囊炎病毒、禽腺病毒、鸡传染性喉气管炎、鸡支原体等病原体均呈阴性反应。１４日龄ＳＰＦ鸡接种ＩＢＶ后，用本方法对其两周内的口腔棉拭样品进行跟踪检测，结果检出率为８０％。将 相似文献