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1.
为获得稳定性好、特异性强、效价较高的抗金黄色葡萄球菌蛋白A单克隆抗体,用热灭活的金黄色葡萄球菌wol-04菌体抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,以金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)为筛选抗原进行克隆筛选,并对各株单抗的生物学特性进行分析和鉴定.结果表明:试验获得了3株稳定分泌SPA单克隆抗体的杂交瘤细胞,其中单克隆抗体3B11、4F7为SPA表面抗原表位的单克隆抗体,与金黄色葡萄球菌wol-04菌体和SPA有较强的免疫反应性,免疫球蛋白亚类分别为IgG1和IgG3,具有稳定性好、特异性强、效价较高的特点. 相似文献
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[目的]为了获得高纯度鸡免疫球蛋白(Ig),并保持其生物学活性。[方法]比较几种纯化鸡血清免疫球蛋白(IgG)的方法。用饱和硫酸铵(NH4)2SO4沉淀法或乙醇沉淀法提取鸡血清IgG,经透析除盐,将初提物过sephadexG-200柱进一步分离IgG,经免疫电泳和SDS-PAGE电泳进行纯度鉴定。[结果]结果表明:在该试验条件下,(NH4)2SO4盐析和乙醇沉淀法获得的鸡IgG经sephadexG200柱分离获得高纯度的鸡IgG。[结论]该研究为找到较好的纯化鸡血清IgG方法提供了试验依据。 相似文献
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为探讨鸭源禽流感灭活抗原与佐剂配合饮水免疫雏鸭的效果,应用鸭源禽流感灭活抗原与复合黏膜免疫佐剂(CpG和/或葡萄糖)饮水免疫雏鸭,检测消化道(主要是咽和小肠)抗体分泌细胞的变化。首先分别从鸭的胆汁和血清中粗提免疫球蛋白A(IgA)和IgG,经纯化后制备了兔抗鸭IgA和IgG,然后应用免疫组化技术显示鸭消化道IgA和IgG分泌细胞。试验结果表明:用禽流感灭活抗原配合CpG和/或葡萄糖饮水免疫后3、5和7周,消化道黏膜局部IgA分泌细胞面积均显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01),IgG分泌细胞(除首免后第3和7周小肠外)极显著升高(P<0.01)。而单独用禽流感灭活抗原和用葡萄糖配合禽流感灭活抗原饮水免疫对消化道局部免疫水平影响不大。结论:鸭源禽流感灭活抗原配合免疫佐剂饮水免疫能够提高雏鸭消化道局部免疫水平。 相似文献
4.
用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人工感染肝片吸虫的山羊血清中的特异 IgG 抗体动态变化。代谢分泌抗原(ESAg)用量为13.8μg/孔,抗体稀释1000倍,二抗12000倍稀释(3.5μg/孔,)辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌 A 蛋白(SPA)工作浓度1:40。检测结果表明,两组实验山羊(第一组每只羊口服200个囊蚴,第二组每只羊口服500个囊蚴)在感染后血清中的特异 IgG 水平呈现一个动态变化趋势,第二组于第6周(42d)IgG 水平升到高峰,随后稍有下降,第一组于第9周(63d)IgG 水平升到最高峰,随后又稍有下降, 相似文献
5.
为了获得纯度高、特异性好的抗猪丹毒丝菌特异性IgG，采用抗原反向吸附结合重组葡萄球菌蛋白A(SPA)亲和层析法对猪丹毒丝菌阳性血清进行纯化。结果表明，血清用量对IgG的纯化结果影响不大，而细菌的用量则与IgG的获得量成正比；用猪丹毒丝菌与阳性血清吸附，初步纯化出的猪丹毒丝菌特异性IgG，再用SPA亲和层析法特异性的浓缩和纯化IgG，获得的抗体含量为240 μg/mL，即从8 mL阳性血清中获得360 μg猪丹毒丝菌特异性IgG，其纯度接近100%，可用于噬菌体展示的靶分子。
关 键 词：猪丹毒丝毒；特异性免疫球蛋白G(IgG)；猪血清；IgG纯化；纯度；重组葡萄球菌蛋白A凝胶(SPA)；SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE) 相似文献
6.
应用鸡胚皮肤细胞培养传染性喉气管炎(ILT)病毒,经超速离心浓缩后制成抗原,兔抗鸡IgG 经辣根过氧化物酶标记,制成酶标抗体,进行酶联免疫吸附试验(ELISA),确定了该实验的最适条件。血清单稀释度(1:80)的光密度值(OD 值)与终点法所测定的ELISA 滴度(ET)的自然对数间有良好的线性关系:Ln(ET)=5.80(OD) 3.76(r=0.94>r0.01),说明可利用血清的单稀释度测定鸡血清中ILT 抗体,同终点法相比,单稀释ELISA 可将检查效率提高8～10倍,是一种快速、敏感的实用方法。本实验还研究了人工感染、疫苗免疫后鸡血清中的抗体消长情况,比较了单稀释ELISA、血清中和实验(SN)、琼脂扩散沉淀试验(AGP)的特点。 相似文献
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采用已构建的能表达致断奶仔猪腹泻（PWD）和仔猪水肿病（ED）大肠杆菌保护性抗原FedA-Stx 2e B-FaeG融合蛋白的重组菌BL21（pFSFaeG）和重组菌X4550（pFSFaeG）,经IPTG诱导后制成抗原,经口服及灭活后制成油乳剂苗免疫小鼠后,检测IgG抗体水平的变化。结果表明：重组菌经灭活后免疫小鼠能够诱导产生针对上述3种保护性抗原的特异性抗体IgG。免疫效力试验结果显示,两种重组菌的最佳免疫途径均为灭活后经腹腔免疫。 相似文献
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<正>葡萄球菌A蛋白(SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁所特有的一种成分,它能与猪、马、牛、羊等多种哺乳动物IgG分子Fe段发生非特异性结合,而不影响该抗体与抗原的反应性.1988年5月,我们利用SPA的这一特性,诊断鸡传染性喉气管炎病毒,获得了满意的结果. 相似文献
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赵新柳 《华南农业大学学报》1989,(3)
本文首次报道一种快速检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的反向被动血凝法(RPHA),并对其特异性、敏感性和实用性进行了探讨。还用该RPHA法比较了不同纯度抗原制备的抗体的免疫学特性和应用价值。最后,对单克降抗体(McAb)用于RPHA的可能性也进行了一些试验。 结果表明:1.用RPHA法检测IBV有快速、敏感、简便而准确的优点;2.病毒抗原经一次超速离心处理,即可达到RPHA的要求,3.抗体谱较窄或效价较低的McAb,可能不适用于IBV的RPHA方法。 相似文献
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应用亲和素——生物素——过氧化物酶复合物(ABC)技术检测经不同途径接种ARV的鸡只,结果表明ARV抗原广泛分布于内脏实质器官、肠道、腱鞘和滑膜。在接种后4周除腱鞘和滑膜外,都检不到病毒抗原的存在,而这两种组织到试验结束时(60d)仍为阳性,感染鸡血液涂片的ABC检测结果均为阴性,ABC技术比病毒分离法更敏感。 相似文献
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采用L（934）正交设计试验,对山茱萸浸提液中山茱萸多糖的酶水解法提取工艺进行了优化研究,并对浸提液的中有效成分马钱苷含量进行了HPLC法分析。结果表明,山茱萸多糖浸提的最佳工艺为：液料比1∶5,浸提时间4 h,浸提温度80℃,果胶酶添加量0.55 g/L。用HPLC法测定出的山茱萸浸提液中马钱苷平均含量为0.512 ... 相似文献
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切花菊耐热性鉴定方法研究 总被引：2，自引：0，他引：2
以8个切花菊品种为材料,通过对离体叶片进行50℃高温胁迫后,采用电导法、电阻抗图谱法测定电导率、电阻,并对大田栽培植株进行田间高温胁迫试验,比较品种间的耐热性。结果表明:电导法测得的50℃直接相对电导率、修正相对电导率和电阻抗图谱法测得的胞外电阻在品种间有明显差异,但与田间高温胁迫法测定的热害指数不完全一致。电导法和电阻抗图谱法都可以作为测定切花菊耐热性的方法,但需要结合田间耐热性观察。 相似文献
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生态旅游潜在客源市场特征的调查研究--以湖南永州金洞森林旅游开发为例 总被引：5，自引：2，他引：3
李慧云 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2004,30(2):165-168
为探明客源市场生态旅游消费的潜在特征,采用问卷调查的形式,就长沙市居民对湖南金洞生态旅游开发的意向等问题进行抽样调查．结果显示,生态旅游符合人们“回归自然”的旅游新时尚,有着极大的开发空间,指出生态旅游的开发要注重环境保护和可持续发展．开发的产品要以休闲度假类的大众产品为主,开发生态旅游都市客源市场还要多种渠道并用,尤其是要注重媒体的宣传． 相似文献
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利用已构建的过表达拟南芥(Arabidopsis)GEF7基因植株,在光照培养箱中进行培养,并与野生型植株进行对比分析,对GEF7基因过表达植株的幼苗表型进行了观察分析。结果表明,GEF7基因过表达植株幼苗的根长比野生型对照明显增加;其子叶形态、数目和幼苗形态等方面均有异常表型,表明GEF7基因的功能与根的发育有关,并参与调控植物的发育过程。 相似文献
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《河北农业大学学报》创刊年代考 总被引：3，自引：0，他引：3
清光绪二十八年(1902)河北农业大学前身—直隶农务学堂诞生,经几易其名,于1958年更名为河北农业大学至今。清光绪三十一年(1905)直隶高等农业学堂时期创办了《北直农话报》,清光绪三十四年(1908)更名为《直隶农务官报》,中华民国七年(1918)改出《农学月刊》,中华民国十七年(1928)易名为《河大农刊》,中华民国二十三年(1934)更名为《河北通俗农刊》,中华民国二十四年(1935)易名为《河北农林学刊》,1948年更名为《河北农学院研究专刊》,1959年更名为《河北农业大学学报》至今。《河北农业大学学报》前身诸刊都与现时的《河北农业大学学报》有着一脉相承的历史渊源,各刊之间联系紧密,连续性、继承性强。因此,《河北农业大学学报》的创刊时间应追溯至1905年创办的《北直农话报》。 相似文献
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姬松茸碳源利用规律的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
试验采用麦秸培养基,系统研究了姬松茸在生长期间对碳源的利用规律。结果表明,姬松茸降解的有机物质绝大部分被菌体的呼吸过程消耗掉,绝对生物学效率较低;在菌丝生长阶段,木质素的降解速率大于纤维素和半纤维素,这对纤维素和半纤维素的降解十分有利;非木质纤维素组分在菌丝生长阶段被主要利用,而木质纤维素则是子实体生长阶段的主要碳源。且就整个栽培过程而言,姬松茸生长发育所需要的79.86%的碳源来自木质纤维素。 相似文献
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应用萄聚糖凝胶柱层析对水牛梭形住肉孢子虫包囊包溶性抗原进行了纯化。结果表明：纯化水牛梭形住肉孢子虫包囊抗原的最适条件为：选用萄聚糖凝胶Ｇ—１００柱层析系统；洗脱液为０３ＭＰＢＳ（ｐＨ７２），床体积为１０ｃｍ×１６５ｃｍ，上样体积为５００ＨＬ；流速为１２ｍＬ／ｈ。纯化抗原可使琼脂凝胶双扩散试验的阳性检出率提高３０％。 相似文献