鸡胰多肽、猪胰多肽的提取、纯化和鉴定研究     

赵成萍  张映 《山西农业大学学报(自然科学版)》2006,26(2):141-142,158

本实验利用磷酸钙吸附法从猪胰脏、鸡胰脏中分别得到了鸡胰多肽(APP)、猪胰多肽(PPP)粗提液,用sphadex G-50柱层析脱盐后制备出了APP、PPP粗品;并用Folin-酚试剂法测得自制APP、PPP粗品的肽含量;用SDS-PAGE电泳法对自制APP、PPP粗品进行了鉴定。结果表明:用Folin-酚试剂法测得自制APP粗品的肽含量为:24.52 mg.g-1;PPP粗品的肽含量为:8.15 mg.g-1。从电泳图像可见,经Sephadex G-50层析后的APP、PPP纯度较高,APP和PPP的分子量在4.2KD范围内,与Kimmel等报道的结果以及市售APP纯品的分子量是一致的。  相似文献   

牛羊乳热处理蛋白质变性程度比较及机理分析     

李林强  朱莉莉  万威 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2016,44(11):149-154,160

【目的】比较牛、羊乳热处理后蛋白质变性程度,探讨牛、羊乳蛋白质热稳定性差异机理。【方法】采用离心沉淀法、全自动色差仪和SDS-PAGE电泳法,以未热处理的常温(18~20℃)牛、羊乳为对照,测定不同温度(95,121℃)处理15min后牛、羊乳蛋白质沉淀率、红值(a*)和酪蛋白的组成;并采用考马斯亮蓝法、菲林试剂法和激光粒度仪测定牛羊鲜乳蛋白质、还原糖质量浓度及蛋白质粒度大小。【结果】羊乳蛋白质沉淀率显著高于牛乳(P0.05),牛乳酪蛋白的红值显著高于羊乳(P0.05),牛、羊乳酪蛋白主要均为β-酪蛋白和αs1-酪蛋白2种,分子质量分别约为34和26ku;羊乳蛋白质质量浓度((37.67±1.67)g/L)显著高于牛乳((20.33±1.20)g/L)(P0.05),还原糖质量浓度((421.77±10.17)mg/L)显著低于牛乳((525.67±14.98)mg/L)(P0.05);牛乳蛋白质粒度大小主要集中在1nm以下,羊乳蛋白质粒度只有少部分在1nm以下,主要分布于1~1 000nm。【结论】牛、羊乳蛋白质粒度和还原糖质量浓度分别是影响其蛋白质沉淀率和羰氨反应程度大小的主要因素。  相似文献   

JS018菌有机磷农药降解酶的纯化   总被引：1，自引：0，他引：1  

江玉姬  邓优锦  刘新锐  胡方平  谢宝贵  刘福阳  黎志银 《江西农业大学学报》2006,28(3)

实验对一株能高效降解几种有机磷农药菌株JS018的降解酶进行分离和纯化。经分析该降解酶主要位于细胞间质,最适盐析硫酸铵饱和度为60%~70%,粗酶液经硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶过滤和DEAE-52柱层析得到较高纯度的酶液。通过PAGE和SDS-PAGE电泳测定该酶分子量约为37KDa,N末端16个氨基酸残基测序的结果为:GAPFQNDVPPACYRFR。  相似文献   

枯草芽孢杆菌胞外二氢硫辛酰胺脱氢酶的纯化     

武爱民  江正强  韦谮  苏春元 《中国农业大学学报》2008,13(1):16-19

采用弱阴离子树脂 DEAE-52 和蓝色琼脂糖凝胶 FF 层析对枯草芽孢杆菌产生的胞外二氢硫辛酰胺脱氢酶的粗酶液进行 2 步纯化,得到电泳纯的二氢硫辛酰胺脱氢酶,纯化倍数为59.7,收率为46.9%.通过 SDS-PAGE 法测得其亚基分子质量为64.6 ku,Superdex 75 法测得其分子质量为67.5 ku,表明枯草芽孢杆菌 WY34 产胞外二氢硫辛酰胺脱氢酶为单亚基蛋白质.本研究采用的二氢硫辛酰胺脱氢酶的纯化方法,简便且收率较高.  相似文献   

苦瓜子蛋白分离纯化的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

雷万钧 《山西农业科学》2009,37(5):20-23

把苦瓜子粉碎后用50 mmol/L乙酸抽提、硫酸铵沉淀,经透析得到蛋白粗提液,然后用考玛斯亮蓝G-250法测蛋白质含量为16.517μg/g;SDS-PAGE分析表明,苦瓜种子含有3种蛋白组分,相对分子质量分别为29.5,22.0和9.6 kDa,其中分子量为29.5 kDa的含量最多,9.6 kDa的含量次之,22.0 kDa的含量最少。再对粗提液过Sephadex G-100凝胶柱进一步纯化得到4个主峰,吸光度分别为0.62,0.28,0.36,0.42;经SDS-PAGE检测,得知第1,2峰分子量均为29.5 kDa。  相似文献   

梅花鹿鹿茸总蛋白的提取方法比较     

杨颖  徐代勋  曲勃  邢秀梅  杨福合 《特产研究》2011,33(2):11-12

蛋白质提取是进行蛋白组学分析的关键步骤。本试验比较了水溶、盐溶及醇溶3种提取方法对获取梅花鹿鹿茸总蛋白含量及SDS-PAGE电泳分辨率等的区别。结果表明,水溶法提取鹿茸蛋白质最佳,该方法提取的蛋白质含量高、能得到比较好的SDS-PAGE电泳图谱。进而对SDS-PAGE电泳操作步骤进行了探讨,确立了适用于蛋白组学下游技术-双向电泳分析（蛋白质提取、凝胶制备、染色、脱色）的方法。  相似文献   

嗜水气单胞菌322A的外膜蛋白及其抗原性     

廖紫超  张伟妮  黄小红  石妹妹 《福建农林大学学报(自然科学版)》2014,43(6)

用十二烷基肌氨酸钠抽提结合超速离心的方法提取一株日本鳗鲡致病性嗜水气单胞菌322A和其他4株气单胞菌标准菌株的外膜蛋白(Omp);通过SDS-PAGE分析比较这5株气单胞菌Omp的组成.结果表明,5株气单胞菌的Omp电泳可得到5-13条条带,其分子质量主要集中在20-50 ku之间,且28 ku的Omp为5株气单胞菌所共有.用罗非鱼感染322A全菌后的恢复期血清进行蛋白质印迹试验的结果显示,322A的Omp条带中有4条发生阳性反应,其分子质量分别为28、37、43和45 ku.用兔抗322A Omp的血清进行蛋白质印迹试验的结果显示,322A的Omp条带中有5条发生阳性反应,其分子质量分别为28、33、37、43和45 ku.不同抗血清的印迹结果提示了322A数条主要Omp具有免疫原性,有望成为疫苗研发的候选材料.  相似文献   

卷须链霉菌木聚糖酶B的纯化   总被引：3，自引：0，他引：3  

丁长河  江正强  李里特  李秀婷  张艳 《中国农业大学学报》2003,8(6):1-4

为了进一步研究链霉菌木聚糖酶的酶学性质，探讨了卷须链霉菌一种木聚糖酶的纯化方法。粗酶液经硫酸铵饱和度为20％～50％的分级沉淀和Q-sephrose FF离子交换柱层析2步纯化，得到一种电泳纯的木聚糖酶。定名为XynB；酶蛋白纯化倍数达到10．0倍，酶活力回收率达到24．0％。SDS-PAGE结果表明，该木聚糖酶的分子质量为22．0ku，属于低分子质量的木聚糖酶。  相似文献   

1种利用SDS-PAGE检测过氧化物酶同工酶的分析方法     

廖海  杜祯  周嘉裕  宋良科  靳晓娥  黄丹娥 《安徽农业科学》2008,36(14):5759-5761

[目的]建立1种能够检测过氧化物酶同工酶的电泳方法。[方法]利用SDS-PAGE分离蛋白质样品分辨率较高的优点,借助SDS-PAGE分离蛋白质样品,电泳完毕后,胶板用Triton X-100处理,使过氧化物酶同工酶复性,以醋酸联苯胺染色。[结果]利用新建立的方法发现,5种菖蒲属植物含有6条过氧化物酶同工酶带,而利用传统的PAGE分析方法则只显示5条过氧化物酶同工酶带。与PAGE同工酶检测方法比较,新建立的方法分离效果更好,酶带边界更清晰,是1种分辨率更高的检测方法。[结论]利用新建立的方法得到的过氧化物同工酶电泳图谱可以为菖蒲的科学分类和鉴定提供新的生化指标。  相似文献   

黑曲霉单宁酶提纯及其性质的研究   总被引：6，自引：0，他引：6  

王征  谢达平  谭周进  李立恒  刘如石 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2001,27(1):60-62

为探明单宁酶应用于生产的条件 ,从黑曲霉发酵液中分离提纯了单宁酶 ,经过 (NH4) 2 SO4分步沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和 Sephadex G- 15 0凝胶层析等 3步纯化 ,得到电泳纯的单宁酶 .用 SDS- PAGE法测得该酶有 2种亚基 ,相对分子质量分别为 7.5 9× 10 4,6 .0 3× 10 4.该酶为糖蛋白 ,蛋白质含量为 72 .5 % ,糖含量为12 .3% .该酶的最适 p H为 5 ,最适温度为 40℃ .  相似文献