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相似文献
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1.
蛹虫草超氧化物歧化酶的分离纯化及性质研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
苏瑛  唐咏  王成春 《安徽农业科学》2005,33(8):1388-1389
以蛹虫草为材料,经过硫酸铵盐析、SephedexG!75柱层析和DEAE!52柱层析,得到纯化的超氧化物歧化酶(SOD),经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单一蛋白区带,此酶比活力为17855.73U/mg,纯化倍数为53.7,回收率为21.8%。该酶在40℃保温150min,活性不变;在pH值5.0~9.0有较好的稳定性。该酶每亚基含1原子铁,对H2O2和乙醇-氯仿溶液敏感。  相似文献   

2.
从118份样品中分离到1株产植酸酶的枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis WHNB02),其发酵液经乙醇沉淀、硫酸铵分级沉淀及Sephadex G-100柱层析等步骤后分离纯化了该酶,纯化倍数约为31.5倍,回收率为13.0%。该酶为单体酶,SDS—PAGE测得的分子量约为43KD,以植酸钠为底物的Km值为0.5mmol/L,酶反应的最适温度为60℃,80℃作用10min酶活保存61%,最适pH为7.0,在pH6.0—10.0范围内稳定,酶活性及稳定性都需Ca^2+存在。EDTA,Mn^2+,Ba^2+(5mmol/L)对酶活具有很大的抑制作用。  相似文献   

3.
拈抗链霉菌(Steptomyces spp.)R15菌株是从大白菜植株根际土壤分离得到的,其代谢产生的抗菌物质对多种植物病原真菌有很强的抑制作用。采用ABP选择性培养基诱导培养法,获得4株(R8,R15,R31和AS)产β-1,3-葡聚糖酶菌株。其中链霉菌R15菌株在ABP平板上培养7d后,透明圈最大(〉12mm),澄清度最高。从R15菌株提取酶液,经10%~75%的硫酸铵沉淀盐析、羟基磷灰石柱层析及DEAE-52柱层析得到纯化,纯化倍数为13.98,回收率达4.031%。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该酶的分子量为41.3kDa。酶特性研究结果表明。该酶作用的最适温度为55℃,最适pH为5.0,低于55℃、pH7.5以下酶较稳定。Fe^3+、K^+、Cu^2+、Hg^2+对酶有抑制作用,而Ca^2+、Fe^2+、Ba^2+、Mn^2+、Al^3+及Zn^2+对酶有激活作用。  相似文献   

4.
卷须链霉菌木聚糖酶B的纯化   总被引:3,自引:0,他引:3  
为了进一步研究链霉菌木聚糖酶的酶学性质,探讨了卷须链霉菌一种木聚糖酶的纯化方法。粗酶液经硫酸铵饱和度为20%~50%的分级沉淀和Q-sephrose FF离子交换柱层析2步纯化,得到一种电泳纯的木聚糖酶。定名为XynB;酶蛋白纯化倍数达到10.0倍,酶活力回收率达到24.0%。SDS-PAGE结果表明,该木聚糖酶的分子质量为22.0ku,属于低分子质量的木聚糖酶。  相似文献   

5.
鸭肝碱性磷酸酶的分离纯化及其部分性质研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
经过匀浆、正丁醇除脂、硫酸铵分级分离、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析、Sephacryl S-200凝胶过滤等步骤,从鸭肝中分离纯化出电泳纯的碱性磷酸酶,该酶纯化倍数达58.3倍,比活为337.4U/mg.经SDSPAGE和凝胶过滤测得该酶的全分子量为121.0kD,亚基分子量为60.5kD.以磷酸苯二钠为底物,测得该酶的最适pH为9.0,最适温度为40℃.Na^+、K^+、Li^+等一价离子对该酶活性基本无影响,Mg^2+、Mn^2+对该酶活性有激活作用,Cd^2+对该酶活性有抑制作用.米氏常数Km为1.28mmol/L.  相似文献   

6.
超声波对菜豆种子超氧化物歧化酶活性的影响   总被引:6,自引:0,他引:6  
菜豆种子粗酶液经乙醇-氯仿、丙酮沉淀、DEAE-纤维素柱层析和Sephadex G-75柱层析,获得比活力为127.45U/mg的超氧化物歧化酶(SOD),该酶活性受H2O2和KCN强烈抑制,经电泳鉴定为3种SOD同工酶,部分纯化的SOD证明为Cu,Zn-SOD,经不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳获得其中1种电泳纯的酶,超声波处理此酶后,酶活力发生改变,适宜的超声波参数能显著提高酶活力,经超声波处理后,SOD的紫外吸收光谱无明显变化,而紫外差示光谱在一定波长范围内出现正峰和负峰。  相似文献   

7.
[目的]探讨类芽孢杆菌产生胞外胆固醇氧化酶(COD)的分离、纯化方法,为其生产和应用提供技术支持.[方法]将类芽孢杆菌发酵液通过旋转蒸发浓缩、蔗糖透析浓缩、DEAE离子交换柱层析和凝胶层析,纯化目的蛋白,然后测定获得酶的基本酶学性质.[结果]类芽孢杆菌发酵液经DEAE离子交换柱层析和SephadexG-75凝胶柱层析后,纯化所得的COD比活力达6.83U/mg,酶活力回收为35.6%,纯化倍数为13.4倍.纯化酶经SDS-PAGE显示为均一条带,分子量约58 kDa.将纯化的COD作用于不同浓度胆固醇,采用Lineweaver Burk作图法,测得其Km=3.3×10-5 mol/L.薄层层析结果显示,产物为胆甾-4-烯-3-酮,说明纯化所得酶是COD.[结论]纯化获得电泳纯类的芽孢杆菌胞外COD,其与底物亲和力较强,具有潜在的应用研究价值.  相似文献   

8.
经磷缓液提取,乙醇沉淀,超滤去杂,然后经CM-纤维素柱层析,DEAE-SephadexA-50柱层析纯化了Dactylosporangium aurantiacum菌脲酶,纯化倍数达50.01,活力回收率为17.81%,经SDS-PAGE垂直平板电泳测得其分子量为42000。经氨基酸组成分析,该酶含271个氨基酸残基,该酶的紫外吸收峰为275nm。  相似文献   

9.
烟草叶片铜锌超氧化物歧化酶的纯化和性质   总被引:2,自引:0,他引:2  
经硫酸铵分级沉淀、SephadexG - 75凝胶过滤和DEAE - 3 2层析 3个步骤 ,将烟草叶片中Cu·Zn -SOD纯化到均一程度。测定结果表明 ,酶比活力达 2 2 60U/mgpr,酶的亚基分子量为 16 7kD、N -末端氨基酸为丙氨酸 ,该酶在紫外光区最大吸收峰为 2 63nm ,其铜、锌含量分别为 0 4 5 %和 0 5 2 %。  相似文献   

10.
[目的]进一步研究毛栓菌木聚糖酶的酶学性质。[方法]对毛栓菌木聚糖酶的粗酶液进行硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换柱层析S、ephadexG100柱层析3步纯化,探讨木聚糖酶的产酶曲线及纯化方法。[结果]毛栓菌在最适培养基中培养时,木聚糖酶活力从第2天迅速提升,第8天达高峰,随后下降。经饱和度为30%~70%的硫酸铵分级沉淀后,酶活力回收率为84.931%,蛋白质含量为粗酶液的24.640%,纯化倍数为3.445。经DEAE-纤维素离子交换层析后,酶活力回收率为44.345%,酶蛋白纯化倍数为11.772。经SephadexG100柱层析后,酶活力回收率为20.201%,酶蛋白纯化倍数为16.123。[结论]毛栓菌木聚糖酶的粗酶液经过3步纯化后,酶活力回收率达20.201%,酶蛋白纯化倍数达16.123。  相似文献   

11.
beta-Aminoisobutyric acid was isolated from organ extracts of Mytilus edulis. Ion-exchange resins and large-scale paper chromatography were used to isolate minute quantities of the compound. beta-Aminoisobutyric acid was identified by paper chromatography in several solvents and by conversion to DNP-beta-aminoisobutyric acid and subsequent chromatography of the derivative in several solvents.  相似文献   

12.
With a gas chromatography procedure capable of quantitatively de tecting nitrilotriacetic acid, N-methyliminodiacetic acid, iminodiacetic acid, sarcosine, and glycine at concentrations of 0.025 milligram per liter, it was shown that these compounds were biodegraded by river water. In particular, nitrilotriacetic acid was degraded without the accumulation of any of the amino acids mentioned above or the appearance of any new peaks in the gas chromatography analysis.  相似文献   

13.
[目的]研究并优化土壤样品中全量氯离子的前处理方法,并用离子色谱进行测定,考察熔剂、酸度及色谱条件对测定结果的影响.[方法]用硫酸对4种土壤样品(杨凌土、酸性土、甘泉县大棚土和沙土)进行消解后,用离子色谱测定土壤样品中全量氯离子含量.[结果]杨凌土,酸性土、甘泉县大棚土消解后测定时硫酸的体积分数为0.8%,氯离子浓度为1~ 20 mg/L,回收率为97.3% ~ 100.9,精确度为1.35% ~ 3.38%.在沙土样品中,残留大量的硫酸浓度,可达363 mg/L,超出仪器的检测线.[结论]通过优化色谱条件,调整淋洗液浓度、泵的流速等,回收率和重现性良好,操作简单,可以快速、准确测定酸消解土壤样品的全量氯离子.  相似文献   

14.
赵晶  张爱琳 《安徽农业科学》2014,(20):6776-6778
[目的]了解宁河县酱腌菜辣萝卜干中防腐剂和甜味剂的使用情况,加强食品添加剂的监测。[方法]通过薄层色谱法和高效液相色谱法对辣萝卜干中苯甲酸、山梨酸和糖精钠进行定性定量分析。[结果]分析表明,辣萝卜干中苯甲酸含量为0.590 4 g/kg,山梨酸含量为0.309 8 g/kg,糖精钠含量为0.090 8 g/kg,通过参考GB2760-2011《食品添加剂使用卫生标准》标准进行评价,样品辣萝卜干中苯甲酸、山梨酸和糖精钠均在限量使用范围内。[结论]研究可为酱腌菜生产企业采用食品添加剂提供一定的理论依据,保障消费者食用安全、健康、放心。  相似文献   

15.
饲料用米曲霉酸性蛋白酶研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
[目的]研究米曲霉酸性蛋白酶的纯化技术以及催化特性,为米曲霉酸性蛋白酶的开发和利用提供理论依据。[方法]采用丙酮沉淀,DEAE—Sephadex A-50柱层析方法分离纯化了米曲霉酸性蛋白酶,以酪蛋白为底物对其酶学性质进行了研究:[结果]结果表明:纯化倍数达到20.77;该酶最适pH值为6.0,最适温度为45℃;Fe^2+、Mg^2+对该蛋白酶的活性有明显的抑制作用,而Mn^2+、Cu^2+对该蛋白酶的活性有明显的激活作用。该蛋白酶Km=4.704mg/ml,Vmax=22.27μg/min。[结论]米曲霉蛋白酶具有很好的应用前景。  相似文献   

16.
Galactose is converted to galactonic acid in vivo in man. Galactonate was isolated from the urine of galactosemia patients who had been given galactose orally. The identity of the galactonate was established by gas-liquid chromatography and by the preparation of derivatives.  相似文献   

17.
利用木瓜芽孢进行愈伤组织的诱导,采用渗漉法对木瓜愈伤组织中的齐墩果酸进行了提取,然后用薄层层析法对齐墩果酸进行了分离,用比色法进行测定.筛选出最适合愈伤组织生长的培养基为,MS+2,4-D2.5 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1,木瓜愈伤组织中游离齐墩果酸的含量为0.078%.通过木瓜愈伤组织进行齐墩果酸的...  相似文献   

18.
以山东省珍稀地方名产珍珠油杏为试材,采用高效液相色谱技术对其果实的糖酸组分进行了分析。结果表明:珍珠油杏果实含有3种糖组分:果糖、葡萄糖、蔗糖;5种有机酸组分:草酸、苹果酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸。糖组分以蔗糖含量最高,占糖总量的70.53%,其次为葡萄糖,果糖含量最低;有机酸组分以苹果酸较高,占酸总量的58.58%,柠檬酸次之,琥珀酸、乙酸、草酸含量较低。珍珠油杏属于苹果酸型杏品种。  相似文献   

19.
五种套袋对早熟梨果实糖酸和毒死蜱农药残留的影响   总被引:3,自引:1,他引:2  
为探讨早熟梨套袋对果实糖酸含量及毒死蜱农药残留的影响,以早熟梨苏翠1号作为研究试材,选择5种纸袋分别进行套袋,采用高效液相色谱和气相色谱分析比较了糖酸组分含量、果实毒死蜱农药残留的差异。结果表明,套袋果实的光洁度及亮度明显提高,以黄白袋HB和复合黑蜡袋FL处理较高,对果实大小、果形指数没有显著影响;果实的山梨醇含量并没有表现出显著差异,蔗糖、葡萄糖、果糖含量明显降低。黄白袋HB的总糖含量相对较高,较HB对照的低6.36%。5种纸袋对果实苹果酸、奎尼酸、总酸的影响较大,而对柠檬酸含量的影响并不大。与对照相比,黄白袋HB、复合黑蜡袋FL的处理果实毒死蜱残留量低37.37%、55.55%。其中,复合黑蜡袋FL与黄白袋HB相比,果实毒死蜱残留量低29.03%,套三层纸袋的果实毒死蜱残留量降低程度好于双层袋。  相似文献   

20.
苹果籽油脂肪酸组成分析初报   总被引:5,自引:1,他引:5  
采用气相色谱法对苹果籽油的脂肪酸组成进行了分析 ,结果共检出了 5种脂肪酸 ,其相对含量分别是棕榈酸 7.0 9%,硬脂酸 2 .37%,油酸 39.6 9%,亚油酸 4 9.6 4 %,花生酸 0 .91%。同时 ,对苹果籽的一些物理特性的分析结果作了报道  相似文献   

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