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CpG序列对副伤寒疫苗免疫小鼠应答反应的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
研究了CpG序列作为分子免疫增强剂，对常规副伤寒疫苗免疫小鼠后，小鼠体液和细胞免疫反应的变化情况。试验结果显示，CpG序列作为免疫增强剂，可以使免疫小鼠的总IgG含量、血清特异性抗体效价、淋巴细胞IL—2的诱生活性和脾淋巴细胞的增殖反应有明显的提高。结果表明，CpG序列能显著增强免疫动物对常规疫苗的免疫应答反应水平，可以作为提高疫苗免疫效果的有效途径。 相似文献
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猪瘟疫苗（兔化弱毒苗，细胞培养苗及二联、三联酋）的应用，对预防和控制猪瘟的发生与流行收到了良好的效果．但由于部分防疫人员对其用法、用量、免疫期、保存期等缺乏了解，导致年年注射疫苗，年年有猪瘟发生．1防疫失误原因1．1对潜伏期或疑似病猪缺乏诊断，造成接种失误或不能产生免疫应答，或激发疫病发生．1．2稀释疫苗未用灭菌生理盐水（二、三联苗用指定的铝胶盐水），而任意用冷开水或其它水稀释，以致疫苗不易吸收及效价降低．1．3用量不够，只在注射器里调至1ml，未考虑注射中的泪耗，注进猪体的剂量不够，不能达到足够的抗原刺… 相似文献
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为分析CpG基序寡聚脱氧核苷酸（CpG DNA）对H9亚型禽流感病毒（AIV-H9）灭活疫苗的免疫增强作用，利用商品化的含有CpG DNA的重组质粒作为AIV-H9灭活抗原的免疫佐剂，经肌内注射1、7、21日龄的SPF鸡，通过检测鸡血清中HI抗体和外周血淋巴细胞CD4、CD8基因相对表达量，分析CpG DNA重组质粒对不同日龄SPF雏鸡首次免疫AIV-H9灭活疫苗免疫效果的影响。结果显示：1、7和21日龄SPF鸡首免后，CpG DNA免疫增强剂添加组的HI抗体滴度明显高于未添加组（P≤0.05），HI抗体峰值滴度升高了近2log2滴度，差异极显著（P≤0.01），且上升速度更快；CpG DNA免疫增强剂添加组，在21日龄免疫时的免疫效果明显优于1日龄和7日龄免疫组，表现为HI抗体上升速度更快，峰值更高，离散度更小；首免3周后，7日龄和21日龄SPF鸡CpG DNA免疫增强剂添加组的CD4、CD8基因相对表达量均高于同日龄未添加组，且明显高于1日龄SPF鸡组（P≤0.01）。结果表明，CpG DNA 能显著增强鸡对AIV-H9灭活疫苗的特异性体液免疫反应，可以作为高效的免疫增强剂，尤其在21日龄使用时免疫效果更好。本研究为CpG DNA重组质粒在禽流感疫苗上的联合应用以及研制新型复合佐剂疫苗提供了依据。 相似文献
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氧氟沙星脂质体的制备及其抑菌实验的研究 总被引：3，自引：1，他引：2
为了研究高度靶向性和严格选择性的新型抗感染药物，本文采用操作简单的二次乳化法实验制备了氧氟沙星（OFL）脂质体，紫外分光光度法检测了OFL含量及包裹率，并观察了OFL脂质体对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的体外抑菌实验和OFL脂质体对人工感染大肠杆菌小鼠的体内抑菌实验。结果表明，该法制得的脂质体包裹率平均为20.8%，粒径平均为3－5μm；脂质体和游离药物相比，对耐OFL大肠杆菌和敏感大鼠杆菌的MIC值均有所提高，是游离药物的2倍。OFL脂质体对实验感染小鼠的体内抑菌作用明显优于同等剂量的游离OFL。 相似文献
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1兔常用疫苗
兔的疫苗可分为单苗和联苗。兔常用的单苗有兔瘟灭活疫苗、巴氏杆菌灭活菌疫苗、波氏杆菌灭活菌疫苗、魏氏梭菌（A型）氢氧化铝灭活菌疫苗、伪结核灭活菌疫苗、大肠杆菌多价灭活菌疫苗和沙门氏杆菌病灭活菌疫苗等。兔常用的二联疫苗有瘟-魏二联疫苗、巴-魏二联疫苗、瘟-巴二联疫苗、呼吸道病二联疫苗等。兔常用的三联疫苗有兔瘟-巴氏-魏氏三联疫苗和兔瘟-大肠-魏氏三联疫苗等。 相似文献
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CpG ODN对猪繁殖障碍与呼吸道综合征疫苗免疫影响的研究 总被引：4，自引：1，他引：4
以猪繁殖障碍与呼吸道综合征（蓝耳病．PRRS）病毒为模式病毒．以CpG ODN联合猪繁殖障碍与呼吸道综合征灭活疫苗免疫仔猪．通过ELISA法检测猪血清中抗猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒抗体水平，并用MTT法检测猪淋巴细胞白介素-2（IL-2）诱生活性以及淋巴细胞增殖指数（SI）．试验结果表明：CpG ODN能显著提高仔猪的特异性抗体滴度、淋巴细胞IL-2诱生活性以及淋巴细胞增殖反直．证明CpG ODN能显著增强猪对常规灭活病毒疫苗的免疫应答能力。 相似文献
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CpG ODN对鸡新城疫LaSota活疫苗的免疫增强效应 总被引：4，自引：0，他引：4
将3种不同的未甲基化CpGODN分别与新城疫LaSota活疫苗混合后，经滴鼻和点眼免疫鸡，通过检测鸡血清中HI抗体、外周血T淋巴细胞增殖活性、诱导巨噬细胞分泌NO含量，以及刺激外周血淋巴细胞表达IFN-γ、IL-6与IL-1β mRNA量，分析各CpGODN对新城疫LaSota活疫苗免疫效果的影响。结果表明，经2次免疫后，含GTCGTT核心基序的CpG ODN1组，鸡血清平均HI抗体效价最高达8．2log2、淋巴细胞刺激指数达9．836、NO分泌量达35．833μmol／L，分别比疫苗单独免疫组高出2个滴度（P〈0．05）、4．4（P〈0．01）、27．6μmol／L（P〈0．01）；含GACGTT核心基序的CpG ODN2组增强作用不明显．与疫苗单独免疫组无差异；而CpGODN3的免疫刺激活性由于受其侧翼序列的影响，作用明显减弱甚至丧失。对细胞因子的影响，CpGODN3组IFN-γ mRNA表达量稍高于CpG ODN1组，而其余细胞因子均以CpG ODN1组表达水平最高（P〈0．05）。由此证明CpG ODN1能显著增强鸡对新城疫LaSota活疫苗的体液和细胞免疫反应，可以作为高效的免疫增强剂。 相似文献
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CpG DNA重组质粒对猪O型口蹄疫病毒抗原的免疫佐剂效应 总被引：1，自引：0，他引：1
作者应用含CpG基序序列的重组质粒(即CpG DNA)作为免疫佐剂,评价其对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗的免疫增强效果.结果表明:CpG DNA重组质粒与猪口蹄疫灭活病毒抗原疫苗配伍免疫小鼠,CpG DNA重组质粒对小鼠具有较强的免疫佐剂效应,能促进口蹄疫病毒抗原诱导产生较高水平的特异性抗体,其抗体滴度是空载体疫苗对照的2倍.CpG DNA重组质粒与商品化猪口蹄疫灭活疫苗配伍免疫试验猪,其增强抗原诱导的特异性抗体滴度最高可达标准疫苗的4倍以上,也显著高于空载体疫苗对照;与病毒纯化抗原配伍免疫动物,攻毒后其免疫保护效力的PD50高达13.00,远高于标准疫苗对照(PD50> 4.69).在CpG DNA重组质粒剂量选择试验中,含低剂量的CpG DNA疫苗(50、200μg·头份-1)都比高剂量组(500 μg·头份-1)诱导的抗体滴度高,其中50和200μg·头份-1的CpG DNA剂量,在接种后14～32 d诱导的抗体滴度高达1:1 500,是标准疫苗的4～5倍,而500μg·头份-1剂量诱导的抗体仅是标准疫苗的2倍,说明CpG DNA重组质粒在低剂量时即可发挥强烈的佐剂效应.研究表明CpG DNA对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗有较强的免疫佐剂效应,且使用剂量低,应用前景广阔. 相似文献
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为探究不同类型CpG基序对细粒棘球蚴（Echinococus granulosus）Eg95抗原的免疫增强作用,将pET-32a-3Eg95重组大肠杆菌,经IPTG诱导表达,亲和层析纯化重组蛋白pET-32a-3Eg95。将重组蛋白分别与常规佐剂Quli-A、pUC18-CpG和CpG ODN混合制备基因工程亚单位疫苗样品,免疫小鼠。通过间接ELISA方法检测抗体水平,通过实时荧光定量PCR方法测定体外刺激试验后细胞因子的相对表达量,检测不同佐剂在体液免疫和细胞免疫方面对Eg95抗原免疫效果的增强作用。结果显示,诱导表达重组蛋白的大小约为56 ku,与理论值相符,用羊细粒棘球蚴阳性血清检测有特异性条带;pUC18-CpG组和CpG ODN组小鼠免疫后14、28、42 d的抗体平均水平（D450 nm）分别为3.10、3.03、3.22和2.98、3.12、3.27,与Quli-A组抗体平均水平相比均差异显著（P<0.05）;CpG ODN组血清中抗体平均水平略高于pUC18-CpG组,但差异不显著（P>0.05）。重组蛋白刺激后pUC18-CpG组与CpG ODN组IFN-β、IFN-γ和TNF-α的相对表达量分别为6.88、2.35、6.28和5.03、2.85、7.07,与Quli-A组相比差异均显著（P<0.05）。因此相对于常规佐剂Quli-A,pUC18-CpG和CpG ODN在体液免疫和细胞免疫方面对Eg95抗原都有显著的免疫增强作用,CpG ODN的免疫增强作用略优于pUC18-CpG,二者均可作为免疫佐剂,增强现有包虫病基因工程疫苗抗原的免疫效果。 相似文献
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伊维菌素脂质体的急性毒性试验 总被引：2，自引：0，他引：2
为了解伊维菌素脂质体的毒性，将伊维菌素脂质体给试验小鼠按一定浓度一次腹腔注射，连续观察7-14d，用改良寇氏法计算半数致死量（LD50）及95％的可信限，并在同一方法和条件下与伊维菌素注射剂相比较。结果表明，伊维菌素脂质体（脂质体组）的LD50（92．1516mg／kg．BW）显著高于伊维菌素注射剂（原药组）的LD50（24．2493mg／kg．BW），是原药组的3．80倍。证明伊维菌素脂质体的毒性更低，刺激性更小，安全范围更广。 相似文献
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鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征和禽流感（H9亚型）四种疾病是严重威胁蛋鸡、肉种鸡和蛋种鸡的重要疾病。由于以往市售疫苗没有相应合适的联苗（即使有二联或者三联苗，但因疫苗复合配置和浓缩技术不过关而效果不佳），各养殖场／户多采用单苗分别接种进行预防，或者高价购买国外进口疫苗，致使免疫程序复杂、 相似文献
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注射pGRF基因质粒对由脂多糖或三联疫苗诱导的免疫应激仔猪生长和免疫指标的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
为研究猪生长激素释放因子(pGRF)基因质粒对由脂多糖或三联苗诱导的免疫应激仔猪生长性能和免疫指标的影响,选用36头(28±2)d断奶的杜长大(Duroc×Landrace×Yorkshire,DLY)三元杂交仔猪,按体重相近、阎公猪和母猪各1/2的原则,分为对照组(不注射pGRF基因质粒、大肠杆菌LPS或三联苗)、注射pGRF组、注射脂多糖(LPS)组、注射pGRF+LPS组、注射三联疫苗组(猪瘟兔化弱毒,猪丹毒杆菌G4T10弱毒,猪源多杀性巴氏杆菌E0630弱毒)和注射pGRF+三联疫苗6个处理,每个处理6个重复,每个重复1头猪.试验开始时,pGRF组、pGRF+LPS组、pGRF+三联疫苗组的仔猪大腿肌肉分别注射1.0 mg pGRF基因质粒;试验的第11天给LPS组、pGRF+LPS组仔猪注射100 ug/kg LPS生理盐水溶液,三联疫苗组以及pGRF+三联疫苗组注射2头份三联苗生理盐水溶液,对照组和pGRF组注射生理盐水;第18天时按照第11天的操作重复进行.结果表明,在2次注射LPS或三联苗后,即10～17 d和17～24 d阶段,pGRF+LPS组仔猪的ADG显著(10～17 d,P<0.05)或极显著(17～24 d,P<0.01)高于LPS组,F/G均显著低于LPS组(P<0.05);pGRF+疫苗组仔猪ADG均显著高于疫苗组(P<0.05),F/G显著低于疫苗组(P<0.05).在第11天和第18天,pGRF+LPS组仔猪的血清细胞因子(IL-1、IL-6)水平均极显著低于LPS组(P<0.01),类胰岛素生长因子(IGF-I)和IgG浓度均极显著高于LPS组(P<0.01);pGRF+疫苗组仔猪的血清IL-1和IL-6浓度显著低于疫苗组(P<0.05),lgG浓度极显著(11 d,P<0.01)或显著(18 d,P<0.05)高于疫苗组,IGF-I浓度显著(11 d,P<0.05)或极显著(18 d,P<0.01)高于疫苗组.证明pGRF基因质粒能缓解由LPS或三联疫苗免疫应激引起的仔猪生长抑制;能够抑制由脂多糖或三联苗诱导的血清IL-1和IL-6浓度的上升和血清IGF-I浓度的降低,同时能提高免疫应激仔猪的血清IgG浓度. 相似文献
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犬细小病毒编码的VP2蛋白是该病毒主要抗原蛋白。研究证实由VP2基因制备的DNA疫苗能够刺激机体产生免疫应答反应。为提高VP2DNA疫苗的免疫原性,本研究在小鼠体内尝试了利用犬白细胞介素2（cIL-2）基因增强VP2DNA疫苗免疫应答的研究。通过RT-PCR方法从犬脾淋巴细胞中分别扩增含终止密码子和不合终止密码子的cIL-2cDNA基因,然后将基因插入到真核表达载体pcDNA3．1中,分别构建成非融合的和与Myc／His融合的clL-2基因真核分泌型表达载体,pcDNA-cIL-2和pcDNA-cIL-2／MH。将pcDNA-oIL-2／MH表达栽体通过磷酸钙方法转染HEK293T细胞进行瞬时表达,以确定构建的表达栽体能否介导cIL-2在真核细胞中进行分泌表达。然后用VP2表达载体（pcDNA-CD5sp-VP2,本室构建）单注射和VP2／IL-2表达载体共注射对小鼠进行免疫（用pcD-NA3．1栽体作为阴性对照）。免疫后通过ELISA方法检测免疫后不同时期小鼠血清VP2的抗体水平,并通过细胞增殖试验检测免疫后小鼠脾脏淋巴细胞的增殖反应,用ELISA方法测定小鼠淋巴细胞γ干扰素的表达水平。试验结果表明,扩增的小鼠cIL-2基因与GenBank的参考序列一致,构建的cIL-2表达载体能够介导重组cIL-2在HEK293T细胞中进行分泌表达。免疫结果显示,利用cIL-2／VP2表达载体共免疫小鼠,免疫后35d血清中VP2的抗体水平达到1：5120,明显高于VP2表达载体单免疫组（P〈0．01）。淋巴细胞增殖试验表明,2组免疫小鼠的淋巴细胞刺激指数均明显高于阴性对照组（P〈0．01）,共免疫组的刺激指数又明显高于单免疫组（P〈0．05）。共免疫小鼠淋巴细胞7干扰素的表达水平明显高于单免疫组和阴性对照组（P〈0．01）。由此可见,cIL-2表达载体可明显提高CPVVP2基因疫苗的免疫应答水平。 相似文献
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猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联灭活苗(以下简称猪三联)是防疫工作中常用的疫苗，一般情况下注射后反应轻微，有严重过敏反应者并不多见。笔者在工作中曾遇到一起因注射猪三联引发严重过敏反应的病例。现介绍如下： 相似文献
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为了探讨CpG寡核苷酸（CpG oligonucleotide,CpG ODN）对鸡新城疫疫苗免疫效力的影响,将CpG2007与鸡淋巴细胞共孵育,测定淋巴细胞增殖率,结果发现CpG2007对鸡淋巴细胞具有显著的刺激活性。将CpG2007与不同浓度的新城疫抗原混合,制备灭活疫苗,免疫健康雏鸡。分别于免疫后不同时间采血,测定抗体效价和细胞因子表达量,并进行攻毒保护试验。结果发现,添加CpG ODN佐剂的试验组均比对应相同抗原剂量的免疫对照组的抗体水平高,产生抗体速度快;抗原剂量降低10倍的佐剂试验组与高抗原剂量免疫对照组抗体水平和攻毒保护率均相当,表明CpG ODN能显著增强新城疫疫苗的免疫效力,能促进机体产生更强烈的免疫应答,是有效的疫苗佐剂候选物质。 相似文献
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CpG ODN增强猪囊尾蚴病疫苗免疫反应的试验研究 总被引：5，自引：1，他引：5
依据CpG基序的生物学和免疫学特性，人工设计合成了硫代修饰的多种CpG ODN序列，通过兔、小鼠和猪体进行了与铝胶、206佐剂和蜂胶佐剂的配伍和比较试验，用ELISA法测定加单一佐剂或联合佐剂组疫苗诱导的抗猪囊尾蚴病的抗体含量(IgG或IgG2a)和效价，用MTT淋巴细胞转化试验法测定刺激指数，进一步证实了CpG基序的种类、数量和空间结构以及与其他佐剂联合对疫苗免疫反应的影响，CpG基序以1个TpC的5’端开始，紧接着3个GTCGTT基序，基序与基序之间由TpT或T分隔，在兔、小鼠和猪都能诱导机体产生强烈的免疫反应特别是细胞免疫反应。 相似文献