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免疫微球凝集试验技术及其对猪旋毛虫病的快速诊断研究 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究以旋毛虫可溶性抗原作诊断抗原,聚苯乙烯微球为抗原载体,通过碳化二亚胺反应把旋毛虫抗原共价偶联到聚苯乙烯载体微球上,制备了用于检测猪旋毛虫病血清抗体的免疫微球诊断试剂.从平板凝聚试验技术对117份实验感染旋毛虫病的猪、兔、大白鼠的血清抗体和疫区猪血清抗体进行了检测.试验结果,免疫微球凝集试验对实验感染旋毛虫病动物血清抗体检测的敏感性和特异性均为100%.在检测的敏感性上,免疫微球凝集试验比人工消化检查法高9.17%,比压片镜检法高25.26%.在阳性符合率上,与压片镜检相比为100%,与人工消化检查相比为97.25%.试验结果表明,免疫微球凝集试验技术对猪旋毛虫病是一简便、快速和可靠的诊断方法. 相似文献
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旋毛虫基因重组抗原快速ELISA诊断试剂盒的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
用旋毛虫基因重组抗原（TSRA）建立了诊断猪旋毛虫病的快速ELISA诊断试剂盒，用TSRA和旋毛虫肌幼虫排泄－分泌抗原（ES）分别对12份人工感染旋毛虫病猪血清进行快速ELISA检测，阳性率为100％。在猪旋行虫病发病区随机采集103份血清和肉样，分别用TSRA和ES作抗原对血清进行快速ELISA检测，结果显示，它们与肌肉消化法的诊断符合率分别为95．12％和96．3％，研究证明，用TSRA组装的诊断试剂盒具有良好的灵敏性，特异性和重复性。 相似文献
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为了猪圆环病毒2型（PCV2）抗体,本研究建立了快速、敏感的ELISA诊断方法。本研究应用原核表达的PCV2-Cap蛋白作为包被抗原,通过抗原最适包被浓度和兔抗猪IgG最佳稀释浓度的确定,待检血清稀释度的选择,阴阳性临界值的确定,然后进行特异性测定、重复性测定和符合率比较等,建立检测PCV2抗体的间接ELISA方法。结果显示,建立的间接ELISA方法只能检测出PCV2阳性血清;3次重复性试验的差异不显著;与韩国JBT公司的PCV2试剂盒的符合率达到了92.5%;对采集福建省内多个猪场204份血清样品进行检测,其阳性率达到了76.5%。实验表明,建立的检测PCV2抗体的间接ELISA方法具有特异性强、重复性和稳定性好的特点,可用于PCV2抗体的血清学诊断和流行病学调查。 相似文献
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[目的] 为了找出河南省猪瘟的流行病学规律,研究猪瘟强毒株感染情况,查实规模化猪场猪瘟免疫情况。[方法] 使用ELISA方法和革兰氏染色方法对301份病猪的样本进行猪瘟强毒抗原及细菌感染情况的检测,分析了猪瘟在河南省猪群的感染、流行范围情况及同细菌病的混合感染情况;对猪瘟阳性猪场采取综合防治措施并对采取措施后没有效果的猪场进行了蓝耳病和圆环病毒病的检测,确定混合感染情况。[结果] 猪瘟在河南省流行广泛;猪瘟病毒的平均检出率为26.25%;细菌感染占猪瘟病毒总阳性样本的25.31%;蓝耳病和圆环病毒病与猪瘟有不同程度的混合感染;综合性防治措施实施后对大部分猪厂效果明显;但对混合感染的猪群效果不好;[结论] 猪瘟与细菌、蓝耳病、圆环病毒病等混合感染是造成猪瘟难以根治的主要原因;综合防治措施的实施是净化猪瘟的重要手段。 相似文献
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为了检测猪血清中猪流行性腹泻病毒抗体水平,用纯化的猪流行性腹泻病毒N基因重组表达蛋白作为包被抗原,建立了检测猪流行性腹泻病毒抗体的间接ELISA方法。ELISA的最佳工作条件是:抗原包被浓度为0.5μg/m L,包被时间4℃过夜,5%脱脂乳的PBS封闭37℃2 h及4℃过夜。血清稀释度为1∶100;37℃作用45 min,辣根过氧化物酶标记兔抗猪Ig G稀释度为1∶10 000,37℃温育60 min,底物显色37℃15 min。抗体临界值为OD450nm≥0.30判为阳性,OD450nm≤0.27判为阴性,介于二者之间判为可疑。经重复性试验和交叉试验,结果表明,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。用已建立的ELISA方法检测临床血清样本184份,总阳性率为68.5%。 相似文献
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免疫胶体金技术及其应用研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
免疫胶体金技术是以胶体金自身显色结合抗原抗体特异性反应而达到检测目的免疫标记技术。该技术操作简便,特异性强,近年来与拉曼光谱、荧光光谱等技术结合,得到了迅猛的发展。本文介绍了免疫胶体金技术的层析法、比浊法、斑点渗滤法,与新型技术结合等研究现状及其在药物残留等方面的应用及发展趋势。 相似文献
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为了建立红甜菜中甜菜碱的定量分析方法，采用改进的QuEChERS方法结合液相色谱串联质谱技术，样品经快速溶剂萃取仪以甲醇为溶剂提取，经固相萃取柱净化，采用正向亲水性液相色谱柱(Hilic)，梯度洗脱，通过质谱的多反应监测(multiple reactions monitoring，MRM)正离子模式扫描进行测定，外标法定量。结果表明：甜菜碱在本方法的线性范围为0.05~5 ug/mL，添加水平为4~16 mg/g时，回收率为87.7%~95.7%，方法RSD值为3.69%~8.4%，检出限为0.01 mg/L，定量限为0.04 mg/L，与传统的分析方法相比，具有检出限低、灵敏度高的优点，完全可以适用于甜菜中甜菜碱的分析。 相似文献
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旋毛虫肌幼虫总RNA提取方法研究初报 总被引：1，自引：0，他引：1
【研究目的】探索高质量的旋毛虫(Trichinella spiralis)肌幼虫总RNA提取方法；【方法】利用Trizol试剂采用三种方法提取旋毛虫肌幼虫总RNA。(1)液氮预冷的研钵中研磨新鲜虫体至样品快融化时，加入适量的Trizol，继续研磨至液状后转移到离心管中；(2)A将新分离的虫体放到-20℃预冷的研钵中，在研磨过程中不断地添加液氮以保持虫体冷冻，之后对冷冻状的样品粉末继续操作；B把液氮冻存的新鲜旋毛虫肌幼虫取出，放到-20℃预冷的研钵中重复A的操作；(3)新鲜虫体放入匀浆器中，加适量Trizol，在冰水混合物中研磨20分钟。虫体破碎后按Trizol说明书继续抽提。最后通过凝胶电泳和紫外吸收光度值检测。【结果】用液氮和Trizol结合的方法，使用新鲜样品提取旋毛虫肌幼虫总RNA，在纯度和得率上都较为理想；【结论】使用新鲜的样品，且液氮与裂解液结合，是获得高质量RNA的可行方法。 相似文献
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猪肺炎支原体气溶胶富集检测技术的初步研究 总被引：1，自引：1，他引：0
为了建立一个简单易行的猪肺炎支原体气溶胶富集和检测技术,结合液体冲击式采样器和过滤式采样器的原理,自行设计一个气溶胶双重富集装置,并在密闭环境下采集人工制备的猪肺炎支原体气溶胶,荧光定量PCR检测以确定该装置的采集效率。再通过收集不同猪群中的气溶胶进行检测以确定该装置临床应用的可行性。首先,收集人工感染Mhp阴性仔猪后不同时间猪舍内的气溶胶;其次,收集1个猪支原体肺炎发病猪场和1个阳性未发病猪场的产房、保育舍和育肥舍共11个猪舍的气溶胶,荧光定量PCR或套式PCR检测所收集的气溶胶。结果显示：实验室模拟采样的采集效率达到(37.04±6.43)%,人工感染猪肺炎支原体后7天即在饲养房间的气溶胶中检到猪肺炎支原体;2个猪场共11个不同猪舍气溶胶中猪肺炎支原体检测结果均为阳性,检出率100%。成功建立了一个简单易行的猪场猪肺炎支原体气溶胶富集及检测技术。 相似文献
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龙眼末批花坐果技术研究 总被引：1，自引：1，他引：0
为了给调节龙眼产期提供理论依据,探索利用龙眼末批花结果技术。以石硖龙眼为试材,于龙眼花朵零星开放时叶面喷施宇花灵4号,观测龙眼花朵（蕾）脱落率、末批花雌花比率、坐果率、成熟时间、果实单果重及可溶性固形物变化曲线等。结果表明,试验树花朵（蕾）脱落率衡定在60%~73%,花蕾脱落规律为大花蕾脱落而小花蕾（末批花）不易脱落;末批花发育成熟后雌花比率高,最高达78%;2009—2012年4年试验结果：试验树单株产量分别为42.77、42.99、58.62、66.20 kg,果实成熟期比对照分别延后18、17、14、16天。利用龙眼末批花结果技术可延迟龙眼成熟期14~18天,有效调节龙眼鲜果供应期,对龙眼产量、品质无明显差异,同时,由于末批花开花期气候较稳定,坐果率高,产量稳定。 相似文献
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内蒙古牛病毒性腹泻病毒血清学调查 总被引：1，自引：1，他引：0
为了解内蒙古自治区集约化养牛场病毒性腹泻的感染情况。用致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒毒株制备中和抗原,通过中和实验对采自乌兰浩特、巴彦淖尔和呼和浩特地区6个集约化奶牛场的509份血清进行了牛病毒性腹泻病毒抗体检测。结果表明：共检出阳性血清297份,6个牛场的牛病毒性腹泻病毒血清阳性率分别为55.10%、38.80%、45.50%、50.00%、77.80%、33.33%;乌兰浩特、巴彦淖尔、呼和浩特这3个地区的平均阳性率分别为77.80%、48.70%、33.33%,总血清阳性率为58.35%。说明内蒙古地区存在牛病毒性腹泻病毒的感染,应采取相应的措施净化牛场。 相似文献
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为明确棚栽嫁接西瓜地耕作层土壤黄瓜绿斑驳花叶病毒病的带毒情况,以棚栽嫁接西瓜黄瓜绿斑驳花叶病毒病病株根部为中心按向边膜和相邻植株2 个不同方向分别采集植株根部以及距植株根部40、80 cm的表土(0~5 cm)、深土（与表土取样点相对应,距表土23~27 cm深）,及取病地不同耕作方式后的土壤,进行双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELLSA)检测以确定土壤的带毒性。结果发现：根围土壤带毒率检测中,健康株与隐症带毒株均不带毒,显症病株中,根部、边膜方向距根部40 cm和80 cm、相邻植株方向距根部40 cm和80 cm,5 个取样点的带毒率表土依次为100%、80%、70%、40%、20%,深土依次为80%、50%、50%、40%、30%;病地不同耕作方式后的土壤带毒检测中,西瓜—水稻—芋头未检测到病毒,西瓜2 年连作与3 年连作带毒率均高于90%,表土自然消解1 年、西瓜—水稻—西瓜、西瓜—蔬菜—西瓜、西瓜—蔬菜—春玉米、西瓜—蔬菜—水稻、西瓜—甘蔗—水稻的带毒率则依次为50%、42.86%、35%、30%、24%、20%。说明病株表土带毒率高于深土,离病株根部越近,或者病株藤蔓覆盖越茂盛,土壤带毒率越高;轮作对病地土壤中的病毒有降解作用。 相似文献