共查询到19条相似文献，搜索用时 160 毫秒
1.
2.
《中国畜牧杂志》2020,(9)
为探究不同冷冻精液保存时间对荷斯坦奶牛精液品质及其受精能力的影响,选取北京奶牛中心冻存1年(A冻精)、冻存3年(B冻精)及冻存13年(C冻精)的3批精液进行研究。利用精子分析仪分析精子运动能力,台盼蓝染色鉴定精子活率,检测精子顶体完整率、线粒体功能以及DNA完整性,利用体外受精技术检测卵裂率和囊胚率,Realtime PCR检测弱精子症相关蛋白基因表达水平。结果显示:3批精液的精子活力和直线性随冷冻时间延长逐渐下降,精子活率也显著下降;3批冷冻精液的卵裂率和囊胚率随冷冻时间延长显著下降;精子线粒体功能分析结果表明,A精液线粒体膜通道孔相对荧光单位(RFU)值和线粒体活性光密度(OD)值最高(P0.05),C精液最低(P0.05);精子DNA完整性检测结果显示,随冷冻时间延长,精子拖尾率显著增加;弱精子症相关蛋白的基因表达趋势并未显现出与体外受精结果相一致的趋势。研究证明,随着冷冻保存时间的延长,精子活力、精子线粒体功能以及精子DNA完整性逐渐下降,最终导致精子受精能力下降。 相似文献
3.
本试验对荷斯坦种公牛精液经稀释、分装、平衡后,分成两份,分别采用两种冷冻方法冷冻,将解冻后的精液进行活力、畸形率和顶体完整率等指标检测。结果表明,两种方法冷冻后各项指标差异显著(P0.05),且以方法1进行精液冷冻效果理想,有利于牛细管冻精的长期保存。 相似文献
4.
为研究获能液中添加咖啡因和亚牛磺酸对牛精子功能的影响,本研究将荷斯坦牛冻精解冻后分别添加在含不同浓度咖啡因(0、2.5、5.0、7.5mmol/L)或亚牛磺酸(0、5、10、20、40μmol/L)的获能处理液中,且每个处理组加入约200μL的精液,在CO_2培养箱里经上游处理45min,以评估咖啡因和亚牛磺酸对牛精子活力、顶体及质膜完整性的影响,进而探讨在获能液中亚牛磺酸替代咖啡因的效果。结果显示,添加2.5、5.0mmol/L咖啡因组经上游法获能处理后的牛精子活力和顶体完整率均显著高于对照组(P0.05),且2.5mmol/L咖啡因组精子活力最高;添加10、20μmol/L亚牛磺酸组经上游法获能处理后的牛精子活力、顶体完整率和质膜完整率均显著高于对照组(P0.05),且20μmol/L亚牛磺酸组的精子功能参数值最高;将筛选的最佳浓度2.5 mmol/L咖啡因和20μmol/L亚牛磺酸采用同样的方法处理,发现20μmol/L亚牛磺酸组的精子顶体完整率和质膜完整率均显著高于2.5mmol/L咖啡因组和对照组(P0.05)。因此,20μmol/L亚牛磺酸可以替代2.5mmol/L咖啡因用于体外受精体系中的精子获能处理,有助于提高精子功能参数。 相似文献
5.
维生素C对荷斯坦公牛X精子冻后品质的影响 总被引：3，自引：1，他引：2
试验旨在研究维生素C（VC）对荷斯坦公牛性控精液冻后品质的的影响。在精液稀释液中分别添加0,2.0,4.0,6.0,8.0 mg/mL的VC进行试验。将装有X精子的细管冻精解冻（37.5 ℃,30 s）后分析0～3 h精子活率及0～4 h质膜完整率和顶体完整率的变化情况。结果表明,当添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h精子活率与对照无差异显著,解冻后1、2、3 h精子活率与对照组差异显著（P<0.05）。当VC的添加量为4.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子质膜完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1 h与对照相比差异不显著（P>0.05）,但数值依然高于对照组。解冻后存放2、3、4 h与对照组相比差异显著。添加量为6.0 mg/mL时,解冻后0 h时X精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),解冻后1、3 h精子顶体完整率与对照组相比差异显著（P<0.05）,2、4 h与对照相比差异不显著（P>0.05）,但顶体完整率高于对照组。在冷冻精液稀释液中VC的适宜添加量为4～6 mg/mL,此浓度下可有效提高荷斯坦公牛X精子解冻后活率、质膜完整率及顶体完整率。 相似文献
6.
为研究获能液中添加咖啡因和亚牛磺酸对牛精子功能的影响,本研究将荷斯坦牛冻精解冻后分别添加在含不同浓度咖啡因（0、2.5、5.0、7.5 mmol/L）或亚牛磺酸（0、5、10、20、40 μmol/L）的获能处理液中,且每个处理组加入约200 μL的精液,在CO2培养箱里经上游处理45 min,以评估咖啡因和亚牛磺酸对牛精子活力、顶体及质膜完整性的影响,进而探讨在获能液中亚牛磺酸替代咖啡因的效果。结果显示,添加2.5、5.0 mmol/L咖啡因组经上游法获能处理后的牛精子活力和顶体完整率均显著高于对照组（P<0.05）,且2.5 mmol/L咖啡因组精子活力最高;添加10、20 μmol/L亚牛磺酸组经上游法获能处理后的牛精子活力、顶体完整率和质膜完整率均显著高于对照组（P<0.05）,且20 μmol/L亚牛磺酸组的精子功能参数值最高;将筛选的最佳浓度2.5 mmol/L咖啡因和20 μmol/L亚牛磺酸采用同样的方法处理,发现20 μmol/L亚牛磺酸组的精子顶体完整率和质膜完整率均显著高于2.5 mmol/L咖啡因组和对照组（P<0.05）。因此,20 μmol/L亚牛磺酸可以替代2.5 mmol/L咖啡因用于体外受精体系中的精子获能处理,有助于提高精子功能参数。 相似文献
7.
[目的]研究牛活体采卵-体外受精（ovum pick-up and in vitro fertilization,OPU/IVF）体系,建立高效的牛体外胚胎生产系统。[方法]以从屠宰场采集的健康牛新鲜卵巢为试验材料,进行卵母细胞体外成熟、体外受精、体外胚胎培养相关条件的摸索,重点考查体外胚胎培养液中添加瘦素（leptin）对囊胚率的影响。选取13～15月龄健康荷斯坦奶牛及和牛各10头作为供体,进行活体采卵、卵母细胞体外成熟、体外胚胎生产,记录可用卵数及可用囊胚数,统计卵裂率、囊胚率;2个品种牛的体外冷冻胚胎解冻后,以荷斯坦奶牛为受体进行胚胎移植,移植后45 d统计妊娠率。[结果]添加30 U/mL的leptin可以显著（P<0.05）提高屠宰场来源牛体外胚胎的囊胚率。随机选择供体牛活体采卵,平均每头荷斯坦奶牛获得可用卵7.5枚,平均每头和牛获得可用卵8.1枚;荷斯坦奶牛及和牛的卵裂率分别为84.00%、82.71%,二者差异不显著（P>0.05）。体外培养条件下,平均每头荷斯坦奶牛获得可用囊胚4.3枚,平均每头和牛获得可用囊胚3.7枚;荷斯坦奶牛的囊胚率（57.33%）显著... 相似文献
8.
本试验采用PCR—RFLP方法分析了GnRH基因外显子2和LHR基因内含子9在144头中国荷斯坦牛和79头河南地方肉牛品种中的多态性,利用最小二乘法分析多态位点不同基因型与精液品质性状的关系。研究结果表明,2～3岁荷斯坦牛的鲜精活力显著高于4岁以上的牛,而畸形率显著低于7岁以上的牛。对2～4岁荷斯坦牛不同精液品质性状的简单相关分析表明,畸形率与顶体完整率和冻精活力呈显著的负相关（相关系数r分别为-0．736和-0．500）。不同基因型与精液品质性状的关联分析结果表明,144头中国荷斯坦牛所研究位点不同基因型对精液品质性状没有显著影响。而河南地方肉牛GnRH基因外显子2的A883G位点GG基因型的精子密度显著低于AA和AG基因型．LHR基因G51656T位点的TT基因型精子密度显著高于GT基因型,未检测到GG基因型。并且发现随着年龄的增长,种公牛的精液品质逐渐变差。GnRH和LHR基因可作为影u向肉牛精液品质性状的候选基因。 相似文献
9.
本研究利用流式细胞仪分选比利时蓝白花牛X、Y精子并制备冷冻精液。选择平均年龄4岁的健康比利时蓝白花种公牛12头，假阴道法采集精液送至实验室分选，经流式细胞仪分离、冻存、解冻后精液重分析和品质鉴定。X、Y冻精（93.4%和91.1%）性别比例显著高于常规冻精（50%）；分选后精液冻后存活率、活力和顶体完整率与常规冻精差异不显著。本研究结果显示，分选前控制公牛的精液品质（活力≥70%，畸形率≤18%）可以明显改善分选效果；分选后精子纯度和冻后活力满足低剂量人工授精要求（纯度>90%，活力>30%），精子分选对比利时蓝白花牛产业的发展具有重要意义。 相似文献
10.
11.
Janaina T Carreira Gisele Z Mingoti Lucia H Rodrigues Carlos Silva Silvia HV Perri Marion B Koivisto 《Acta veterinaria Scandinavica》2012,54(1):1
Background
Proximal cytoplasmic droplets (PCDs), a remnant of germ cell cytoplasm, are common non-specific morphological defects in bovine semen. This study evaluated the effect of higher percentages of PCDs on the quality of frozen-thawed bovine semen, embryo production and early embryo development.Methods
Three ejaculates from each of five (group 1: PCD ≤ 1%, control) and eight adult Bos indicus bulls (group 2: PCD ≥ 24%) were analysed. Semen samples were examined for: post-thaw motility, vigour of movement, concentration, sperm morphology, slow thermoresistance test (STT), membrane integrity, acrosome status, mitochondrial function using fluorescent probes association (FITC-PSA, PI and JC-1) and sperm chromatin integrity using acridine orange assay. Two bulls from group 2, with 28.5% and 48.5% PCD, respectively, and three bulls from the control group, each with 0% PCD, were selected for IVF (in vitro fertilisation).Results
Semen analyses revealed a significant correlation (P < 0.01) between increased rates of PCD and sperm quality traits. Nevertheless, no differences were observed in sperm motility and vigour either before or after the STT or in the percentage of intact acrosomes (analysed by differential interference contrast microscopy (DIC) after STT), but membrane integrity, acrosome status (evaluated with FITC-PSA staining method after thawing) and mitochondrial function were reduced, when compared with group 1 (P < 0.05). The higher incidence of PCD was positively correlated to chromatin damage, especially after three hours of incubation at 37°C. IVF showed similar results for bull C2 (group 1, control) and bull P2 (group 2, group with higher PCDs).Conclusion
Higher PCD levels influenced spermatozoa quality traits. IVF and embryo development data showed that cleavage, blastocyst formation and blastocyst hatching may have been influenced by the interaction of morphology traits and individual bull effects. 相似文献12.
本试验旨在探索用谷氨酰胺（Gln）替代部分甘油对冻融猪精子体外获能和受精能力的影响，试验分为6组：3%甘油对照组和5个处理组（Ⅰ~Ⅴ组：2%甘油＋谷氨酰胺（0、20、40、80和100 mmol/L））。对冻融松辽黑猪精子的精子活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体膜电位、鱼精蛋白水平、获能及体外受精等指标进行了检测。结果显示，用谷氨酰胺替代部分甘油均对冻融精子质量有一定的改善作用，改善的程度受谷氨酰胺浓度的影响。与对照组相比，Ⅰ组精子的质量参数均显著下降（P<0.05）；与Ⅰ组相比，Ⅱ组精子活力、顶体完整性和活率显著提高（P<0.05），Ⅲ组精子线粒体膜电位显著提高（P<0.05），Ⅴ组精子活力、质膜完整性、顶体完整性、活率和线粒体膜电位均显著提高（P<0.05）。说明用谷氨酰胺替代部分甘油对精子质量具有很大的影响，且当谷氨酰胺为100 mmol/L时可得到更高质量的精子，因此，后续试验使用浓度为100 mmol/L的谷氨酰胺进行研究。与对照组相比，2%甘油＋100 mmol/L谷氨酰胺处理组精子鱼精蛋白缺失率显著下降（P<0.05），精子获能无显著差异（P>0.05），但胚胎卵裂率显著提高（P<0.05）。综上所述，谷氨酰胺可作为一种新型冷冻保护剂替代部分甘油来提高猪精液的质量，并降低甘油对猪精液的毒性作用，为猪精液的冷冻保存及商业化生产提供技术支撑。 相似文献
13.
A.M.H. Abdel Dayem Karima Gh. M. Mahmoud M.F. Nawito M.M. Ayoub T.H. Scholkamy 《Livestock Science》2009,122(2-3):193-198
This study aimed to develop a system of in vitro assays based on zona pellucida binding and in vitro fertilization for predicting male fertility in buffalo bulls. Frozen–thawed semen from nine bulls was tested for motility, viability index, acrosomal integrity, zona pellucida binding and in vitro fertilizing ability. Differences in post-thaw sperm motility between bulls were not significant. Differences in viability indices and percentage of spermatozoa with detached acrosome between bulls was highly significant (P < 0.001). Sperm attached per ovum, fertilization rates and polyspermy percentages varied significantly (P < 0.01) among buffalo bulls. A significant (P < 0.01) positive correlation coefficient of 0.69 was evident between normal acrosome and sperm attached per ovum, while between normal acrosome and fertilization efficiency it was 0.72. Sperm from different buffalo bulls differs in their ability to bind and fertilize oocytes. This study provides a basis to predict and maximize the in vitro fertilization performance of individual bulls. 相似文献
14.
试验旨在探究公猪精液冷冻保存对其精子功能的影响。取长白猪的鲜精和优质冻精,用精子分析仪检测精子的运动能力,台盼蓝染色检测精子活率,体外受精（IVF）试验检测卵裂率与囊胚率,采用不同功能检测试剂盒检测冻精和鲜精的顶体完整率、线粒体膜通道孔（MPTP）活性、线粒体膜电位（MMP）、线粒体活性、线粒体氧化应激活性氧（ROS）以及精子DNA完整性,实时荧光定量PCR检测弱精子症相关蛋白基因SMCP、TEKT3、DNAH1、TCTE3的表达。结果表明,与猪鲜精相比,猪冻精的活率及活力均显著降低（P<0.05）,冻精的顶体完整率也明显下降（P<0.05）;冻精的卵裂率和囊胚率显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体功能分析结果显示,冻精的MPTP相对荧光单位值（RFU）、线粒体膜电位荧光比率以及线粒体活性光密度（OD）值均显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体ROS检测发现,冻精的RFU值显著高于鲜精（P<0.05）;精子DNA完整性检测结果显示,冻精拖尾率显著高于鲜精（P<0.05）;而弱精子症相关蛋白基因的表达与鲜精相比,差异不显著（P>0.05）。综上所述,冷冻导致猪精子活率、活力、线粒体功能、DNA完整性下降,最终使得冷冻精液精子的受精能力降低。 相似文献
15.
６头荷斯坦成年公牛，每头采集３次精液，分别利用精子穿透试验和姬姆萨染色法，评定精子在发情母牛子宫颈粘液、ＶＢ１２、稀释液和解冻液等四种介质中的泳动速度、顶体完整车、畸形率以及精子有效存活时间的变化。结果表明，精子泳动速度在不同介质中的差异极显著，在宫颈粘液中显著高于其它介质，在ＶＢ１２中最低；不同介质中精子顶体完整率的差异不明显；畸形率在ＴＢ１２中显著低于解冻液；精子有效存活时间在稀释液和解冻液中显著高于ＶＢ１２中。不同公牛在四种介质中的反应亦有一定差异。 相似文献
16.
【目的】 探究在冷冻稀释液中添加大豆卵磷脂代替10%卵黄对梅花鹿精液冷冻保存效果的影响,为梅花鹿人工授精体系的完善提供参考。【方法】 采用电刺激法采集梅花鹿精液,以精液冷冻稀释液中分别添加1%、2%、3%、4%和5%大豆卵磷脂代替10%卵黄作为试验组,添加20%卵黄作为对照组,分别进行各组精液冷冻保存。5 d后,进行精液解冻,检测解冻后各组精子的活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性、存活时间,筛选合适浓度的大豆卵磷脂。选取4~5岁健康雌性梅花鹿,肌肉注射300 IU孕马血清促性腺激素（PMSG）和0.4 mg氯前列醇钠进行同期发情处理,发情后第20 h用20%卵黄组与筛选出的大豆卵磷脂组冻精进行人工输精,输精后30 d使用B超检测仪检测妊娠情况,统计妊娠率。【结果】 与对照组相比,1%大豆卵磷脂组冻融后的精子活力、向前活动力、快速前进活力、活率、质膜完整率、顶体完整率及线粒体活性均显著提高（P<0.05）;随着稀释液中大豆卵磷脂浓度的增加,其冻融后精子活力、向前活动力、快速前进活力、活率、质膜完整率、顶体完整率以及线粒体活性呈下降趋势,精子存活时间也随浓度的增加而减少。1%大豆卵磷脂组冻融精子人工授精梅花鹿的妊娠率为61.11%,高于对照组、2%和3%大豆卵磷脂组,但差异均不显著（P>0.05）。【结论】 在梅花鹿精子冷冻稀释液中添加1%大豆卵磷脂替代10%卵黄,能有效提高梅花鹿冻融精子的质量,为进一步筛选新型梅花鹿精液冷冻稀释液提供理论基础。 相似文献
17.
Frozen-thawed sexed semen from six bulls (Holstein) was used for studying their efficiency in an in vitro fertilization (IVF)-programme and to compare their ultrastructure with in vitro produced bovine blastocysts produced with non-sorted sperm. Progressive motility of sorted spermatozoa, their IVF rate, development of produced blastocysts and the ultrastructure of the blastocysts were analysed. The cleavage rates of sexed sperm of bulls (groups S1, S2 and S4) were significantly lower than that of unsorted control sperm (P < 0.01). Blastocyst development at day 7 of the sexed semen groups varied between 3.5% and 28.8% versus 33.6% for non-sexed semen. The individual blastocyst yield with sexed semen of group S5 (28.8%) was similar to the mean blastocyst production of the non-sexed control spermatozoa (C, 33.6%; P > 0.05). The remaining five sexed sperm groups resulted in significantly lower developmental rates of blastocysts on day 7 (S1, 4.9%; S2, 0%; S3, 0%, S4, 3.5%; S6, 25.8%, P < 0.01). Group S2 showed microbiological contamination in 50% (four of eight) and S3 in 100% of the experiments (eight of eight). Progressive motility of sexed sperm was significantly lower than that of unsorted sperm (S1, 48 +/- 12.0%; S2, 41 +/- 11.9%; S3, 39.0 +/- 9.9%; S4, 42 +/- 4.6%; P < 0.01; S5, 72 +/- 7.1% and S6, 64 +/- 9.3; P < 0.05 versus C 82 +/- 4.6%). The percentage of progressive motile spermatozoa showed a good correlation with the developmental capacity of blastocysts (r(2): >0.70), the regression parameter was significant (P < 0.01). Furthermore, with a straw containing 10 x 10(6) sexed spermatozoa significantly lower number oocytes was fertilized than with the same concentration of non-sexed sperm (P < 0.01). Our results demonstrate that the suitability of sperm sorting for in vitro fertilization (IVF) is lower than no sexed sperm. Our ultrastructural studies showed that blastocysts produced with flow-cytometrically sex-sorted spermatozoa possessed deviations in the number and structure of organelles like mitochondria, rough endoplasmic reticulum (ER) and nuclear envelope. These morphological alterations may be responsible for compromised development that observed in embryos produced with sex-sorted spermatozoa. Thus, we conclude that sperm sex sorting can markedly affect the efficiency of an IVF-programme. 相似文献
18.
Myrian Megumy Tsunokawa Hidalgo Ana Beatriz Marques de Almeida Fábio Lucas Zito de Moraes Rodrigo Yudi Palhaci Marubayashi Fabiana Ferreira de Souza Thales Ricardo Rigo Barreiros Maria Isabel Mello Martins 《Reproduction in domestic animals》2021,56(8):1117-1127
This study aimed to study the characteristics and subpopulations of spermatozoa from bulls with low and high reproductive performance based on pregnancy rates. Based on historical records of pregnancy rate from four farms, 24 bulls were selected. Two groups were established, with low pregnancy rates (n = 12; LOW), including bulls that presented pregnancy rates <52.27% (33.33% to 51.81%); and a group with high pregnancy rates (n = 12; HIGH), with pregnancy rates >52.27% (52.27% to 69.64%), after fixed-time artificial insemination (FTAI). The thawed sperm straws were analysed to sperm kinetics, morphology, plasma membrane integrity and sperm subpopulations. The LOW group exhibited a higher proportion of static cells (p < .05). In contrast, the HIGH group showed greater percentages for membrane integrity and total and progressive motility, and cells with fast and medium velocity (p < .05). In the cluster procedures, four sperm subpopulations were established. The low-fertility bulls presented the highest percentage of subpopulation 2 (41.46%), characterized by slow and progressive spermatozoa. The high-fertility bulls exhibited the highest percentage of subpopulation 3 (37.17%), characterized by fast and nonlinear spermatozoa. Results from this study indicated that bulls with greater percentages of fast and nonlinear spermatozoa seem to have greater fertilization capacity and the subpopulations analysis can be considered a tool to identify ejaculates with high fertility. 相似文献
19.
【目的】 探究冷冻前添加热休克蛋白A8(heat shock protein A8, HSPA8)和解冻后添加不同浓度精浆(seminal plasma, SP)对冻融猪精子的影响。【方法】 采用手握法采集长白猪精液, 添加0.5 μg/mL HSPA8到猪精液冷冻保护剂中进行细管分装, 投入液氮中保存3周后进行解冻, 解冻后添加不同浓度精浆(0、10%、30%和50%), 对冻融后长白猪精子的运动能力、质膜完整性、顶体完整性、细胞凋亡、线粒体膜电位、鱼精蛋白缺乏及体外获能水平等进行评估。【结果】 与对照组相比(无HSPA8和精浆), 添加0.5 μg/mL HSPA8处理组(无精浆)的精子直线速度(VSL)、曲线速度(VCL)、平均路径速度(VAP)和前向性运动(STR)均显著提升(P<0.05), 精子直线性运动(LIN)和运动的摆动性(WOB)均无显著差异(P>0.05);精子质量参数中活力、质膜完整性和顶体完整性均显著升高(P<0.05), 细胞凋亡水平与线粒体膜电位均显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05)。之后在解冻液中添加不同浓度的精浆, 与添加0.5 μg/mL HSPA8处理组(无精浆)相比, 精浆添加量达到50%时, 精子VSL、VCL、VAP、LIN、STR和WOB均显著提升(P<0.05);精子活力、质膜完整性、顶体完整性和线粒体膜电位均显著提高(P<0.05), 细胞凋亡水平显著降低(P<0.05);精子鱼精蛋白缺失率显著降低(P<0.05);精子蛋白酪氨酸磷酸化水平显著提高(P<0.05)。【结论】 在冷冻基础液中添加0.5 μg/mL HSPA8和解冻稀释液中添加50%精浆联合使用可以有效改善冻融精子质量, 将会对猪精液的冷冻保存及商业化生产提供一定的参考。 相似文献