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草莓镶脉病毒的PCR检测及特异片段的序列分析 总被引：5，自引：0，他引：5
用CTAB法从感病的草莓叶片中提取总DNA,以其为模板经PCR扩增获得与预期片段大小一致长约600bp的扩增产物,同时优化PCR反应程序,获得单一特异条带;通过总DNA浓度梯度稀释,进行PCR扩增,结果表明能检测到2.5μg叶组织中病毒的存在。回收PCR特异扩增产物,与pMD18-T载体连接,并进行转化、重组克隆的筛选、重组质粒的酶切鉴定和序列测定。扩增片段序列与已报道SVBVCP基因序列(序列号:Nc_001725)的核苷酸同源性为89.2%,氨基酸同源性为96.3%。该特异片段序列在GenBank中的登记号为AY862389。 相似文献
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草莓轻型黄边病毒的RT-PCR检测及其3'端序列分析 总被引：2，自引：0，他引：2
利用RT-PCR技术对草莓植株中草莓轻型黄边病毒( SMYEV) 的外壳蛋白基因片段进行特异扩增, 扩增产物经测序证明为SMYEV的特异片段。建立了稳定的SMYEV的RT2PCR检测体系, 并对19个草莓品种和2种野生草莓进行检测, 其中12个品种和五叶草莓带有SMYEV。从SMYEV 的沈阳分离物SY01上扩增出了932 bp的基因组3'末端区域, 其核酸序列与国外分离物的序列同源性为86% ～96%。系统进化树显示SMYEV分为3个组群, 沈阳分离物SY01与欧美分离物位于同一组群内, 但独立形成1个小的分支。RNA二级结构分析显示SMYEV基因组3'末端形成3个茎环结构, 不同分离物的序列变化并未引起茎环结构的明显变化。 相似文献
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草莓轻型黄边病毒的RT-PCR检测及其3''端序列分析 总被引：2，自引：1，他引：2
利用RTPCR技术对草莓植株中草莓轻型黄边病毒(SMYEV)的外壳蛋白基因片段进行特异扩增,扩增产物经测序证明为SMYEV的特异片段。建立了稳定的SMYEV的RTPCR检测体系,并对19个草莓品种和2种野生草莓进行检测,其中12个品种和五叶草莓带有SMYEV。从SMYEV的沈阳分离物SY01上扩增出了932bp的基因组3末端区域,其核酸序列与国外分离物的序列同源性为86%～96%。系统进化树显示SMYEV分为3个组群,沈阳分离物SY01与欧美分离物位于同一组群内,但独立形成1个小的分支。RNA二级结构分析显示SMYEV基因组3末端形成3个茎环结构,不同分离物的序列变化并未引起茎环结构的明显变化。 相似文献
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草莓病毒病研究进展 总被引：19，自引：2，他引：19
综述了草莓皱缩病毒(SCV)、草莓斑驳病毒(SMV)、草莓镶脉病毒(SVBV)、草莓轻型黄边伴随病毒(SMYEaV)、草莓轻型黄边病毒(SMYEV)和草莓潜隐环斑病毒(SLRSV)等6种主要草莓病毒的分类地位、地理分布、传播途径、理化及分子生物学特性,介绍了23种草莓病毒病检测方法、控制手段。应用指示植物小叶嫁接法检测草莓病毒病仍是特异、灵敏的标准方法,但更快捷、准确、灵敏的血清学检测(ELISA)和分子生物学检测(PCR)近年来取得了很大进展。目前,草莓病毒病的控制方法主要有培育无病毒苗木、选育抗蚜虫、抗病毒品种和应用转基因技术获得抗病毒植株。 相似文献
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PCR检测草莓镶脉病毒的稳定性研究 总被引：17，自引：3，他引：17
利用改进的CTAB法提取了优质的草莓总DNA,可以稳定地进行草莓植株中SVBV的PCR检测。对PCR检测草莓植株中SVBV的反应体系进行了优化,结果表明,Promega公司的Taq酶与TaKaRa公司的PCR反应缓冲液配合使用效果较好,适宜引物浓度为0.5μmol/L,退火温度为53℃。20μLPCR反应液中包含0.001μL总DNA时能扩增出SVBV特异谱带,相当于能够从不足1μg的草莓新鲜叶片中检测出SVBV。基于对SVBV中国分离物外壳蛋白基因的序列分析比较,设计并筛选了检测SVBV的理想引物,提高了利用PCR检测草莓植株中SVBV方法的稳定性。 相似文献
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带病毒和无病毒草莓生长和结果的比较 总被引：5，自引：0，他引：5
目前,世界各地已报道的草莓病毒及其类似病害多达20余种。我国已鉴定明确的有草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓镶脉病毒和草莓皱缩病毒等4种。由于草莓病毒都具有潜伏侵染特性,在栽培品种上不表现明显症状,所以,病毒对草莓生长量、产量和果实质量的影响,往往不为人们所注 相似文献
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<正> 关于草莓病毒病的研究,欧美早于20年代就引起重视,先后发现有20多种病毒侵染草莓。日本从1953年开始把它作为草莓的重要病害,目前已报道的病毒病主要有6种,即草莓斑驳病毒(SMOV)、草莓镶脉病毒(SVBV)、草莓和性黄边病毒(SMYEV)、草莓皱缩病毒(SCrV)、烟草花叶病毒(TMV)和烟草坏死病毒(TNV)。近几年,我国的草莓病毒病虽已开始研究,但因其多具有潜伏侵染特性,尽管植株已被病毒侵染,却不能很快表现症状。因此对草莓生产上的病毒种类和发病情况尚不甚清楚,这方面的研究报道亦较少。我们采用草莓病毒指示植物鉴定的方法,检测了田间3个草莓品种植株的病毒种类和发病情况,以引起生 相似文献
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提高草莓茎尖组织培养脱毒效率研究 总被引：13，自引：0，他引：13
采用茎尖２次脱毒法，对宝交早生等６个草莓品种茎尖进行组培脱毒，经检测可全部脱除草莓斑驳病毒（ＳＭｏＶ）、草莓轻型黄边病毒（ＳＭＹＥＶ）、草莓镶脉病毒（ＳＶＢＶ）和草莓皱缩病毒（ＳＣｒＶ）。茎尖２次脱毒法，操作简便、易掌握，脱毒率达１００％，分化率达７９％。 相似文献
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森林草莓‘Ruegen’果胶裂解酶基因的克隆及荧光定量表达分析 总被引：2，自引：0，他引：2
根据森林草莓(Fragaria vesca)果胶裂解酶(Pectate lyase)基因序列信息设计引物,克隆了森林草莓‘Ruegen’的果胶裂解酶基因PLA、PLB和PLC。利用MEGA5.0软件将这3个基因编码的氨基酸序列与其他植物的果胶裂解酶氨基酸序列进行聚类分析,同时采用荧光定量PCR的方法对‘Ruegen’植株不同器官及不同发育时期果实的果胶裂解酶基因表达量进行分析。结果表明:PLA、PLB和PLC在其植株各器官中均有表达,且在发育后期果实中的表达量明显高于其他器官,结合进化树以及果实发育过程中果胶裂解酶活性变化,推测果胶裂解酶基因对草莓果实发育后期的软化具有调节作用。 相似文献
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Marjorie M. Needham L. G. G. Warne 《The Journal of Horticultural Science and Biotechnology》2013,88(2):101-109
SummaryA leaf curl disease was observed on croton (Codiaeum variegatum L.), a popular ornamental plant in botanical, home, and office gardens in and around Bengaluru, South India. Diseased plants showed typical symptoms of vein thickening, severe inward curling and a reduction in leaf size, and stunting. The pathogen responsible was transmitted to healthy croton plants by grafting of infected scions, and through the whitefly vector, Bemisia tabaci, suggesting that the disease was caused by a begomovirus. The association of a begomovirus with the disease was further confirmed by the amplification of viral DNA fragments of ca. 520 bp and 575 bp derived from the coat protein (CP) gene of DNA-A using degenerate primers and total DNA extracted from infected, but not from healthy croton plants. The 575 bp fragment corresponding to the core region of the CP gene was cloned and sequenced. Phylogenetic analysis of the core CP sequence grouped the croton-infecting begomovirus, which we tentatively called croton leaf curl virus (CrLCuV), with Ageratum yellow vein virus (AJ810825), with which it shared the highest nucleotide identity (95%). The core CP sequence was similar (90 – 95%) to many other begomoviruses from the Indian sub-continent that infect tomato, tobacco, cotton, and papaya. Thus, its precise taxonomic denomination will require sequencing of the complete ssDNA viral genome. 相似文献
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采用MEGA5.0 软件对9 个森林草莓无机磷转运蛋白序列及58 个已知的其它植物磷转运蛋
白的氨基酸序列进行聚类分析,发现5 个基因与菌根磷转运蛋白基因分支聚在一起,初步判断是候选的
草莓菌根磷转运蛋白。根据其基因序列设计引物获得了5 个‘红颜’草莓候选菌根磷转运蛋白基因全长。
实时荧光定量PCR 结果表明,FaPT4、FaPT5 和FaPT8 在草莓菌根中显著上调表达,结合聚类分析结果,
证明这3 个基因是‘红颜’草莓菌根磷转运蛋白基因。 相似文献
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不同培养基对草莓种质离体保存的影响 总被引：6，自引：0，他引：6
为筛选草莓种质常温下离体保存的适宜培养基,本试验以宝交早生(F.ananassaDuch.)和UC5(F.vescaL.)为试材,通过改变培养基中的无机盐浓度、蔗糖浓度、琼脂浓度,设计了9种培养基,将试管苗进行了常温保存,保存期间调查了不同培养基草莓试管苗丛生芽增殖数,根、愈伤、丛芽的生长量,试管苗的长势,叶绿素的含量及存活率等。结果表明:保存过程中试管苗经历了芽增殖、伸长和根生长的过程,生长越快,养分消耗越多,越不利于保存。草莓试管苗保存培养基应选择适宜浓度的营养物质来限制试管苗的生长。本试验中培养基(1/4MS+0.5mg/LBA+15g/L蔗糖+12.5g/L琼脂)是常温下草莓试管苗保存的最适培养基,在此培养基中可保存草莓试管苗11～13个月。 相似文献
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森林草莓独脚金内酯合成关键基因D27的克隆与表达分析 总被引：2，自引：0，他引：2
根据森林草莓中独角金内酯合成过程中的关键基因D27的序列信息设计引物,获得了D27基因的完整开放阅读框架。采用MEGA5.0软件,对森林草莓与其他物种D27基因编码的氨基酸序列进行聚类分析,发现森林草莓D27基因与其他物种D27基因具有较高的同源性。设置正常供磷、缺磷和在缺磷条件下接种丛枝状菌根真菌处理,利用电感耦合等离子发射光谱仪测定草莓植株的磷含量,结果表明缺磷条件下接种丛枝状菌根真菌,草莓植株中磷含量极显著提高,而缺磷处理的磷含量极显著降低。实时荧光定量PCR结果表明,与正常供磷处理相比,缺磷和接种丛枝状菌根真菌处理条件下,D27基因的表达量分别上调7倍和11倍,这说明D27基因的表达既受到磷水平调控,又受到菌根形成的调控。 相似文献
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中国草莓属( Fragaria) 植物的分类研究 总被引：15，自引：0，他引：15
中国是世界上野生草莓种类最丰富的国家。近20年来, 从国内外收集保存了103份野生草莓资源, 鉴定出我国自然分布有11个种, 约占世界草莓属植物20个种的一半。这11个种包括8个二倍体种: 森林草莓(Fragaria vesca L. ) 、黄毛草莓( F. nilgrrensis Schlecht. ) 、五叶草莓( F. pentaphylla Lozinsk. ) 、纤细草莓( F. gracilis Lozinsk. ) 、西藏草莓( F. nubicola Lindl. ) 、绿色草莓( F. viridis Duch. ) 、裂萼草莓( F. daltoniana Gay) 、东北草莓( F. m andschurica Staudt) 和3个四倍体种: 东方草莓( F. orientalis Lozinsk. ) 、西南草莓〔F. m oupinensis ( Franch. ) Card. 〕、伞房草莓( F. corymbosa Lozinsk. ) 。对我国原产野生草莓种类进行了较系统的性状描述和分类研究, 并列出了我国野生草莓分种检索表。提出我国分布有11个种的结论比以前记载的8个种更全面和完整。 相似文献