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为了建立一种对近交系大鼠遗传物质进行精确可靠、快速简便的监测方法，利用DNA指纹技术对国内6个品系8个近交系大鼠群体进行了DNA多态性的分析，并与PCR扩增微卫星DNA技术进行了比较。其结束显示：(1)不同品系之间DNA指纹图差异较大，同一群体不同个体间DNA指纹图带的相似系数和共有带率除SHR（哈)和WKY(哈)小于0．7外，其他均大于0．9。不同地区同一SHR间和WKY间DNA指纹图也存在差异，相同DNA不同次制作的DNA指纹图谱基本一致。(2)不同品系个体间微卫星DNA具有显著多态性；同一群体不同个体之间除SHR(哈)的SMST位点和WKY(哈)的AGT位点出现一定的差异外，其他均没有差异。DNA指纹图能更精确可靠地反映出动物个体间的遗传背景，而微卫星DNA遗传监测方法比较简便快捷。 相似文献
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野生动物粪便在濒危物种遗传结构研究中的应用 总被引：3，自引：0，他引：3
粪便DNA提取的质量与动物的取食、样品采集地的环境温度、粪便的保存方法有着密切的关系。对于含纤维素较高的食物通过动物的肠道时会有较多的肠道细胞脱落，因此可以提高样品中DNA的含量；当样品采集地的环境温度较高时容易使粪样中的DNA降解，将会降低样品中DNA的含量；然而生活在不同生境类型内的动物，应采取不同的粪便保存方法，这样可以提高样品的质量。在粪便DNA提取方法中，常规法是一种简单、省时、经济的方法。随着粪便DNA分析技术的发展，这项技术在将来的濒危物种遗传结构的研究中会得到广泛的应用。 相似文献
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线粒体DNA多态性与家畜遗传育种 总被引：9，自引：0，他引：9
在线粒体DNA的特点及其限制性片段长度多态性的基础上，阐明了线粒体DNA多态性在家畜育种上的应用。并指出线粒体DNA多态分析在家畜品种资源研究中的意义。 相似文献
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旨在构建我国部分马、驴细胞色素b(CYTB)基因的DNA条形码数据库，并研究其遗传多样性。以全国不同区域的8个马和3个驴品种共计149例样本为研究对象，以CYTB为候选基因，构建DNA条形码数据库，并与前期获得的细胞色素氧化酶Ⅰ(COⅠ)和16S rRNA(16S)基因的DNA条形码进行对比，对我国部分马、驴品种进行遗传多样性分析。本研究共生成了CYTB DNA条形码1 271条，经分析，CYTB、COⅠ和16S的GC含量范围分别为44.4%～47.0%、38.3%～47.0%和40.9%～42.6%。对比后发现CYTB基因拥有最多的单倍型序列，在3个基因中表现出更多的多态性位点数，且单倍型多样性更高。编码蛋白的CYTB和COⅠ基因的第3位密码子突变率更高，保守性最小，而非编码蛋白16S基因中3位密码子突变率没有显著差异。CYTB和COⅠ蛋白序列的氨基酸含量不同，CYTB中含量最多的3个氨基酸为亮氨酸、异亮氨酸和苏氨酸，COⅠ为亮氨酸、甘氨酸和丙氨酸。在CYTB和16S条形码中，无论是在物种水平上还是在亚种水平上，种内和种间距离都出现重合现象，而马和驴的COⅠDNA条形码在种内/种间遗... 相似文献
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DNA指纹技术分析畜禽亲缘关系的原理及应用 总被引：1，自引：0，他引：1
本文概述了DNA指纹技术的原理、方法、特点及其在应用上的局限性和利用DNA指纹技术分析亲缘关系的研究进展，同时介绍了用DNA指纹图谱进行畜禽亲缘关系分析的一般统计方法。 相似文献
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ISSR分子标记及其在动物遗传育种中的应用 总被引：10，自引：0，他引：10
近年来，分子遗传标记的研究与应用得到了迅速的发展。20世纪80年代中期以来，随着PCR技术的出现，基于PCR技术的分子标记，如随机括增多态性(randomam plified polymorphic DNA，RAPD)、小卫星(minisatellite)或称DNA指纹图谱(DNA fingerprinting，DFP)、微卫星(microsatellite)或称简单序列重复(simple sequence repeat，SSR)、括增片段长度多态性(amplified fragment lengt hpolymorphism，AFLP)、单核 相似文献
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用地高辛标记的核酸探针检测猪伪狂犬病毒野毒感染的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
利用PCR技术从带有伪狂犬病毒（PRV）gE基因的重组质粒pMD18-T-gE中扩增回收约304bp大小的片段,并制备出地高辛标记的gE基因核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与重组质粒DNA发生特异性杂交,而与对照的PRVBartha-k61株疫苗毒DNA、猪细小病毒（PPV）DNA、猪圆环病毒（PCV）DNA、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRsV）cDNA、猪瘟病毒（CSFV）cDNA的杂交反应均为阴性;敏感性检测结果表明,该探针对PRV野毒的最低检出量为4pg。应用该探针对11份繁殖障碍病料进行了杂交检测,共检出4份阳性病料,该结果与PCR检测结果一致,表明该核酸探针可用于猪伪狂犬病野毒感染的临床诊断。 相似文献
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为优化猪精子载体法技术参数,利用荧光定量PCR、荧光显微镜检测和精液常规检测方法,分析不同DNA转染剂、不同孵育温度和不同形态DNA对猪精子转染外源DNA的影响。结果表明,PEI和TransFast转染剂能极显著提高猪精子转染效果,且PEI优于TransFast,而NanoFect转染剂包裹DNA不能转染精子。随着转染温度的升高,精子的活力和活率均明显下降,而转染率和内化外源DNA量基本保持稳定,而吸附外源DNA量呈下降趋势。环状DNA和线性化DNA在与精子共孵育后,两者的精子活力、活率、转染率和内化外源DNA量差异均不显著,精子吸附线性化DNA量极显著高于环状DNA量。综合分析表明,外源DNA形态对猪精子转染效果无显著影响;PEI和TransFast能够显著提高猪精子转染效果;共孵育温度以17℃为最佳,本结果为开展精子载体法制备转基因猪研究提供了基础试验依据。 相似文献
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近年来，随着测序技术的迅速革新和发展，甲基化研究持续升温。DNA甲基化修饰是在不改变DNA序列的前提下，调控细菌基因表达，改变遗传表现的一种方式。真核生物的DNA甲基化修饰在疾病发生、植物生长等领域的应用已有大量研究。但是，对于原核生物DNA甲基化修饰的研究却较少。为了更好地了解原核生物中细菌的DNA甲基化研究现状，本文对近年致病菌和乳酸菌的甲基转移酶、甲基化组学和检测技术的研究进行简要概述，以期为DNA甲基化在乳酸菌中的应用中提供一定参考。 相似文献
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Polymerase chain reaction was used to detect an economically important herpesvirus, channel catfish virus (CCV). A segment of the viral DNA was sequenced and oligonucleotide primers were produced from that sequence. After the primers were tested for the possibility of hybridization to catfish DNA, they were used to prime the polymerase chain reaction, using pure CCV DNA, CCV DNA added to catfish DNA, and DNA from catfish infected and not infected with CCV. In all cases, the method proved to be simple and sensitive in its detection by CCV DNA. When catfish DNA was present, less than 0.1 pg of CCV DNA was detectable. Channel catfish virus DNA in a latent carrier of CCV was readily detectable. 相似文献
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"自杀性"DNA疫苗研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
DNA疫苗作为第三代全新的疫苗,具有传统疫苗和其他基因工程苗不可比拟的优点.但由于其安全性方面存在着一些尚待解决的问题,使得实际应用受到限制."自杀性"DNA疫苗是基于常规的DNA疫苗和自主复制型RNA疫苗而发展起来的一种新型疫苗.由于其制备原理和过程与常规DNA疫苗相类似,所以它具备常规DNA疫苗在制作、运输储存以及免疫等各方面的优点.同时由于它以甲病毒复制子为基础能诱导转染细胞自主凋亡,故比常规DNA疫苗更为安全有效.文章针对"自杀性"DNA疫苗载体的构建、作用机理、优点以及国内外研究情况作一介绍. 相似文献
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F S Kibenge R J Cawthorn D Despres P K McKenna R J Markham 《Veterinary parasitology》1991,40(1-2):9-20
A genomic library of Sarcocystis cruzi sporozoite DNA was constructed in bacteriophage lambda gt10. Recombinant phages containing insert DNA were selected by growth on Escherichia coli strain C600 hflA150. Of 14 clones examined, 11 contained DNA inserts ranging in size from approximately 1.45 kilobase (kb) to 6.18 kb. Insert DNA from four of these clones specifically hybridized to 32P-labelled S. cruzi merozoite DNA. One of these insert DNA, clone SL41, was selected and labelled with 32P. This probe did not hybridize with the other ten DNA inserts nor with bovine cellular DNA, but it hybridized with sporozoite, merozoite and bradyzoite DNA preparations. The SL41 probe could detect merozoite DNA in as little as 17 ng total DNA. Genomic probes detecting developmental stages of Sarcocystis spp. could provide an improved means is diagnosis of acute bovine sarcocystosis. 相似文献
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为快速获得高质量的柑橘黄龙病（HLB）植物样品DNA,本研究在传统CTAB法基础上,结合热萃取技术,建立了一种简便、快速提取HLB植物样品DNA的CTAB简化法。与Solarbio植物基因组DNA提取试剂盒和传统CTAB提取法相比,该方法所需时间短,1~2 h即可完成整个提取过程,获得的HLB植物样品DNA质量高、产量多。同时比较了三种方法制备模板时黄龙病病原菌和其他柑橘病原菌的PCR检出率,CTAB简化法和传统CTAB法检出率一致,试剂盒稍低,表明本研究建立的CTAB简化法可用于柑橘DNA病害PCR检测DNA模板的制备。本研究研发的HLB植物样品DNA提取方法优势明显,适用于大量病样的快速检测。 相似文献
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为筛选一种高效、快捷的血液基因组DNA提取试剂盒,采集24份新鲜西藏绵羊血液样本,选用6种市售商业化试剂盒（LifeFeng柱式试剂盒DK601和非柱式试剂盒DK602,康为世纪非柱式试剂盒CW0544和柱式试剂盒CW0546,上海生工非柱式试剂盒SK8224和柱式试剂盒SK8254）,比较所提DNA的浓度、纯度、得率以及对嗜吞噬细胞无形体16S rRNA进行巢式PCR扩增,综合评价不同试剂盒DNA提取效果.结果表明,应用LifeFeng柱式试剂盒DK601提取的DNA浓度和纯度均最高,得率较高,分别达到75.63 ng/μL、1.894（OD260/OD280）、18.91 ng/μL;且嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因的PCR扩增条带清晰度最优.因此,LifeFeng DK601可作为提取绵羊血液基因组DNA及嗜吞噬细胞无形体（Anaplasma phagocytophilum）病原鉴定的首选试剂盒. 相似文献
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增强DNA疫苗免疫效果的研究进展 总被引：3，自引：1，他引：2
随着DNA重组技术的发展和应用,DNA疫苗、病毒和细菌活载体疫苗等基因工程疫苗的研制日益成为医学领域的一大研究热点。DNA疫苗在许多方面优于传统的灭活苗和减毒苗,但其免疫效果的稳定性和确实性方面尚存不足。影响DNA疫苗免疫效果的因素很多,国内外的许多研究者在这方面作了大量有意义的工作。目前,多数研究者主要通过目的基因的选择、促进外源基因在体内表达、改善疫苗导入方式以及辅以免疫刺激序列和免疫佐剂等方面来提高DNA疫苗的免疫效果。如果DNA疫苗在免疫效果方面能得到大幅度的提高,则它进入临床使用大有前途。 相似文献