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1.
采用MTT法、Cometassay(彗星实验)和流式细胞分析法研究了表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对卡莫司汀引起的张氏肝细胞DNA损伤的保护作用及其机制。结果表明:EGCG能阻止卡莫司汀所致张氏肝细胞的生长抑制,卡莫司汀单用对张氏肝细胞的IC50为43.31μg/ml,当用无毒浓度25μg/ml和50μg/ml的EGCG与卡莫司汀联用时,对张氏肝细胞的IC50分别提高至52.46μg/ml和46.65μg/ml。彗星分析结果表明EGCG还能减小卡莫司汀引起的张氏肝细胞DNA损伤,彗星Olive尾矩值由单用时的9.07±5.48降为联用时的6.02±2.46。EGCG还能减小卡莫司汀所致张氏肝细胞的早期凋亡率,25μg/ml的EGCG和20μg/ml的卡莫司汀联合处理4、6h和24h时,早期凋亡率分别从4.53±0.64(%)、6.01±0.14(%)、2.27±0.32(%)降至3.04±0.47(%)、5.61±0.10(%)、1.14±0.23(%)。说明EGCG能保护卡莫司汀对正常肝细胞的杀伤,其机理是它能减少这类药物引起的细胞DNA损伤,降低卡莫司汀所致细胞早期凋亡。 相似文献
2.
为探索EGCG对Nicotine诱导肺癌细胞增殖的抑制作用,本研究通过MTT实验筛选出EGCG、Nicotine对肺腺癌细胞H1299的最佳作用浓度,利用实时荧光定量PCR技术检测EGCG、Nicotine对H1299细胞中Bax、Bcl-2、Jak2和Stat3基因mRNA相对表达量的变化。实验结果表明,EGCG对H1299细胞的半抑制浓度IC50值约为32βμmol·L-1（24βh）、15βμmol·L-1（48βh）;1βμmol·L-1的Nicotine对H1299细胞促增殖作用明显;以15βμmol·L-1的EGCG预处理H1299细胞24βh可显著下调1βμmol·L-1 Nicotine的促增殖作用（P<0.05）。1βμmol·L-1的Nicotine处理H1299细胞可明显降低JAK2/STAT3信号通路中Bax基因mRNA的表达,增加Bcl-2、Jak2、Stat3基因的mRNA表达;15βμmol·L-1 EGCG预处理H1299细胞可反向调控Nicotine诱导所致JAK2/STAT3信号通路中Jak2、Stat3和Bax、Bcl-2基因表达量的变化,结果具有显著性差异（P<0.05）。由此可知,EGCG对Nicotine诱导的肺腺癌H1299细胞增殖及JAK2/STAT3信号通路中促增殖基因mRNA的表达起抑制作用。 相似文献
3.
采用MTT法、Comet assay（彗星实验）和RT—PCR法研究了表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对DNA损伤剂卡莫司汀作用后张氏肝细胞的DNA损伤及相关修复基因表达的影响。结果表明：EGCG能阻止卡莫司汀所致张氏肝细胞的生长抑制,卡莫司汀单用对张氏肝细胞的IC50为43．31μg／mL,当用25μg／mL和50μg／mL的EGCG与卡莫司汀联用时,对张氏肝细胞的IC50分别提高至52．46μg／mL和46．65μg／mL。彗星分析结果表明,EGCG还能减小卡莫司汀引起的张氏肝细胞DNA损伤,彗星Olive尾矩值由单用时的9．07±5．48降为联用时的6．02±2．46。EGCG还能使卡莫司汀所致张氏肝细胞的DNA修复基因mgmt和alkb的表达下降得到回升,卡莫司汀（20μg／mL）处理张氏肝细胞24h后,mgmt和alkb的mRNA水平（与外参0634-actin的比值）比未处理组明显下降（分别由0．451±0．041和0．356±0．120下降至0．323±0．046和0．046±0．017,p〈0．05或p〈0．01）,当EGCG与卡莫司汀联合处理24h后,二者的mRNA水平基本恢复到正常（p〉0．05）,与外参β-actin的比值分别为0．451±0．041和0．451±0．041。说明EGCG能保护卡莫司汀对正常肝细胞的DNA损伤,因为它能逆转卡莫司汀所致正常肝细胞内DNA修复酶基因mgmt和alkb的表达下降。 相似文献
4.
茶多酚与绿原酸生物活性的比较研究 总被引：8，自引：4，他引：4
为了研究茶叶与金银花中主要药效成分茶多酚和绿原酸生物活性的差异,应用过氧化值测定法、分光光度法、最小抑菌浓度(MIC)测定法分别比较茶多酚和绿原酸的抗氧化性、自由基清除能力、体外抑菌活性;结果表明在6周的观测期内,浓度为100βµg/g和200βµg/g的茶多酚可将猪油的POV抑制在10βmeq/kg范围内,且抗氧化能力随浓度增加而增强,这与81％绿原酸有相似结果;20％绿原酸、81％绿原酸、95％茶多酚对DPPH和·OH的半数抑制浓度(IC50)分别为327、1β432、65、135、52βmg/L和1β908βmg/L;95％茶多酚对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC分别为500βμg/g和250βμg/g,81％绿原酸和20％绿原酸相应值分别为500βμg/g、500βμg/g和500βμg/g、1β000βμg/g;研究结论为茶多酚（95%）在抗氧化性、清除DPPH能力及对金黄色葡萄球菌的抑菌效果方面都要强于绿原酸（81%）,在清除·OH能力上要弱于绿原酸,在食品、药品行业中茶多酚有望比绿原酸发挥更大的作用。 相似文献
5.
建立了配体交换色谱手性流动相法拆分茶氨酸对映体的方法。采用Polaris C18柱;流动相为L-脯氨酸：Cu2+（摩尔比）为2:1,Cu2+浓度为0.5βmmol/L,pH6.8,甲醇的加入体积比为2%;波长254βnm;流速0.9βml/min;柱温30℃。L-茶氨酸的进样量在0.09542βμg~4.241βμg范围内峰面积与进样量之间线性关系良好,回收率在97.45%~100.4%之间;D-茶氨酸的进样量在0.08486βμg~4.243βμg范围峰面积与进样量之间线性关系良好,回收率在97.07%~100.1%之间。该方法通用,准确。 相似文献
6.
以EGCG-O-甲基转移酶催化EGCG生成EGCG3′′Me、EGCG4′′Me和EGCG3′Me等3种主要的EGCG甲基化衍生物的生成量为主要指标,考察了EGCG甲基化衍生物酶促合成的反应条件。结果表明,EGCG甲基化衍生物的酶促合成最佳反应条件为：温度35℃,pH7.5,DTT和Mg2+的浓度为2mmol/L;在该反应条件下,反应体系中EGCG3′′Me、EGCG4′′Me以及EGCG3′Me的生成量分别可达到386.39μg/mL、23.40μg/mL和107.01μg/mL。 相似文献
7.
茶叶中硫丹及硫丹硫酸酯的ELISA快速测定 总被引：3，自引：0，他引：3
研究应用酶联免疫方法,快速检测茶叶中硫丹及硫丹硫酸酯。茶叶提取后,不净化,用PBS缓冲液稀释500倍后,进行酶联免疫方法测定,方法平均回收率为86.6%~91.1%;经SPE净化后,回收率68.7%~123%。标准曲线IC50为2βµg/L,线性范围1~10βµg/L。直接提取法最低检测限2βmg/kg,净化法为0.06βmg/kg。经气相色谱/质谱联用方法验证,灵敏度、精密度和准确度均符合快速检测要求。该法具有快速、简便、低耗、易操作等特点。 相似文献
8.
简单序列重复（Simple sequence repeats, SSR）在茶树遗传与育种研究中具有重要的作用,基于4300 DNA分析系统的SSR发掘具有通量高、准确和灵敏等特点,已被用于许多物种的分子标记研究,但在茶树的相关研究中尚未见报道。本研究应用单因素试验和L9(34)正交设计试验对影响茶树SSR-PCR的主要参数进行优化,建立了适合于4300 DNA分析系统的茶树SSR-PCR反应体系：1.0 μL DNA（25 ng·μL-1）,0.2 μL M13F-F、0.2 μL R和0.4 μL IR-M13F,0.8 μL dNTPs（25 mmol·L-1）,1.0 μL 10×Buffer（含Mg2+）,0.1 μL Ex-Taq聚合酶（5 U·μL-1）,无菌水定容至10 μL。所有引物浓度均为1 μmol·L-1。同时,本研究还证明,可以以自行配制的6.5%聚丙烯酰胺凝胶溶液（acry:bis=29:1）替代4300 DNA分析系统指定凝胶溶液,检测SSR位点。 相似文献
9.
毛细管电泳分析茶黄素的方法研究 总被引：1，自引：0，他引：1
研究了毛细管电泳分析茶黄素类组分的最佳条件。结果表明：在250βmmol/L H3BO4、10βmmol/L KH2PO4、0.75βmmol/L SDS和20％(v/v)乙腈组成的pH7.5电泳介质中,选择25βkV电压、20℃柱温和200βnm波长检测,可在10βmin以内将茶叶中的四种主要茶黄素单体分离,并获得较高的检测灵敏度。四种茶黄素单体浓度与峰面积值之间的相关系数r=0.9945~0.9990,检测下限在0.53~0.64βμg/ml之间,加标回收率为92.50%~108.36%,变异系数≤2.67%。本方法快速、准确,可用于实际样品的测定。 相似文献
10.
云南普洱茶特征成分的功能与毒理学评价 总被引：22，自引：2，他引：20
研究了普洱茶特征成分茶褐素、茶多糖与蛋白质等的复合体对昆明种小白鼠的抗疲劳、降胆固醇以及毒理学效应。实验结果显示：普洱茶特征成分提取物能显著提高小白鼠的抗疲劳作用和降低小鼠血液中的胆固醇含量,且优于普洱茶水提物。普洱茶特征成分提取物经口LD50>10βg/kg,属实际无毒级物质。Ames实验中加S9混合液和不加S9混合液的各剂量组回变菌落数与阴性对照差别无统计学意义,且无剂量反应关系。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验与阴性对照组比较差别无统计学意义。普洱茶特征成分提取物在500~5β000βμg/ml浓度范围内未见诱发CHL细胞染色体畸变率增高。这说明,在实验条件下,普洱茶特征成分提取物属实际无毒级,也未见有致突变作用。 相似文献
11.
为了探索眼树莲乙醇提取物和不同萃取部位的体外抗肿瘤作用,以人胃癌 SGC 细胞株、人肝癌 BEL 细胞株、 慢性髓原白血病 K562 细胞株、宫颈癌 Hela 细胞株、乳腺腺癌 MCF-7 细胞株、肺腺癌 A549 细胞株为供试细胞株,用 MTT 法对眼树莲不同提取部位进行体外抗肿瘤活性筛选,并观察细胞形态。结果表明：乙醇提取物（A）、石油醚部 位（B）、乙酸乙酯部位（C）均对 SGC 细胞具有明显的抑制性,IC50 值分别为 71.73、55.83、51.95 μg/mL,而对 Hela、 MCF-7、A549 3 种细胞有弱的抑制性。A、B 部位对 BEL 细胞有弱抑制性,C 部位对 BEL 细胞具有一定的抑制性,IC50 值为 72.62 μg/mL。B、C 部位对 K562 细胞具有明显的抑制性,IC50 值分别为 53.34、55.99 μg/mL。正丁醇部位（D） 对 SGC、BEL、K562、Hela、MCF-7、A549 这 6 种细胞均没有抗肿瘤抑制性。B、C 均可使相应的肿瘤细胞株的细胞 形态发生变化,引起细胞株的坏死,并呈现明显的剂量-时间-效应关系,为进一步研究眼树莲的抗肿瘤作用奠定基础。 相似文献
12.
利用体外细胞培养技术探讨了四种儿茶素对ECV304细胞增殖和迁移的影响。结果发现,EGCG对ECV304细胞存活率的影响最显著,在EGCG浓度为50~150μmol/L时,细胞存活率达到极显著差异,半数抑制浓度IC50为75~150μmol/L;EGCG对该细胞迁移作用影响明显,且呈剂量依赖性,IC50为150μmol/L,EGCG可能通过抑制内皮细胞的迁移抑制新生血管的生成;ECG与ECV304作用36h和48h,IC50分别为390μmol/L和370μmol/L;C和EC与ECV304作用时,细胞存活率在80%以上。四种儿茶素在浓度低于75μmol/L时,对正常ECV304细胞抑制影响不大。 相似文献
13.
Lee BB Cha MR Kim SY Park E Park HR Lee SC 《Plant foods for human nutrition (Dordrecht, Netherlands)》2007,62(2):79-84
Organic solvent (methanol, ethanol, and acetone) extracts and water extracts of cherry (Prunus serrulata var. spontanea) blossoms were prepared, and antioxidant activities of the extracts were evaluated. Methanolic CBE (100 μg/ml) showed the
highest total phenol content (104.30 μM), radical scavenging activity (34.2%), and reducing power (0.391). The effect of CBE
on DNA damage induced by H2O2 in human leukocytes was evaluated by Comet assay. All CBE was a potent dose dependent inhibitor of DNA damage induced by
200 μM of H2O2, methanolic CBE showed the most strong inhibition activity. The methanolic CBE of 500 μg/ml showed 38.8% inhibition against
growth of human colon cancer cell line HT-29. These results indicated that cherry blossoms could provide valuable bioactive
materials. 相似文献
14.
Chemical investigation of the Dongsha Atoll soft coral Lobophytum crassum has afforded four new cembranoids, crassumols A-C (1-3) and 13-acetoxysarcophytoxide (4). The structures of these isolated compounds were elucidated by extensive NMR and HRESIMS experiments. The cytotoxicity and anti-HCMV (Human cytomegalovirus) activities of 1-4 were evaluated in vitro. Compound 4 exhibited cytotoxicity against A-549 (human lung carcinoma) cell line with an ED(50) of 3.6 μg/mL. 相似文献
15.
Jang IC Park JH Park E Park HR Lee SC 《Plant foods for human nutrition (Dordrecht, Netherlands)》2008,63(4):205-210
The Cosmos bipinnatus has been used in a traditional herbal remedy for various diseases such as jaundice, intermittent fever, and splenomegaly.
The present study describes the preliminary evaluation of antioxidant activities and antigenotoxic effect of Cosmos bipinnatus flowers according to four different colors (white, pink, orange, and violet). The antioxidants properties were evaluated by determining TPC, DPPH RSA, ABTS RSA, and RP. The highest TPC of methanolic
CFE (at concentration of 1 mg/ml) showed in violet colored CF (1,013 μM), and IC50 of DPPH RSA, ABTS RSA, and RP were also the lowest in violet colored CFE with values of 0.61, 1.48, and 0.82 mg/ml, respectively.
The antigenotoxic effect of the CFE on DNA damage induced by H2O2 in human leukocytes was evaluated by Comet assay. Pretreatments with CFE produced significant reductions in oxidative DNA
damage at the concentration of 500 μg/ml, except for violet colored CFE. The ED50 value of white colored CFE has shown the highest inhibition (0.40 mg/ml) on H2O2 induced DNA damage, followed by orange > pink > violet color. These results suggested that Cosmos bipinnatus has significant antioxidant activity and protective effect against oxidative DNA damage. 相似文献
16.
茶多酚与油菜花粉提取物对前列腺癌细胞生长抑制效果比较研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为研究茶多酚（TP）与油菜花粉提取物对前列腺癌细胞生长抑制效果的差异,应用细胞培养技术、MTT显色试验测定（IC50）法、荧光显微镜观察癌细胞形态变化。结果表明,除花粉醇溶性提取物（B）对前列腺癌细胞没有明显抑制作用外,花粉水溶性提取物（A）及A（B）与TP的等比例混合物均有显著的抑制作用,A、A+TP、B+TP和TP的IC50依次为1470、752、82、45 μg/mL,B+TP对PC-3的生长均有抑制作用,且成剂量效应和时间效应关系,经B+TP处理的PC-3癌细胞,用荧光显微镜可以看到癌细胞的凋亡小体。 相似文献
17.
茯砖茶中几种单体成分功效的高通量筛选研究 总被引：4，自引：3，他引：1
选择与降脂减肥作用相关的FXR、LXR、PPARδ、PPARγ及3T3-L1模型对从茯砖茶中分离制备的6个单体化合物进行高通量药物筛选研究。结果表明,各单体对所选模型均有活性。对于FXR激活模型,没食子酸(GA)和表儿茶素没食子酸酯(ECG)在50μg/ml的初筛浓度时激活值分别达1.766和3.220;表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在10μg/ml和50μg/ml的初筛浓度时激活作用均较强,特别是50μg/ml的初筛浓度时,其激活倍数达6.000;对于PPARδ模型,此三种单体添加量均需达50μg/ml,作用才显著。在初筛浓度为30μg/ml时,没食子儿茶素(GC)对PPARγ模型的激活倍数达1.619;3-甲氧基-4,5-二羟基苯甲酸(MDBA)对PPARγ模型的激活倍数达1.734;3,4-二羟基苯甲酸(DBA)对FXR抑制值为3.641,明显小于对照初级胆汁酸鹅脱氧胆酸(CDCA)的抑制值6.435,因此其抑制模型的作用非常明显。以上试验结果说明此6个化合物均为活性化合物。 相似文献