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1.
急性冷应激对金定鸭开产前内分泌活动的影响 总被引：11，自引：2，他引：9
选42羽产前的金定蛋鸭进行笼养,研究其在舍温从正常的15℃急速降到-15℃,0.5h后再恢复正常温度的12h内某些内分泌活动的规律。试验结果如下,血清中三碘甲腺原氨酸(T3)呈现抛物线变化,在应激后0.5￣1h内出现峰值(1.28±0.03ng·mL-1),然后开始下降,在应激后12h达到(1.22±0.03)ng·mL-1的最低值,其差异显著(P<0.05);甲状腺素(T4)的含量均在应激后1h出现高峰值(5.24±5.07ng·mL-1),然后迅速下降,在应激后12h达到(1.81±1.98)ng·mL-1的最低值,其差异极显著(P<0.01);皮质醇(Cort)的含量前期上升迅速,后期变化规律不明显,并在试验期间内出现了2次峰值,分别是应激后立刻出现的(1.42±0.19ng·mL-1)和在应激后12h出现的(1.38±0.21ng·mL-1),同时在应激后2h有一个小的波峰(1.37±0.07ng·mL-1),其差异不显著(P>0.05);胰岛素(Ins)的含量先下降后上升,在应激开始时是(1.15±0.01)μIU·mL-1,在应激12h后为(1.15±0.02)μIU·mL-1,其差异不显著(P>0.05);血清中的总抗氧化能力(T-AOC)在应激后1h达到高峰(32.56±3.65)IU·mL-1,然后开始下降,到应激后12h为(24.04±4.40)IU·mL-1;其差异极显著(P<0.01);丙二醛(MDA)的含量变化较大,应激后立刻降到(1.43±0.33)nmoL·mL-1,应激后12h为(1.26±0.35)nmoL·mL-1,中间不断呈现波动变化,在应激后2h达到了峰值(2.18±0.36)nmoL·mL-1,其差异显著(P<0.05)。综合本试验结果得出,在急性应激条件下,血清中的个别激素、总抗氧化能力和丙二醛可以作为应激的敏感指标。 相似文献
2.
目的：探讨三七总皂甙（PNS）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的人肾小管上皮细胞（HK-2）总胶原分泌及细胞生长的影响。方法：采用消化法检测细胞培养上清液中羟脯氨酸的含量,换算成总胶原分泌量;采用流式细胞仪（FCM）检测PNS对TGF-β1诱导的HK-2细胞周期、细胞增殖指数（PI）的影响。结果：消化法示：TGF-β1组羟脯氨酸的含量及总胶原分泌量均高于正常对照组,PNS 200～800mg／L可降低细胞培养上清中羟脯氨酸的含量及总胶原分泌置,且随着PNS浓度的升高而降低（P〈0.01）;流武细胞仪（FCM）示：TGF-β1组G1期细胞低于正常对照组,PI高于正常对照组（P〈0.01）,PNS 400～800mg／L使G1期细胞显著升高,PI显著降低,且呈剂量依赖性。结论：PNS可通过抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞总胶原分泌及细胞增殖,从而参与延缓肾间质纤维化的进程,改善肾脏功能。 相似文献
3.
胸腺素α1对离体培养的鸡脾脏淋巴细胞分泌功能及基因表达的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
采用MTT比色法、RIA法和相对半定量RT-PCR法分别研究了不同浓度的人工合成胸腺素α1(Tα1)对离体培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖转化、白细胞介素2(IL-2)和白细胞介素6(IL-6)分泌及基因表达的影响. 结果表明,采用1和10 μg·mL-1的Tα1处理细胞36 h,能显著增加由ConA诱导24 h的脾脏淋巴细胞的增殖转化率,显著提高细胞培养上清液中IL-2的含量(P<0.05),而对IL-6的分泌无显著影响(P>0.05);同时发现,在10 μg·mL-1 Tα1处理淋巴细胞36 h后用ConA诱导12 h,对淋巴细胞IL-2和IL-6基因的表达无显著影响(P>0.05). 提示Tα1可通过促进IL-2的分泌,进而促进脾脏淋巴细胞增殖转化,而且其可能主要在基因转录后翻译水平上对IL-2分泌发挥影响. 相似文献
4.
对人乳各泌乳阶段蛋白质含量和氨基酸组成进行了研究。结果表明，人乳蛋白质含量、游离氨基酸含量随泌乳期延长而变化，其中泌乳前３ｄ的蛋白质含量较其它阶段高（ｐ＜０．０５）。人乳总蛋白质在初乳期为２．９％，而常乳则为１．３％～１．４％。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明，人乳蛋白质构成与牛乳、婴儿配方奶粉比较具有明显的差异，即人乳中缺少αｓ１－酪蛋白和β－乳球蛋白。构成人乳蛋白质的氨基酸以谷氨酸为最高，亮氨酸次之，然后为天门冬氨酸、异亮氨酸、脯氨酸，不含牛磺酸。而人乳中游离氨基酸以初乳最高，是常乳的２倍，在各泌乳阶段均以牛磺酸和谷氨酸含量最高，在泌乳的前４ｄ牛磺酸为第一位游离氨基酸，随泌乳期延长而下降（４４．３ｍｇ·Ｌ－１～２８７．９ｍｇ·Ｌ－１），成为第二位游离氨基酸；谷氨酸则与牛磺酸相反，随泌乳期延长由第二位升为第一位（６２．３ｍｇ·Ｌ－１～１６８．９ｍｇ·Ｌ－１）。 相似文献
5.
【目的】研究中药复方灌注液及其中的单味中药提取物对原代培养的奶牛乳腺上皮细胞增殖及总蛋白含量的影响。【方法】采用原代组织块贴壁法获得奶牛乳腺上皮细胞,以质量浓度为5,10,15和20mg/mL的中药复方灌注液以及紫花地丁、黄芪、泽兰、鸡血藤、诃子提取物,分别作用于对数生长期的奶牛乳腺上皮细胞,确定最适宜中药质量浓度,采用该质量浓度提取物处理对数生长期的乳腺上皮细胞,并分别在处理的1,3和5d时取样,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞活性,并测定细胞分泌的总蛋白含量。【结果】通过组织块贴壁与胰蛋白酶消化法相结合,得到较纯化的奶牛乳腺上皮细胞。泽兰、鸡血藤、复方灌注液在质量浓度为10mg/mL时能极显著促进奶牛乳腺上皮细胞增殖(P<0.01),泽兰、鸡血藤、诃子、复方灌注液在质量浓度为15mg/mL时能极显著提高奶牛乳腺上皮细胞总蛋白的含量(P<0.01)。【结论】适宜质量浓度的中药作用于奶牛乳腺上皮细胞,可以促进细胞的生长及其总蛋白的分泌。 相似文献
6.
【目的】探讨TGF-β1对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡和HSP70蛋白表达的影响。【方法】TGF-β1作用乳腺上皮细胞不同时间,收集细胞及培养液,应用MTT检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡率、比色法检测LDH活性、琼脂糖凝胶电泳检测DNA完整性、Western bolt 技术分析HSP70蛋白的表达量。【结果】1、5、10 ng•ml-1的TGF-β1均能抑制乳腺上皮细胞的增殖,且随浓度增加抑制作用加大,呈现剂量依赖性,其中10 ng•ml-1 TGF-β1组与对照组差异显著（P＜0.05）;10 ng•ml-1 TGF-β1作用于乳腺上皮细胞, 随着作用时间的延长,细胞凋亡率逐渐升高,其中6、12和24 h与对照组相比差异极显著（P＜0.01）;LDH活力随作用时间延长而升高,12、24 h与对照组差异极显著（P＜0.01）;DNA完整性随 TGF-β1作用时间的延长发生不同程度降解;TGF-β1作用2～6 h细胞大量表达HSP70,6 h达到高峰,而后下降,2～12 h的表达量均极显著高于对照组（P＜0.01）。【结论】TGF-β1可以抑制奶牛乳腺上皮细胞的增殖,具有浓度依赖性。10 ng•ml-1 TGF-β1可以显著增加细胞凋亡率,提高细胞培养液中LDH活力,使细胞DNA发生不同程度的降解,同时HSP70蛋白随TGF-β1作用时间发生显著的表达变化。本试验结果表明,TGF-β1可以以促进上皮细胞凋亡的方式,促进奶牛乳腺发生退化。 相似文献
7.
《中国畜禽种业》2005,(11)
20050200IGF-1、TGF-α、bFGF对猪卵母细胞体外成熟和卵裂的影响(刘珠果,尚书江,阎新龙等)研究了IGF-1、bfgf、TGF-α3种细胞因子单独或者联合作用对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后卵裂的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明,3种细胞因子对卵母细胞的成熟和激活后卵裂现双重效应:(1)20ng·ml-1的IGF-I的成熟率和卵裂率显著高于对照组和10、30、40、50、100ng·ml-1组。对照组、10、20、30、40、50、100ng·ml-1组的成熟率和卵裂率分别为71.1%、62.5%;77.5%、59.1%;85.3%、85.4%;61.9%、54.3%;58.6%、53.1%;44.4%、4… 相似文献
8.
IGF-I、TGF-α、bFGF对猪卵母细胞体外成熟和卵裂的影响 总被引：7，自引：0，他引：7
研究了IGF-I、bFGF、TGF-α 3种细胞因子单独或者联合作用对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活后卵裂的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明，3种细胞因子对卵母细胞的成熟和激活后卵裂呈现双重效应（1）20 ng·ml-1的IGF-I的成熟率和卵裂率显著的高于对照组和10、30、40、50、100 ng·ml-1组[（85.3 ±2.11) %，（85.4±2.81）%；（71.1 ±1.91）%，（62.5 ±0.98）%；（77.5 ±2.5）%，（59.1 ±3.93）%；（61.9 ±1.72）%，（54.3 ±3.48）%；（58.6 ±4.26）%，（53.1 ±1.23）%；（44.4 ±5.10）%，（49.8 ±3.55）%；（33.9 ±3.48）%，（46.1 ±3.59）%，P <0.05)，当IGF-I的浓度达到100 ng·ml-1时,成熟率（33.9±3.48）%和卵裂率（46.1±3.59）% 降低，与其它各组相比差异显著（P < 0. 05）。（2）20 ng·ml-1的bFGF的成熟率（85.0 ±1.70）%和卵裂率（85.0±2.82）%最高,和其它各组相比,差异显著（P < 0.05）。（3）15 ng·ml-1的TGF-α的成熟率（86.9±0.46）%和卵裂率（86.3±2.01）%最高,和其它各组相比,差异显著（P < 0.05）。（4）15 ng·ml-1TGF-α和20 ng·ml-1bFGF联用组，卵母细胞成熟率和分裂率显著高于20 ng·ml-1 bFGF和20 ng·ml-1 IGF-I联合组；15 ng·ml-1TGF-α和20 ng·ml-1 IGF-I联合组；与20 ng·ml-1 bFGF、20 ng·ml-1 IGF-I和15 ng·ml-1 TGF-α三者联用组。[（89.2±1.44）%和（88.8±0.17）%.（75.6±0.98）%和（78.3±1.65）%；（77.2±2.54）%和（80.2±2.26）%；（76.4±1.28）%和（77.4±3.73）%，P <0.05]。 相似文献
9.
乳清酸蛋白 (WAP)和 β -酪蛋白 (β -Casein)是哺乳动物乳汁中的主要蛋白质 ,其基因 5′侧翼区常作为乳腺定位表达的调控序列。表达载体pSVL -WAP -tPA和pSVL - βb -tPA分别含 1.1kb的大鼠WAP启动子和 0 .6kb的牛β Casein启动子序列及t-PAcDNA。采用基因直接注射方法将 2种表达载体分别注入家兔乳腺中。溶圈试验结果显示 ,两种表达载体均能在兔乳腺细胞中得到表达 ,且以分娩后第 4天的乳汁中表达水平最高 ,分别为 45 0ng·mL-1和390ng·mL-1。为进一步研究t-PA基因乳腺定位表达调控和建立t-PA乳腺生物反应器奠定了基础。 相似文献
10.
为研究刺五加苷E(Eleutheroside E)对仔猪小肠上皮(IPEC-J2)细胞紧密连接蛋白及炎性细胞因子m RNA表达量的影响。在正常DMEM/F12培养基中分别添加0,0. 05,0. 1,0. 2 mg/m L的刺五加苷E,测定刺五加苷E对IPEC-J2细胞增殖活性的影响。选择对IPEC-J2有显著作用的刺五加苷E浓度为有效浓度,研究刺五加苷E对仔猪小肠上皮细胞的机械屏障和免疫屏障的影响。细胞增殖试验结果表明,0. 1 mg/m L的刺五加苷E对IPEC-J2有极显著的增殖作用(P0. 01)。选择0. 1 mg/m L的刺五加苷E处理剂量对IPEC-J2的主要紧密连接蛋白和细胞因子进行基因表达水平测定,采用实时荧光定量PCR方法测定紧密连接Claudin-3、Occludin和ZO-1,抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β,炎性细胞因子IL-6、TNF-α、INF-γ的m RNA相对表达量。试验结果表明:刺五加苷E上调了仔猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白Claudin-3和ZO-1的基因表达(P0. 05),在细胞免疫方面下调炎性细胞因子IL-6、TNF-α、INF-γ的基因表达;上调了抗炎性细胞因子IL-10和TGF-β的基因表达。这说明刺五加苷E能够改变细胞间紧密连接蛋白和细胞因子的基因表达,进而促进肠道机械和免疫屏障功能的完整性,有益于仔猪肠道的健康发育。 相似文献
11.
牛乳中三种雌激素残留的HPLC检测法 总被引：2，自引：0，他引：2
建立了牛奶中3种雌激素残留量(雌二醇、己烯雌酚、雌酮)的HPLC(高效液相色谱)检测方法.得到色谱条件为流动相:乙腈-水(体积比为1∶1);检测波长:230 nm;流速1.0 mL.min-1.采用该方法测定了市售鲜牛奶中3种雌激素的残留量,结果表明:其分离效果良好,平均回收率范围82.2%~95.5%,相对标准偏差为2.0%~4.7%,最低检出限达1.0~2.0 ng.mL-1.该方法具有灵敏、准确、精密、无杂质干扰等优点. 相似文献
12.
用含有不同浓度半胱胺的肉汤培养基体外培养嗜热链球菌,每小时测定其OD值(550nm),绘制曲线,观察对嗜热链球菌活性的影响。结果表明,半胱胺的浓度为3.2mg·mL-1时,抑制率为11.72%(P<0.05);半胱胺的浓度为5.0mg·mL-1时,抑制率为17.15%(P<0.01);半胱胺的浓度为0.05mg·mL-1时,促进率为9.66%(P<0.05);半胱胺的浓度为0.1、0.2、0.4、0.5、0.8、1.6mg·mL-1时,差异不显著(P<0.05)。 相似文献
13.
以羟丙基-β-环糊精化合物做辅料对伊曲康唑分子进行包合,制成肌肉注射剂,以山羊为试验动物,用高效液相色谱-紫外检测器对伊曲康唑肌肉注射剂的药代动力学进行研究。结果表明,伊曲康唑肌肉注射后最高药物浓度(Cma)x为226.67ng·mL-1;达峰时间Tmax为3h;血药浓度-时间曲线面积(AUC)48h为0.33898×104ng·h-1·mL-1;血浆药物浓度维持时间357h。由此可知伊曲康唑包合剂肌肉注射后可以达到一定的有效血药浓度,可用于皮肤真菌病的治疗。 相似文献
14.
以环境相关浓度(10、100、1000 ng·L-1)的多效唑对褐菖鮋进行50 d的水体暴露后,检测多效唑对褐菖鮋脾脏ACP、SOD、LSZ、POD等免疫指标的影响。结果显示:各指标都出现不同程度的下降,其中LSZ、POD对多效唑呈浓度依赖性下降趋势,LSZ在10 ng·L-1浓度组下降不显著(P>0.05),100、1000 ng·L-1浓度组出现显著性下降(P<0.05);POD活性在各药物组都出现显著性下降(P<0.05);ACP、SOD活性在10、100 ng·L-1组均出现显著性下降(P<0.05),只在高浓度的1000 ng·L-1组下降不显著(P>0.05)。综上表明,多效唑的暴露对褐菖鮋免疫系统的影响超出其耐性阈值,对其免疫系统的功能造成了损伤。 相似文献
15.
间接竞争ELIS法分析了自制抗土霉素抗体的灵敏度与特异性。结果表明,所得抗体的灵敏度和特异性都较好,和其它结构相似或相近物质的交叉反应率较低。以自制抗体建立的间接竞争ELISA法对牛奶中土霉素的残留量进行了检测,所建立的间接竞争ELISA方法对土霉素的检测范围为5~200 ng.mL-1,相关系数r=0.9951。 相似文献
16.
HPLC法测定犬血浆及复方麻醉制剂中强痛宁含量的研究 总被引：2，自引：1，他引：1
为建立高效液相色谱法(HPLC)-紫外检测器测定犬血浆和复方麻醉制剂(QFM)中强痛宁浓度的方法,本试验采用外标法,以ZorbaxSBC18(4.6mm×250mm,5μm)为固定相,乙腈与去离子水(含0.015mol·L-1的磷酸二氢钠)30:70(v/v)为流动相,流速1.0mL·min-1,紫外检测波长195nm。结果表明,标准曲线在2~100ng·mL-1范围内线性关系良好(r2=0.9975~0.9986),最低检测限浓度为2ng·mL-1,犬血浆和QFM中强痛宁的平均回收率分别为(92.75±3.96)%、(92.50±4.32)%;日内变异系数(4.01±1.38)%、(4.28±1.59)%;日间变异系数(4.60±2.0)%、(44.46±1.87)%。说明本方法简便、准确、检测浓度低,能够满足犬血浆中低浓度强痛宁的测定及临床药代动力学研究的要求。 相似文献
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通过添加不同浓度的二肽:蛋氨酸-蛋氨酸、赖氨酸-赖氨酸、蛋氨酸-赖氨酸、赖氨酸-蛋氨酸二肽,用CASY细胞活力分析仪检测奶牛乳腺上皮细胞的增殖和活力,用荧光定量PCR、HPLC检测β-酪蛋白的基因表达情况,确定培养24 h时四种二肽的最佳添加浓度分别为80、100、50、80μg.mL-1。以最佳二肽浓度添加时细胞的增殖分别为1.28×105、1.66×105、1.79×105、.85×105cells.mL-1,活力分别为93.72%、95.59%、94.35%、95.65%,培养液中β-酪蛋白含量分别为1.34、1.38、1.44、1.63 mg.10-5cells。为进一步利用小肽提高乳蛋白产量、调控乳蛋白合成提供理论依据。 相似文献
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初乳是自然界中唯一含有两类主要生长因子(类胰岛素生长因子和转化生长因子)的天然产物。乳源生长因子对人体肠道具有显著的生理功能,可使新生幼体完成从胎盘营养到肠道营养的转变。本研究以CaCO-2细胞系作为人体肠道细胞模型,测定初乳乳清、乳清超滤物和乳清阳离子交换提取物对人体肠道细胞代谢活性和DNA复制能力的影响。结果表明,初乳乳清超滤物(截留分子质量990ku)0.01μg·mL-1条件下,具有最高的促细胞代谢活性,为10%胎牛血清的1.70倍。乳清阳离子交换提取物在更低的浓度下具有活性。酸乳清100ku超滤滤出物在0.01μg·mL-1质量浓度下,具有10%胎牛血清2.57倍促DNA复制活性。 相似文献
19.
【目的】确定FSH和雌激素联合作用是否可通过ERK1/2级联调节培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中Skp2的表达。【方法】以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料,通过添加各种信号通路的抑制剂,应用Western blotting和实时荧光定量PCR检测Skp2蛋白、mRNA的表达。【结果】FSH（50 ng·mL-1）和17β-雌二醇（10-9 mol·L-1）联合作用时以时间依赖的方式促进了Skp2蛋白和mRNA的表达（P＜0.05）,这一作用在30 min时到达高峰;FSH（50 ng·mL-1）、17β-雌二醇（10-9 mol·L-1）和forskolin单独作用均促进了Skp2蛋白和mRNA的表达（P＜0.05）,FSH（50 ng·mL-1）和17β-雌二醇（10-9 mol·L-1）联合作用对Skp2表达的影响与FSH或17β-雌二醇（10-9 mol·L-1）单独作用无显著差异（P≥0.05）,而环磷酸腺苷抑制剂（Rp-cAMP）、蛋白激酶A（PKA）抑制剂（H-89）、L-Ca2+离子通道抑制剂（verapamil）和ERK1/2抑制剂（U0126）单独作用时对Skp2蛋白和mRNA的表达与空白对照相比无显著影响（P＞0.05）,但都抑制了FSH（50 ng·mL-1）与17β-雌二醇（10-9 mol·L-1）联合作用对Skp2蛋白和mRNA表达的影响（P＜0.05）。H-89、verapamil单独作用对ERK1/2（细胞外信号调节的蛋白激酶1/2）活性没有影响,但降低了FSH（50 ng·mL-1）和17β-雌二醇（10-9 mol·L-1）联合作用对ERK1/2活性的影响。【结论】 FSH与17β-雌二醇联合作用激活了cAMP-PKA级联和Ca2+内流,而PKA和Ca2+内流又通过影响ERK1/2的活性进而影响Skp2的表达。 相似文献