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两种常用激素组合下棉花体细胞胚胎发生过程的组织学观察 总被引：4，自引：1，他引：3
MSB培养基添加两种常用植物激素组合，Indole-3-butyric acid (IBA) + kinetin (KT)和2, 4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4-D) + KT，分别命名为IK和DK处理用来诱导陆地棉体细胞胚胎发生。陆地棉品系YZ1下胚轴切段作为外植体在诱导培养基上培养4周后，继代到分化培养基上促进体细胞胚胎发生。结果表明，两种处理均有体细胞胚胎发生，其中IK处理上外植体嫁接33 d后就可见体细胞胚出现，分化率高达97.6%，大多数外植体表现为体细胞胚较胚性愈伤早出现。DK处理中体细胞胚胎发生慢，体细胞胚都是经过明显的胚性愈伤发育而来，胚性愈伤分化率明显低于IK处理，仅为28.6%。此外，IK处理中的外植体在培养过程中大部分都出现了须根，而DK处理中则没有。两种处理中出现了两种不同的体细胞胚胎发生过程，组织学观察结果表明DK和IK处理中的体细胞胚分别主要起源于初生形成层和皮层。 相似文献
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抗坏血酸(ascorbic acid, ASA)可以调节水曲柳(Fraxinus mandshurica)体胚发生外植体的褐化和体细胞胚发生(somatic embryogenesis, SE)的诱导率。为了确定体胚发生最佳的处理浓度，本研究基于前期基础细化ASA处理的浓度梯度，检验来自不同地点不同母树的水曲柳成熟合子胚外植体对处理的响应。结果表明，低浓度(5～20 mg/L)和高浓度(150～200 mg/L)的ASA会抑制外植体的褐化和体胚发生，90～120 mg/L的ASA会促进外植体的褐化和体胚发生；110 mg/L的ASA为诱导水曲柳成熟合子胚子叶外植体体胚发生的最佳处理浓度，体胚发生率比对照提高65.05%，褐化发生时间比对照缩短5 d，体胚发生时间比对照缩短9 d；体胚大部分发生于3/4褐化的外植体上，占总体胚发生数的65.17%；未褐化外植体的体胚发生数仅占总体胚发生数的0.67%；来源于不同地点和同一地点不同母树的外植体的体胚发生率差异较大，不同地点外植体体胚发生率排序为东北林业大学哈尔滨实验林场>韦河青山种子园>临江金山种子园；同一地点不同母树来源外植体... 相似文献
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《分子植物育种》2021,(17)
以牡丹品种‘凤丹白’的胚轴为外植体,诱导体细胞胚发生,研究不同生长调节剂以及低温预处理对牡丹体细胞胚发生的影响,并对体胚发生过程进行组织细胞学观察。结果表明,体细胞胚在MS+IAA1 mg/L+TDZ 3 mg/L+KT 0.5 mg/L培养基上诱导效果最好,诱导率为40.48%,体胚在MS培养基上萌发率为39.04%,在培养基MS+6-BA 0.1 mg/L+CH (水解酪蛋白) 1.0 g/L+活性炭0.5 g/L上的进一步萌发率为35.55%,在MS+IAA 2 mg/L+GA32 mg/L上4℃低温预处理5 d,可以有效提高体胚发生,体胚诱导率提高11.42%。组织切片可以清晰观察到体胚内起源,胚性愈伤组织历经球形、心形、鱼雷形胚后发育成子叶胚。 相似文献
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不同凝固剂对陆地棉体细胞胚胎发生和植株再生的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
以陆地棉种质系珂字312和陆地棉标准系TM-1为材料,结合优化的陆地棉体细胞培养体系,系统地研究了琼脂、Gelrite和Phytagel3种培养基凝固剂对愈伤组织的诱导、胚性愈伤的增殖、体细胞胚状体的发生和植株再生的影响。结果表明,用Phytagel作为培养基的凝固剂,可显著改善陆地棉体细胞培养过程中的褐化问题,并具有提高胚性愈伤组织增殖速度、体细胞胚胎发生和植株再生频率等作用。Gelrite虽也能改善棉花体细胞培养中的褐化问题,但因水化现象严重而影响胚性愈伤组织增殖和体细胞胚状体发生,其效果不如Phy-tagel。因此,在陆地棉体细胞培养过程中的胚性愈伤组织诱导、体细胞胚状体发生和植株再生过程中,宜用Phytagel作为培养基的凝固剂,而无菌苗培养和愈伤组织诱导仍可以选用琼脂凝固剂。 相似文献
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TDZ对橡胶树花药愈伤组织诱导和体细胞胚发生的影响 总被引：3，自引：3，他引：0
为了提高橡胶树优良品种的愈伤组织诱导和体细胞胚发生的频率,促进其花药植株再生体系的优化,以橡胶树品种‘云研73-477’、‘热垦525’和‘云研77-2’的花药为外植体,研究不同浓度的TDZ对愈伤组织诱导和细胞胚胎发生能力的影响。结果表明,在愈伤组织诱导实验中,MS+TDZ 0.2 mg/L+ 6-BA 1 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+椰子水50 mL/L+蔗糖70 g/L效果最好,诱导率均达到最大,分别为98%、98.67%、28.6%,当TDZ浓度逐步升高时,其诱导率又有所下降。在体细胞胚诱导实验中,愈伤组织诱导阶段加入TDZ对体细胞胚的发生有抑制作用;将愈伤组织转移到不含TDZ的培养基中继代增殖后,体细胞胚的诱导率随继代次数的增加呈上升趋势;愈伤诱导阶段使用的TDZ浓度越低越利于体细胞胚的分化;在体胚诱导阶段以TDZ代替KT后,体细胞胚诱导率较低,且分化出的体胚为畸形胚。这表明TDZ虽然有利于愈伤组织的产生和生长,但不利于体细胞胚的发生。 相似文献
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水曲柳子叶和下胚轴愈伤组织和体胚的诱导 总被引：2，自引：0，他引：2
《分子植物育种》2015,(7)
为了建立水曲柳愈伤组织诱导和体胚发生体系,并为体胚发生分子机理研究提供有效培养系统,本研究以水曲柳成熟合子胚和未成熟合子胚的子叶和下胚轴为外植体,探讨了灭菌剂及其处理时间对外植体灭菌效果的影响和激素浓度对愈伤组织诱导和体胚发生的影响。结果表明:外植体处理试剂和消毒时间是10%Na Cl O处理1 min最为适宜;以MS1/2(MS所有成分均减半)为基本培养基,NAA 3 mg/L+BA1.5 mg/L为水曲柳未成熟合子胚子叶和下胚轴诱导愈伤组织和体胚发生的最佳激素组合,诱导率分别为6.5%和9.7%;NAA 5 mg/L+BA 2 mg/L为水曲柳成熟合子胚子叶与胚轴诱导愈伤组织和体胚发生的最佳激素组合,诱导率分别为29.3%和19.5%。研究结果补充和突破了前人研究只从水曲柳合子胚子叶获得体胚发生和只从叶柄获得有效愈伤组织增殖的结果,并为揭示体胚发生机理有效愈伤组织和体胚发生系统的建立奠定了基础。 相似文献
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大豆体细胞胚胎发生系统组织学研究 总被引：1，自引：0，他引：1
大豆体细胞可以诱导发生在形态和结构上类似胚结构的胚状体。利用大豆体细胞胚发生系统进行大豆遗传转化,具有转化频率高、同步性好、转基因植株嵌合体少等诸多优点。对经根癌农杆菌侵染后,在含卡那霉素筛选培养基上生长的大豆未成熟子叶胚性细胞的发生、分化及发育进行了组织学研究。结果表明,体细胞胚以非芽体方式发生。胚性细胞可以从外植体表层或表层下1-2层细胞开始发生。随着胚性细胞的分裂,周围细胞开始退化解体,并形成具有类似胚柄结构的胚状体。之后,呈球形的胚状体突出于表皮之外,并依次发育成心形胚、鱼雷形胚和子叶形胚。以期为利用大豆未成熟子叶诱导体细胞胚发生系统高效转化体系的建立提供理论依据。 相似文献
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欧洲七叶树体细胞胚胎发生研究 总被引：5，自引：0，他引：5
以欧洲七叶树幼嫩叶片为外植体，在离体条件下成功诱导出体细胞胚胎(体胚)。研究结果表明，诱导愈伤组织的适宜培养基是MS 2，4-D 2mg／L KT0．2mg／L，MS BA 8mg／L NAA 1mg／L有利于胚性愈伤的诱导和增殖，添加ZT2mg／L或BA 5mg／L和NAA0．2mg／L的MS培养基有利于体胚发育和成熟。 相似文献
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为了解析植物生长调节剂与水曲柳体细胞胚胎发生普遍伴随外植体褐化现象的关系,本研究以水曲柳未成熟合子胚子叶为外植体进行体胚发生,对细胞分裂素BA和生长素NAA的影响效应进行了探讨。结果表明,(1)当培养基中添加0.5mg/LBA和1.5mg/LNAA时,产生体胚的外植体褐化率达到91.5%;褐化外植体的体胚发生率达50.8%,而未褐化外植体的体胚发生率仅为9.6%;(2)添加NAA是水曲柳未成熟合子胚子叶外植体褐化的充分必要条件,即:无NAA存在时,未成熟合子胚子叶外植体不发生褐化,有NAA存在时才会发生褐化;只添加NAA外植体会产生褐化,但褐化程度低于同时添加BA,说明BA是促进褐化的条件;(3)添加NAA与BA是水曲柳未成熟合子胚外植体发生体胚的必要条件,即不添加生长素和细胞分裂素时无体胚发生;(4)NAA与BA的交互作用对褐化率的影响差异显著,但对体胚发生率的影响差异不显著,说明BA和NAA处理对外植体褐化的作用与对体胚发生的作用不同。由此可知:水曲柳未成熟合子胚子叶外植体的褐化和体细胞胚胎发生均受细胞分裂素BA和生长素NAA的影响,但BA和NAA分别调控了外植体的褐化和体胚的发生,与二者伴随的现象没有关系。本研究结果对进一步深入解析水曲柳体胚发生伴随外植体褐化的生物学机理提供了科学依据。 相似文献
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绿色棉新彩棉7号体细胞胚胎发生及其植株再生 总被引：1，自引：1，他引：0
以绿色棉新彩棉7号的子叶、下胚轴为外植体,MSB(MS培养基附加B5维生素)基本培养基附加不同激素组合,诱导愈伤组织及调控分化,通过体细胞胚胎发生方式获得再生植株.结果表明:0.1 mg· L-1 KT(Kinetin,激动素)+ 0.1 mg·L-12,4-D(2,4-dichlorophenoxyacetic,2,4-二氯苯氧乙酸)为诱导愈伤组织的最适植物激素组合,不同外植体处理出愈率均达到100％,但下胚轴纵切面背向培养基放置培养更有利于诱导愈伤组织形成;分化调控阶段的最佳植物激素组合为0.15 mg·L-1 KT+ 0.3 mg·L-1 IBA(Indole-3-butyric acid,吲哚丁酸),胚性愈伤分化率可达23.33％; MSB中去除NH4NO3同时KNO3加倍,附加0.5 g·L-1Asn(Asparagine,天冬酰胺)和lg· L-1 Gln(Glutamine,谷氨酰胺),胚性愈伤可进一步分化获得体细胞胚,将成熟的子叶胚接种于1/2MS获得完整的再生植株. 本研究通过体细胞胚发生途径获得了新彩棉7号的再生植株,为天然彩色棉基因工程研究奠定了一定基础. 相似文献
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Secondary somatic embryogenesis and applications in plant breeding 总被引：17，自引：0，他引：17
Summary Secondary somatic embryogenesis is the phenomenon whereby new somatic embryos are initiated from somatic embryos. Such cultures have been described in at least 80 Gymnosperm and Angiosperm species. In the initial step (primary somatic embryogenesis) such cultures have to be started from plant explants. In general, primary somatic embryogenesis from vegetative plant explants is, indirect and mostly driven by auxin (AUX) or auxin and cytokinin (AUX/CYT) supplemented media, whereas, from zygotic embryos it is direct and driven, to a larger extent, by CYT or growth regulator free media. Primary somatic embryogenesis from floral plant explants is between these two extremes. Indirect and direct somatic embryogenesis should be seen as two extremes of one continuum: in indirect somatic embryogenesis the embryos develop up to the (pre)-globular stage and in direct somatic embryogenesis to mature stages before they are subjected to secondary embryogenesis. In general, secondary embryogenesis requires no growth regulators in species with CYT driven primary embryogenesis. Whereas, continuous exposure to growth regulators is needed in species with CYT/AUX or AUX driven primary embryogenesis.In most species somatic embryos can be converted into shoots, although the frequencies are mostly low. In general, somatic embryos induced by growth regulator free or CYT supplemented media meet more difficulties in shoot development than embryos induced by AUX supplemented media. Applications of secondary somatic embryogenesis for plant breeding are discussed. 相似文献
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The HMW Glutenin Subunit and Gliadin Compositions of German-Grown Wheat Varieties and their Relationship with Bread-Making Quality 总被引：10，自引：0，他引：10
An in vitro system for the initiation of somatic embryogenesis and plant regeneration of spring- and winter-type rye has been developed. The optimal developmental stage of immature embryos to be used as explants is the late stage of spherical coleoptile when the tissue turns milky in colour and the coleoptile is enlarged but spherical. The type and concentration of auxin in the induction medium is of importance for obtaining high efficiency of somatic embryogenesis. CC-medium high 30 μM Dicamba resulted in well developed somatic embryos in large umbers. Positive effects on the efficiency, intensity and speed of development of somatic embryos have been observed by the addition of coconut water to CC-medium, replacing agar by agarose and culturing the explants in low light intensity. Following a “step by step” optimization, culture conditions have been defined giving rise to a 90—100% efficiency of somatic embryogenesis and a high number of regenerated plants. 相似文献
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桃儿七不同外植体愈伤组织诱导研究 总被引：1，自引：1，他引：0
旨在建立一种桃儿七愈伤组织诱导培养体系,筛选出最佳诱导培养基和最适外植体。以MS为基本培养基,采用正交试验法研究6-BA、2,4-D和TDZ 3个因素及其组合对桃儿七成熟叶片、叶柄和茎段愈伤组织诱导率的影响。研究结果表明：3种外植体均可诱导出愈伤组织,叶片愈伤组织诱导率最高,达44.3%,其次是叶柄,达24.7%,茎的愈伤组织诱导率为18.1%,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+2,4-D 1.5mg/L,细胞分裂素6-BA和TDZ联合使用有利于提高愈伤组织诱导率并改善愈伤组织质地。与茎段和叶片所得愈伤组织相比,以叶柄为外植体获得的愈伤组织质地较疏松,呈明显的黄绿色颗粒状,更适合进一步细胞培养和诱导分化。本研究建立了一种高效的桃儿七愈伤组织诱导培养体系,为桃儿七体细胞胚的培养提供了材料。 相似文献
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为了给五加科植物体细胞胚发生体系的建立提供理论依据,推动五加科植物体细胞胚研究的开展,本研究总结了五加科植物体细胞胚发生方式、体细胞胚发生的影响因素（包括外植体类型、培养基类型、植物生长调节剂种类、渗透胁迫）、体细胞胚发生的生理生化及次生代谢的研究现状。提出今后研究重点在以下几方面：（1）进一步对五加科植物体细胞胚发生的影响因素研究。（2）利用体细胞胚发生方式对一些重要的五加科植物进行次生代谢物的提取、代谢途径基因调控等的研究。（3）对五加科体细胞胚发生机制的分子基础需进一步研究。 相似文献
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Long-term conservation of embryogenic competence by induction and disorganization of somatic embryos in carrot 总被引：1，自引：0，他引：1
K. Nomura 《Plant Breeding》2003,122(4):343-346
A simple procedure was established to maintain the rate of somatic embryogenesis in carrot cell strains. Secondary cell strains were induced by the disorganization of heart‐shaped somatic embryos by transferring them into a medium containing 2,4‐dichlorophenoxyacetic acid and the rate of somatic embryogenesis was restored to the original level. It was possible to keep the original rate of embryogenesis by repeated induction and disorganization of somatic embryos, as the restored rate of embryogenesis decreased gradually during subcultures. In the carrot cell suspension culture used in this work, it was possible to keep high rates of somatic embryogenesis for at least 3 years by using this method at every 50th subculture. The method presented here should be useful to maintain regeneration competence in certain important cell strains. 相似文献
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邓恩桉再生系统的研究 总被引：1，自引：1，他引：0
邓恩桉生长速度快、耐寒能力较强,近年来已成为中国南方地区的重要造林树种,但其种子主要依赖进口且价格昂贵,因此进行再生体系的研究对解决种苗问题具有重要意义。本研究以种子和腋芽为外植体建立了邓恩桉再生体系,研究结果如下：采用无菌播种后萌发产生的胚轴和子叶进行体细胞胚胎发生途径培养,诱导和分化的最佳培养基配方为1/2MS+6-BA0.5+NAA0.2+IBA0.5,芽继代培养周期25天,扩繁系数3.1;采用邓恩桉腋芽进行的器官发生途径培养,诱导和分化的最佳培养基配方为1/2MS+6-BA0.5+NAA0.2+IBA0.5,继代培养周期和扩繁系数与胚胎发生途径基本一致。将通过2种途径繁殖的芽苗转接到生根培养基1/2MS+NAA0.2+IBA0.5上,7天后陆续生根,25天后生根率70%~71%。试验结果为邓恩桉组培快繁及工厂化育苗提供了有力的理论和实践基础。 相似文献
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唐菖蒲体细胞胚的诱导及植株再生 总被引：1，自引：0，他引：1
以唐菖蒲球茎芽切片为外植体,经体细胞胚发生途径,进行胚性愈伤组织诱导、胚状体的诱导、胚状体发育过程及植株再生的研究。胚状体诱导培养基为MS＋2,4-D1.0mg/L＋TDZ0.2mg/L,诱导率为68.3%;将产生的胚状体首先接种于MS培养基使其充分发育,之后转入MS＋6-BA2.0mg/L培养基中诱导发芽,在转入MS培养基中使其形成完整植株。采用石蜡切片法和临时压片法对胚状体的发育过程进行了观察发现,首先外植体表层薄壁细胞经脱分化恢复分生能力,形成愈伤组织,随后在愈伤组织表面形成许多瘤状突起即胚性细胞团,胚性细胞团继续发育成球形胚、盾形胚,最后发育成熟形成完整植株。 相似文献