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主要探讨了适合烟草疫霉菌丝生长、毒素产生的培养条件.结果表明在6种合成培养基中,生理培养基最适于菌丝生长,马铃薯晚疫病菌培养基最适于毒素产生.采用生理培养基进行液体培养时,毒素产生的最适pH值为9～10,培养时间为26天以上.此外,在刺伤条件下,烟草疫霉毒素可使番茄、辣椒幼苗致萎,还可使柑桔幼嫩叶片形成坏死斑.因此,利用该毒素来鉴别和筛选抗病品种是可行的. 相似文献
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根癌农杆菌介导烟草K326遗传转化体系优化 总被引：2，自引：0，他引：2
[目的]优化根癌农杆菌介导烟草K326遗传转化体系。[方法]以烟草无菌苗的叶片为外植体,通过农杆菌介导法对其遗传转化体系进行了优化研究。[结果]外植体在MS＋2mg/L6-BA＋0.2mg/LIAA培养基上进行2d预培养后,用农杆菌GV3101（浸染浓度为OD600=0.6）浸染5min,转化效率最高,达63%;经过PCR检测初步证明nptII基因已整合到烟草再生植株中。[结论]该研究建立了高效烟草K326叶片农杆菌介导的遗传转化体系。 相似文献
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[目的]优化根癌农杆菌介导烟草K326遗传转化体系。[方法]以烟草无菌苗的叶片为外植体,通过农杆菌介导法对其遗传转化体系进行了优化研究。[结果]外植体在MS＋2 mg/L6-BA＋0.2 mg/L IAA培养基上进行2 d预培养后,用农杆菌GV3101（浸染浓度为OD600=0.6）浸染5 min,转化效率最高,达63%;经过PCR检测初步证明npt II基因已整合到烟草再生植株中。[结论]该研究建立了高效烟草K326叶片农杆菌介导的遗传转化体系。 相似文献
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就发根农杆菌R1601转化金荞麦过程中感染时间和感染浓度（OD600值）的组合、不同外植体、第二次活化时所用YEB的pH值及乙酰丁香酮的添加方式对转化效率的影响进行了探讨,结果表明：白色疏松愈伤组织在OD6000.2-0.4、pH5.4-5.8的工程菌液中浸泡5-7 min,在1/2MS＋AS（100μmol/L）培养基上共培养2-4 d,感染率可高达80%. 相似文献
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在由农杆菌介导的叶盘法转化烟草的研究中,将含有重组质粒的农杆菌过夜培养后按1∶100接种于新鲜的LB培养液中培养6h至OD600≈0.6时,取菌液经梯度稀释后分别对大小约0.5cm2的烟草叶片进行不同时间浸染。结果表明,用经20倍稀释后的菌液浸染的烟草叶片其转化率达97%以上,且不同时间浸染的处理间无显著差异,培养基中激素浓度以6-BA 1.5mg/L IAA 0.5mg/L为宜。 相似文献
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农杆菌介导的烟草瞬时表达试验条件优化 总被引：1，自引：0，他引：1
以烟草叶片为试材,用转入植物表达载体pBI121的根癌农杆菌EHA105进行遗传转化。通过分析菌液不同浓度、侵染时间、乙酰丁香酮浓度及共培养时间对GUS基因表达的影响,研究其瞬时表达的最佳条件。结果显示:用OD600值为0.6的农杆菌侵染6min,在培养基中添加120μmol.L-1的乙酰丁香酮,共培养2d,能够得到高效的GUS基因瞬时表达。 相似文献
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烟草叶片直接再生-基因转化体系的建立 总被引：5，自引：0，他引：5
烟草叶片在附加激素IAA与BA的MS培养基上表现出不同的分化途径和分化频率,不同浓度的IAA、BA配比,可分别导致愈伤组织的形成,根、芽和胚状体的直接分化。在MS + 0 .1mg/LIAA + 0 .5mg/LBA的B处理培养基上,叶片外植体边缘细胞经器官发生途径高频率直接再生植株,而该分化过程受到卡那霉素的强烈抑制,因而可以做为共培养法进行烟草基因转化的良好体系。 相似文献
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以甘蓝型油菜湘油15号为试验材料,对农杆菌转化体系中外植体预培养时间、培养基中AgNO_3浓度、农杆菌侵染时的菌液浓度、共培养基pH值等进行了优化研究,确立了优化的遗传转化条件。结果表明,外植体在农杆菌侵染和共培养前预培养3 d,可明显提高子叶外植体和下胚轴外植体出愈率和抗性芽苗分化率,有利于获得较高的转化效率;在基因转化中,AgNO_3的最佳使用浓度为30μmol/L,最佳的农杆菌侵染菌液OD_(600)为0.4,共培养基pH值5.4是油菜农杆菌介导转化中优化的转化条件。 相似文献
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采用3×3双因子设计,研究发根农杆菌菌株和烟草品种对烟草毛状根诱导率的影响。结果表明:各菌株在不同烟草品种上均诱导出毛状根,经PCR技术检测,确定了发根农杆菌Ri质粒的rolB基因已整合到烟草基因组中。不同烟草品种和发根农杆菌菌株均显著影响毛状根的诱导率;Sumxun毛状根平均诱导率最高,达到了53.4%,其适宜菌株为A4和ATCC15834;K326为34.2%,其适宜菌株为R1000;云烟85为25.6%,其适宜菌株为ATCC15834。 相似文献
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以罗汉果品种“青皮果”试管苗的茎段和叶片为外植体,研究适合于遗传转化的受体再生系统, 并进行了发根农杆菌转化的初步研究。试验结果表明茎段的再生能力强于叶片,且对农杆菌敏感,是 进行遗传转化合适的受体材料。在MS基本培养基附加BA 1mg/L、KT 1mg/L、NAA 0．2mg/L、蔗糖30 mg/L培养基中,20d龄的茎段不定芽诱导率为100％,平均每个外植体诱导的不定芽数达到9．7个,移 苗成活率90％以上;外植体培养前的割伤处理有利于提高出芽数;发根农杆菌转化茎段诱导出毛状 根。罗汉果毛状根的诱导和培养将为罗汉果药用成分的研究和开发提供新的途径。 相似文献
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花生上胚轴为外植体的植株再生及转化研究 总被引：2，自引：0，他引：2
以8 d龄花生无菌苗的上胚轴为外植体,进行植株再生和农杆菌介导遗传转化研究.结果表明,上胚轴能高效诱导花生植株再生,外植体在MS 3 mg/L TDZ 6 mg/L 6-BA 1.5 mg/L NAA培养基上能高效诱导不定芽分化,10 d时诱芽率达100%;不定芽接种到MS盐 B5维生素 3mg/L TDZ 0.01%酵母粉培养基中15 d诱导出大量丛生芽;MS 0.5 mg/L NAA培养基较适合诱导丛生芽生根,25 d时生根率达82%.筛选确定35 mg/L潮霉素浓度为转化筛选压,以含AtRD29Ap::GUS融合基因的根癌农杆菌侵染8 d龄上胚轴10 min,共培养3 d,经上述再生体系,以潮霉素筛选获得1株拟转化再生植株. 相似文献
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[目的]获得本生烟草转胰高血糖素样肽-1基因植株。[方法]以本生烟草无菌苗叶片为外植体材料,建立本生烟草再生系统,通过农杆菌叶盘法浸染进行遗传转化,获得本生烟草转胰高血糖素样肽-1基因植株。[结果]通过多重比对和重复,确定本生烟草叶片最适分化培养基为MS＋1.5mg/L6-BA＋0.1mg/LNAA,生根培养基为MS＋0.1mg/LIBA;经由卡那霉素浓度梯度试验,确定选择压力为5mg/L卡那霉素;对经卡那霉素筛选获得的抗性芽进行GUS组织化学检测,获得阳性信号。[结论]初步证实外源基因胰高血糖素样肽-1已整合到本生烟草基因组中。 相似文献
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马晖玲 《甘肃农业大学学报》2001,36(3):333-335,340
植物激素作用时间的不同影响着烟草离体叶器官的再生,实验表明:在加有0.05 mg/L NAA和2 mg/L的KT的MS培养基上,烟草离体叶芽的分化于激素作用的一定时间内达到最佳状态。在有0.05 mg/L KT和2 mg/L NAA的MS培养基上,激素的短期作用有利于离体叶上根的形成。而一直在含激素的培养基上生长的离体叶,其芽的分化率反而低。 相似文献
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影响农杆菌介导的河北杨遗传转化的因素 总被引：4，自引：0，他引：4
从预培养时间、侵染菌液浓度、侵染时间、共培养时间及添加AS（乙酰丁香酮）5个方面,以卡那霉素抗性芽频率作为衡量指标,研究了各因素对河北杨遗传转化率的影响。优化筛选的最适转化系统为预培养2 d,农杆菌活化菌液1/2MS稀释10倍,侵染5 min,共培养4 d。按此方法河北杨叶盘转化率可达35%。西北林学院学报21卷第5期贾小明等影响农杆菌介导的河北杨遗传转化的因素 相似文献