共查询到20条相似文献，搜索用时 531 毫秒
1.
从成熟番茄果实中分离ｍＲＮＡ,以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）为引物在ＡＭＶ逆转录酶作用下合成ＡＣＣ２ｃＤＮＡ第一链,以ｃＤＮＡ为模板通过ＰＣＲ扩增ＡＣＣ２基因,获得１．４５ｋｂ的扩增片段,将此片段克隆到ＢＳ质粒的ＥｃｏＲＶ位点上,对插入片段两端进行部分序列分析。 相似文献
2.
通过ＰＣ／Ｇｅｎｅ软件对 Ｒｏｔｔｍａｎｎ等人发表的番茄 ＬＥ－ＡＣＣ２合酶的 ５’端 ２．０ Ｋｂ的前导序列作分析,设计了４对特异引物;以番茄果实、叶片的总ＤＮＡ为模板,采用特异ＰＣＲ扩增技术获得了 ２．０, １．８７, １．５８, １．２８ Ｋｂ ４个特异片段,用 Ｔ－Ｖｅｃｔｏｒ技术构建了１个克隆（２．０ Ｋｂ）、３个亚克隆（１．８７,１．５８,１．２８ Ｋｂ）,对４个克隆产物进行了 ＤＮＡ序列测定,借助 ＰＣ／Ｇｅｎｅ软件对所获得的各克隆序列进行综合处理与分析,获得了番茄 ＬＥ－ＡＣＣ２ ５’端前导序列的同源率为９９．９％,但第－９７９位的 Ｃ和第－１０７６位的 Ｔ分别为 Ｔ和 Ｃ所替代。对利用 ＰＣＲ技术分离大片段ＤＮＡ的各环节作了较详细的研究。 相似文献
3.
橡胶树HMG-CoA还原酶基因结构序列分析 总被引：4，自引：0，他引：4
橡胶树ＨＭＧ－ＣＯＡ还原酶ｃＤＮＡ序列分析结果表明，该ｃＤＮＡ长段为１３８３ｂｐ，由此推导的氨基酸序列含有４６１个氨基酸残基。ＰＣＧＥＮＥ￣（ＴＭ）分析该ｃＤＮＡ克隆与拟南芥ＨＭＧ－ＣｏＡ还原酶ｃＤＮＡ序列同源性为７９．７％，氨基酸序列同源性为８０．２％，与苍鼠氨基酸序列同源性为５１％，与血吸虫氨基酸序列同源性为４８％。（１）发现ＨＭＧ－ｏｎＡ还原酶的一级结构在动物与植物之间存在较大的差异。（２）分析ＨＭＧ－ＣｏＡ还原酶的疏水性氨基酸图谱，发现橡胶树和拟南芥这两种植物权有１个跨膜势能区域（Ｄｏｍａｉｎ），而血吸虫、苍鼠、果蝇等几种动物却有７个跨膜势能区域，这说明该酶的二级结构在动植物之间也存在着较大的差异。（３）由于所分析的几种动植物ＨＭＧ－ＣｏＡ还原酶的羧基一端未见有疏水性区域，故推测具有疏水性区域Ｎ－端蛋白质与膜相结合，而酶的羧基端由于具有亲水性则起到酶的催化中心位点。（４）比较橡胶树ＨＭＧ－ＣｏＡ还原酶和拟南芥ＨＭＧ－ＣｏＡ还原酶氨基酸同源性，发现蛋白质（酶）的Ｎ－端氨基酸同源性较低，而靠近Ｃ－端同源性较高，这说明Ｃ－端部分较为保守，估计与酶的活性中心区域有关，而Ｎ－端同源性较差，估计跟酶与结合的膜不 相似文献
4.
Ca2+对水分胁迫条件下芒果叶片膜脂过氧化及膜保护系统的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
以芒果幼苗为材料,研究Ｃａ２＋对水分胁迫条件下,叶片膜脂过氧化和膜保护系统的效应。结果表明：与对照叶片相比,涂施Ｃａ２＋后,叶片含水量、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性及Ｖｃ含量下降明显减慢;过氧化物酶（ＰＯＤ）活性上升加快且幅度加大,而下降延迟;丙二醛（ＭＤＡ）积累显著减少。Ｃａ２＋专一性螯合剂ＥＧＴＡ可削弱Ｃａ２＋的效应。ＣａＭ 拮抗剂氯丙嗪（ＣＰＺ）对叶片ＳＯＤ活性和ＰＯＤ活性有抑制作用,推测Ｃａ２＋可能通过与ＣａＭ结合调节相关酶活性,从而减轻水分胁迫对膜的伤害。 相似文献
5.
启动子是基因在转录水平上的一种重要调控元件。本研究通过同源序列法从甘蓝型油菜品种中油８２１ 中分离到油菜基因ＮａｐＢ和ＦＡＥ１的上游启动子序列ｐＮａｐＢ和ｐＦＡＥ１,其中ｐＮａｐＢ长１１３６ｂｐ,ｐＦＡＥ１长１４２０ｂｐ。 两种启动子的核苷酸序列都含有种子特异表达启动子的顺式作用元件,包括ＲＹ重复、Ｇ－ｂｏｘ和Ｅ－ｂｏｘ等,但两 种启动子顺式作用元件的序列分布不同。将ｐＮａｐＢ和ｐＦＡＥ１两个启动子分别与报告基因ＧＵＳ融合并通过农杆菌 介导法导入烟草,得到大量转基因烟草植株。对Ｔ１代转基因烟草进行组织化学分析,比较了不同启动子的组织表 达特异性。结果表明,两种启动子都只在种子中起作用,属于典型的种子特异性表达启动子,但是它们作用的时间 和空间分布以及作用强度明显不同。ｐＮａｐＢ启动子比ｐＦＡＥ１作用开始的时间早,持续时间长,在早期作用比 ｐＦＡＥ１强,但ｐＦＡＥ１启动子在种子发育中期启动速度快,成熟种子的ＧＵＳ染色深度在两种启动子间差别不大。 相似文献
6.
启动子是基因在转录水平上的一种重要调控元件。本研究通过同源序列法从甘蓝型油菜品种中油８２１ 中分离到油菜基因ＮａｐＢ和ＦＡＥ１的上游启动子序列ｐＮａｐＢ和ｐＦＡＥ１,其中ｐＮａｐＢ长１１３６ｂｐ,ｐＦＡＥ１长１４２０ｂｐ。 两种启动子的核苷酸序列都含有种子特异表达启动子的顺式作用元件,包括ＲＹ重复、Ｇ－ｂｏｘ和Ｅ－ｂｏｘ等,但两 种启动子顺式作用元件的序列分布不同。将ｐＮａｐＢ和ｐＦＡＥ１两个启动子分别与报告基因ＧＵＳ融合并通过农杆菌 介导法导入烟草,得到大量转基因烟草植株。对Ｔ１代转基因烟草进行组织化学分析,比较了不同启动子的组织表 达特异性。结果表明,两种启动子都只在种子中起作用,属于典型的种子特异性表达启动子,但是它们作用的时间 和空间分布以及作用强度明显不同。ｐＮａｐＢ启动子比ｐＦＡＥ１作用开始的时间早,持续时间长,在早期作用比 ｐＦＡＥ１强,但ｐＦＡＥ１启动子在种子发育中期启动速度快,成熟种子的ＧＵＳ染色深度在两种启动子间差别不大。 相似文献
7.
甘蓝型油菜核不育基因的RAPD标记 总被引：17，自引：2，他引：15
用Ｏｐｅｒｏｎ公司ＯＰＡ－０１－ＯＰＪ－２０ ２００个１０碱基对随机序列引物对甘蓝型油菜隐性核不育株涪优Ａ和可育株涪优Ｂ、显性核不育株３７Ａ和可育株３７Ｂ、广恢系ＤＧＣＲ９８－３７５２、ＲＧＣＲ９７－１及Ｆ１材料基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ扩增,共获得１３３４条扩增带,平均每引物扩增带约６．７条扩增带表明甘蓝型油菜存在遗传多样性,引物ＯＰＡ－０５、ＯＰＡ－０９、ＯＰＡ－１２、ＯＰＡ－１３、ＯＰＡ－２０ 相似文献
8.
9.
草菇gpd启动子的克隆及序列分析 总被引：3，自引：0，他引：3
根据已报道的gpd启动子的序列设计合成了一对引物,以草菇菌丝的基因组DNA为模板,采用PCR扩增的方法克隆出一条长1367bp的DNA特异片段gpd-vv。gpd-vv序列用Promoter Scan Ⅱ和Promoter Predictions软件进行分析,结果表明,其序列上有6个核心启动子区,而且除了具有一般启动子的CAAT-box、TATA-box等基本顺式作用元件外,还含有几个重要的元件如G-box,GC-motif,CTrich-motif等。经Tfsitescan Service分析,gpd-vv序列还包含多个转录因子的结合位点,包括GCR1,GCN4,AFT1,Repressor of CAR1等。 相似文献
10.
用乙烯利和ＮａＣＮ预处理花生种子,实验结果表明：（１）乙烯和ＣＮ－都提高种子子叶的抗氰电子传递速率,同时乙烯还提高种子子叶的总呼吸速率以及ＥＭＰ－ＴＣＡ速率,ＣＮ－则降低种子子叶的总呼吸速率以及ＥＭＰ－ＴＣＡ速率。（２）乙烯提高种子子叶的蛋白酶、脂肪酶和过氧化氢酶活性并提高游离氨基酸和脂肪酸含量以及降低水溶性蛋白质含量;ＣＮ－则降低种子子叶的蛋白酶、脂肪酶和过氧化氢酶活性,并降低游离氨基酸和脂肪酸含量,但提高水溶性蛋白质含量。（３）乙烯提高暗萌发苗的单株鲜重,ＣＮ－则降低暗萌发苗的单株鲜重。 相似文献
11.
花生条纹病毒（红安分离物）cp基因的克隆和序列分析 总被引：1，自引：1，他引：1
从湖北省红安县花生种传苗中得到花生条纹病毒（Peanut stripe virus, PStV）分离物（PStV-Hongan），提取感病叶片的总RNA，RT-PCR扩增了其外壳蛋白基因（cp），克隆至pGEM-Teasy载体，转化大肠杆菌并鉴定。阳性质粒序列测定结果表明，该cp含有861个核苷酸，编码分子量为32.4kDa的蛋白。该株系cp与PStV其它株系核苷酸序列同源性为94.6%~98.8%，氨基酸序列同源性为96.2%~99.3%。株系间cp核苷酸序列系统进化树结果表明，Hongan株系与中国其它株系亲缘关系较近，而与东南亚其它株系关系较远。 相似文献
12.
从解淀粉芽孢杆菌中提取染色体ＤＮＡ，经过ＰＣＲ扩增得到Ｂａｍａｓｅ（核酸酶ＢＮ）基因，然后克隆到质粒Ｐ＾ＧＥＭ－７２ｆ（＋）的Ｓｍａｌ位点上并进行序列分析。结果表明，核酸酶ＢＮ基因的核苷酸序列与已报道的序列相比具有９９．７％的同源性，长度为３３６ｂｐ，根据核苷酸序列推断的氨基酸序列则完全一致。该工作为以后利用核酸酶的特异表达来获得雄性不育植物打下了基础。 相似文献
13.
根据丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶类(STK)结构域Ⅰ和Ⅷ氨基酸保守序列设计了1对简并引物,以细菌性萎蔫病抗/感木薯种质E1340和GR911基因组DNA为模板,通过PCR扩增,均获得大小约0.5 kb的扩增片段。两个片段纯化、克隆、测序后获得完全一致的505 nt序列,比对发现,木薯种质AM560带有和该序列高度同源的核苷酸片段。对包括同源片段上下游各约2.0 kb的大片段序列进行基因预测,获得1个有4个外显子、ORF全长1866 nt的预测基因,命名SSK1。序列分析表明,该基因编码621 aa,有细胞壁受体激酶结合、偶联位点和8个跨膜结构域,具有典型的STK类抗病基因的保守结构,是一个候选的抗病基因,可能在木薯抗病反应中发挥重要作用。 相似文献
14.
15.
香蕉乙烯受体基因cDNA的克隆及其表达分析 总被引：5，自引：0，他引：5
提取香蕉果实总RNA，根据有关文献报道的乙烯受体基因序列设计引物，通过RT-PCR方法扩增其开放读框(open reading frame，ORF)，结果同时扩增出2个长短不同的特异cDNA序列。测序结果表明：其中较长的cDNA序列与该报道的香蕉乙烯受体cDNA序列的对应区段(ORF)长度一致，同源性为99．1％；另一较短cDNA序列为新序列，其与该报道序列的同源性达97．2％，但缺少该报道序列中的19和1036 bp的区段。RT-PCR扩增结果显示，报道的cDNA序列在香蕉果实的几个成熟阶段均有表达，而在根和叶片等组织中检测不到其表达，说明其表达具有果实组织特异性。Southern杂交结果显示，该报道基因序列在香蕉基因组中为单拷贝存在。因此，推测新克隆的缺失cDNA序列可能来自同一基因的转录后剪辑，其可能为1个新的香蕉乙烯受体基因。 相似文献
16.
甘蔗GA20氧化酶基因片段克隆及序列分析 总被引：2，自引：0，他引：2
以甘蔗茎尖为材料,根据其它植物的GA20氧化酶基因(GA20-oxidase)氨基酸保守区,设计一对简并引物.通过RT-PCR扩增得出1条约740 bp大小的DNA片段.将其克隆至pMD18-T载体上,而后对重组克隆进行测序,结果表明所获得的甘蔗GA20氧化酶基因片段由740碱基组成,编码246个氨基酸.该基因片段具有其它植物GA20氧化酶基因中存在的保守区:同时,与多种单子叶植物的GA20氧化酶基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性在80%和75%以上.聚类分析显示,甘蔗和玉米最先聚类,推测在进化上具有较近的亲缘关系,其次与高梁、结缕草聚类,然后再与水稻聚类,其中进化关系最远的是簇毛麦和小麦. 相似文献
18.
19.
玫烟色棒束孢几丁质酶基因上游调控序列克隆与结构预测分析 总被引：1，自引：1，他引：0
为探明玫烟色棒束孢几丁质酶基因Ifuchi1的表达调控机理，根据Ifuchi1基因组全长核苷酸序列，采用基因组步移方法，获得Ifuchi1的5′-上游区序列(总长为2 402 bp)。与cDNA 序列进行比对，其中含有2个内含子。TFSEARCH 1.3 软件分析转录因子结合位点的结果显示，该序列中没有明显的TATA和CAAT框，含有4个可能的碳调控因子的结合位点5＇>(g/c)YggRg<3＇和3个氮调控因子的结合位点-相隔很近的GATA。其中含有可能的葡萄糖抑制调控序列和压力反应元件。本研究结果为深入研究玫烟色棒束孢几丁质酶基因的表达调控机制及其分子机理奠定了一定基础。 相似文献
20.
利用PCR方法从苎麻中检测出粉虱传双生病毒 总被引：1，自引：0，他引：1
从苎麻植株上采集了叶片呈现花叶和黄绿斑驳并扭曲的2个病样.用粉虱传双生病毒简并引物对2个样品进行了PCR检测,结果发现2个样品都能扩增到预期大小的DNA片段.PCR产物经克隆后进行序列测定,BLAST比对结果表明,此样品的DNA扩增片断序列与Hsinchu番茄曲叶病毒福建分离物(EF125190,EF125191)和台湾分离物(DQ866131)的同源性都为95%,推测侵染苎麻的双生病毒可能是Hsinchu番茄曲叶病毒. 相似文献