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胚胎体外生产也称体外受精技术,是继人工授精、胚胎移植技术之后,家畜繁殖领域的第三次革命。牛胚胎体外生产包括卵子的成熟培养、精子获能、体外受精和胚胎早期培养等4个连续过程。自1982年以来,家畜体外受精技术,尤其是牛体外受精技术的发展十分迅速,仅仅10年时间,就已从理论 相似文献
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关于哺乳动物体外受精的研究,已经历了120多年,直到80年代才获得了第一例“试管家畜”。近年来,尽管“试管婴儿”平均每天有4例问世,但到1990年4月10日为止,全世界获得的“试管家畜”仅有130例,其中“试管牛”54头,“试管猪”52只,“试管绵羊”23只,“试管山羊”只有1只。 为了克服山羊体外受精的难点,Rao等将山羊输卵管卵母细胞输入事先经子宫输入新鲜羊精的假孕兔输卵管,培养24～36h,有37.0％完成了异体受精。将这些受精卵移植给9只受体羊后,有1只正常分娩,获得了首例异体受精山羊羔。我们将超排羊输卵管卵母细胞移入事先经阴道输入新鲜羊精的假孕兔输卵管,获得了44.8％的异体受精率。但迄今尚未证实,山羊体外获能的精子与超排卵母细胞在假孕兔输卵管内能否完成受精过程和产出正常后代。本试验旨在研究山羊体外获能的精子与超排的输卵管卵异体受精及受精卵移植后产羔的可能性。 相似文献
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今年9月间国际著名体外受精专家勃拉吉特和杜克洛两位教授与江苏省农科院胚胎工程试验室合作研究,家兔体外受精的两批两只受体兔分别于10月18日和21日共生下5只由体外受精发育而成的正常仔兔,这是我国首次获得的哺乳动物试管后代,从而填补了我国这一研究领域的空白。这标志着我国体外受精的研究进入了新的阶段。 “试管动物”与人的“试管婴儿“一样,是从供体获得卵子与获能精子在体外条件下完成受精过程,并在体外继续培养至4—细胞期胚胎,然后移入受体生殖道内获得后代。 相似文献
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《南京农业大学学报》1988,(4)
我校畜牧系繁殖研究室于1987年接受了农业部“七五”计划重点科研项目——猪的体外受精。一年多来,进行了猪卵母细胞的体外培养成熟、精子体外获能和体外受精等技术的研究。目前,用从屠宰场采集的卵母细胞经体外培养18小时后卵丘细胞扩展率为95.58％(216/ 相似文献
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家兔精子体外获能与体外受精试验 总被引：4，自引：0，他引：4
本试验目的在于建立一种简便而有效的系统,能使家兔射出的精子完成体外获能,并获得体外受精、早期卵裂和正常产仔。精子体外获能采用三种方法:A.HIS(15min)+DM(1～2h);B.HIS(15min)+DM(11～12h);C.m-HIS(15min)+m-DM(2～4h)。经上述方法处理的精子与512枚输卵管卵母细胞进行体外受精和体外培养的结果表明,A组的受精和早期卵裂发育延迟;B组的受精卵大都停留在原核期;C组的受精和早期卵裂发育正常。将C组60枚2-4细胞移植至9只受体兔,5只妊娠,其中2只产4只试管仔兔,另外3只获得12个胎儿。 相似文献
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周颂成 《上海交通大学学报(农业科学版)》1987,(2)
本文主要阐述关于牛的体外受精的一般操作过程:卵母细胞的采集、体外成熟培养、授精前精子获能的预处理,体外授精及受精卵的培育。试验结果表明对冷冻精液进行离心清洗可以提高体外受精率,其中无清洗或1次清洗后的精子受精率均为0;2次或3次清洗的精子受精率分别达36.1%和43.65。 相似文献
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奶山羊精子体外获能与体外受精 总被引：1，自引：0，他引：1
供体用FSH+LH超排,卵母细胞从注LH后约30h回收。将获能精子与10枚卵母细胞在受精液(mDM+输卵管上皮细胞)和培养液(mDM+30％供体羊血清)中连续培养(38℃)24h后,有6枚卵受精,抛出第二极体。将6枚受精卵移植到3只受体中,有1只妊娠,产出1只试管母山羊。初步表明,本试验的奶山羊精子体外获能与体外受精程序是简便而有效的。 相似文献
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目前,在英、日、美等许多发达国家已成立了有关动物胚胎工程技术的开发公司。近几年来,我国在哺乳卵细胞体外成熟(invitromaturation,IVM)、体外受精(invitrofertilization,IVF)、胚胎早期培养(invitrocullture,IVC)及冷冻保存(freezingconservation,FC)研究方面已取得了极大的发展,为胚胎工程在畜牧生产、科学研究等方面的应用展示了广阔的前景。本文就哺乳动物体外受精的发展历史、精子的体外获能、受精作用机制以及体外受精的影响因素等方面作一综述。 相似文献
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通过5个实验研究了应用咖啡因，肝素和I－A23187促进猪精子体外获能的效果，比较了不同受精次数和不同种类的精液进行猪卵子体外受精的效果，试验表明，用肝素和咖啡因协同作用，猪精子体外获能的效果好，采用2－3次受精法进行体外受精可以提高受精率，使用新鲜精液，新鲜附睾精液或冷冻附睾精液进行体外受精，其效果差异不显著。 相似文献
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中国农科院广西水牛研究所 (邮码 : 530001, 电话 : 0771- 3320589)最近传来令人振奋的消息 : 经研究人员用完全体外受精技术而受孕的两头母水牛 , 不久前产下了 3头试管杂交水牛 , 其中 2头小牛犊是龙凤双胞胎 . 另外 , 有 7头利用这一技术受孕的母水牛已进入临产期 , 也即将分娩 .
由于水牛的体外条件卵母细胞质量差、精子体外获能低 , 试管水牛的胚胎移植要比黄牛困难得多 . 中国农科院广西水牛研究所的这次成功 , 取得了两方面的重大突破 : 首先是移植成功率达到 60% ; 另外 , 双胎率可望达到 20% , 而自然条件下水牛只有 0.09% 的双胎率 . 相似文献
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重金属铬对体外培养猪精子活力及蛋白磷酸化水平的影响 总被引：1，自引：1，他引：0
为探究铬元素在猪精子体外获能培养过程中,对猪精子活力、蛋白磷酸化信号通路的影响,研究采取八头杜洛克猪新鲜精液,分别在体外获能培养液中添加不同浓度的6价铬离子(0、0.1、0.5、1、2、10、100μmol/mL)以及双丁酰环腺苷酸(dbcAMP)、异丁基黄嘌呤(IBMX)、PKA抑制剂(H-89)等cAMP-PKAs信号通路调节因子进行调控培养2h。利用精子活力计算机检测(CASA)、蛋白质免疫印迹(WB)技术,分析测定猪精子体外铬暴露获能培养过程中精子活力、蛋白磷酸化水平,并用相应试剂盒检测细胞中甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)活性、腺苷-3′,5′-环化一磷酸(cAMP)及ATP水平。结果表明:铬离子对猪精子活力、蛋白磷酸化水平有抑制作用,且随铬离子浓度增加抑制作用增强。当铬浓度达到2μmol/mL时精子活力MOT(58.4%)显著低于获能培养组(73.6%)(P0.05);10μmol/mL铬处理明显抑制蛋白磷酸化水平,且细胞内GAPDH活性、cAMP及ATP水平显著降低(P0.05)。而10μmol/mL铬处理中分别添加葡萄糖(5.0μmol/mL)及dbcAMP(1.0 mmol/L)和IBMX(0.1 mmol/L),能缓解铬对蛋白酪氨酸磷酸化(PTP)、蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸化(P-PKAs)及GAPDH活性的抑制作用。结果提示铬可能是通过干扰糖代谢及cAMP/PKA信号通路影响猪精子活力及蛋白磷酸化水平。本研究首次探究了体外培养过程中铬离子对家畜精子活力的影响,并初步探究了其作用机理,为进一步研究铬离子引起繁殖毒性的分子机制及家畜繁育提供一定的理论基础。 相似文献
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通过获能猪精子酪氨酸磷酸化蛋白分离和表达,来确定精子获能的最佳状态.将猪精子悬浮于改良的Tris缓冲液(mTBM)获能培养基中,在体积分数为5% CO2孵箱37 ℃培养,以考马斯亮蓝染液染色的方法来评价精子获能状态, 经过SDS-PAGE分离后,进行Western免疫印迹分析,检测获能猪精子间酪氨酸磷酸化蛋白的分布.有27,47 ku的2种蛋白发生酪氨酸磷酸化,其中27 ku的蛋白酪氨酸磷酸化水平自精子体外培养后呈递增趋势,而 47 ku的蛋白酪氨酸磷酸化水平在精子培养1.5 h时最高,后呈递减趋势,1.5 h时获能状态最佳. 相似文献
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针对奶牛胚胎体外生产环节,对体外受精和培养等技术进行了研究,旨在建立奶牛性控胚胎体外生产技术体系。结果表明,卵母细胞外周卵丘细胞至少保持3层以上,在成熟基础液中添加10ng/ml的EGF,利于核质成熟;在精子获能液中添加咖啡因降低精子的存活时间;牛胚胎前3d用CR1aa BSA培养,再用SOFaa 5?S培养,获得高的囊胚发育率,并且添加50ng/mlIGF-I后胚胎的发育得到了很大的改善。利用性控精液进行体外受精,受精率有轻微下降,但对生产的胚胎发育质量无明显(P>0.05)影响,胚胎移植后受胎率为40%左右。 相似文献
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【目的】为了探讨不同冻精处理方法以及添加精子活力激活剂并孵育不同时间获能对体外受精及受精卵发育的影响。【方法】研究对体外受精前的牛冷冻精液分别采用直接离心法、上游法和Percoll法3种方法处理,并对处理后的精液分别用含2.5mM或5.0mM咖啡因的获能液(BO液 10μg/ml肝素钠)在培养箱内预先孵育10min或30min进行获能,不同处理的精子经体外受精后。【结果】结果表明:(1)3种冻精处理方法(直接离心洗涤法、上游法、Percoll法)对精子处理获能,IVF后受精卵的卵裂率(依次为51.58%、52.83%、53.20%)均无显著差异(P>0.05);桑椹胚、囊胚发育率Percoll法处理组(16.66%、10.18%)与上游法处理组(17.85%、16.07%)以及Percoll法处理组与直接离心洗涤法组(8.77%、7.01%)均无统计学差异(P>0.05),同时实验结果还表现出上游法处理组比Percoll处理组的桑囊胚率有所提高,且上游法处理组与洗涤法处理组在桑、囊率上出现了显著差异(P<0.05)。(2)获能液中添加咖啡因组比非添加组(对照组)卵裂率和桑囊胚率有所增加,其中添加5.0mM咖啡因组精子孵育30min的获能效果最佳,卵裂率、桑囊率达到68.59%、28.50%。【结论】以上结果表明上游法处理牛冷冻精液稍优,更有利于以后的受精卵发育;添加咖啡因能提高精子活力,且高浓度的咖啡因维持精子高活力持续时间较长。 相似文献
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用FSH+ PMSG和FSH+LH 2种处理方法,对8只6周龄的高山细毛羊进行超数排卵试验,4只作对照组,并对采集到的卵子进行体外受精,探索羔羊超数排卵的可行性及体外受精的效果.结果表明:2组处理共获得发育卯泡583个,回收卵母细胞255枚.卵母细胞经体外培养24 h后与上游法获能的精子进行体外受精,48 h后2组处理... 相似文献
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不同培养体系及肝素剂量对Boer山羊精子体外获能的研究 总被引：3，自引：1，他引：3
用S ,D ,B 3种培养体系对Boer山羊精子进行体外获能 ,肝素添加剂量设 5个水平 .获能处理前先进行活精子分离 ,然后按试验之需 ,用含有肝素的培养液获能处理 ,获能后用溶血磷脂酰胆碱 (LC)诱导顶体反应 (AR) ,TG染色法测得有顶体反应的活精子作为评价精子获能的指标 .试验结果表明 ,(1)S培养液效果最好 ,4h的顶体反应率达 6 0 .88% ,与D ,B培养液的获能效果相比 ,差异极显著 (P <0 0 1) .(2 )肝素的添加剂量以 15mg·L-1和 2 0mg·L-1的效果最好 ,与其它处理组的效果相比差异显著 (P <0 0 5 ) ,但这 2个水平间的效果差异不显著 (P >0 0 5 ) . 相似文献
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安闻 《东北农业大学学报》1987,(1)
东北农学院动物生物工程研究室经过1年的试验,利用黄牛卵巢卵母细胞,体外培养成熟。用冷冻奶牛精液体外受精成功,并使之发育到囊胚阶段(1986年12月20日)。这是试管牛犊第一步,这项成果在全国尚未见报道。 相似文献
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用S培养体系对Boer山羊精子进行体外获能试验，借助电子显微技术观察其获能前后超微结构的变化，结果表明，Boer山羊精子的超微结构与其它哺乳动物的类似，分头、颈、尾3部分。头部主要由细胞核构成，含有遗传信息；颈部脆弱，尾部易从此脱落；尾部是精子运动的器官，由中段、主段和末段3部分组成，精子获能后，顶体质膜膨胀、断裂和丢失；顶体外膜囊泡化，进而顶体内膜裸露。 相似文献