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本文采用了荧光探针——(艹啡)薄啶溴红(Ethidium Bromide,简称 EB)插入核酸双链区,形成一种具有较强荧光效应的络合物方法,对马传贫白细胞 DNA进行了荧光滴定和圆二色谱分析。结果表明:马传贫病毒感染的马白细胞 DNA 含量为正常马白细胞的4倍;正常马、免疫马、传贫马在核物质水平上,三者的空间构象存在差异。这一成果为马传贫早期诊断和区分传贫马与免疫马提供了分子水平上的依据。 相似文献
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本实验以苹果二倍体品种富士(Malus pumila cv.Fuji,2n)、三倍体品种乔纳金(Malus pumila cv.Jonagold,3n)和四倍体品种小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang,4n)为试材,对不同倍性苹果花芽分化过程花芽中核酸的含量进行了比较。结果表明:多倍体与二倍体花芽中DNA、RNA和总核酸含量及DNA/RNA值的动态变化趋势基本相同;同一分化期,多倍体花芽中DNA、RNA和总核酸的含量比二倍体明显增加;但对花芽中RNA/DNA值的研究表明,与二倍体相比,三倍体花芽的RNA/DNA值增高,但增高幅度不大,四倍体花芽的RNA/DNA值却明显降低。 相似文献
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马传染性贫血病毒弱毒疫苗株感染性分子克隆的构建 总被引：7，自引：1，他引：7
采用PCR方法分 3段扩增出马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株 (EIAVDLA)的前病毒DNA ,这 3个片段覆盖马传染性贫血病毒的全部基因组 ,PCR产物经克隆后顺次连接 ,获得 1个含有EIAV全基因 (8.0kb)的重组质粒 ,将其命名为p8.0。将此 8.0kbEIAV全基因再亚克隆到含有一完整EIAVDLA株长末端重复序列的质粒中 ,获得一含有EIAV驴白细胞弱毒前病毒全基因的重组质粒 ,将其命名为p8.2 ,经核苷酸序列分析 ,证明p8.2含有EIAV前病毒的全基因。用p8.2转染驴白细胞 ,将其作为种毒进行传代 ,于感染该克隆毒的细胞培养上清中检测出了反转录酶活性 ,说明在驴白细胞中由p8.2衍生出了EIA病毒。驴白细胞经该克隆毒感染后 ,第 4天出现病变 ,经透射电镜可观察到典型的马传染性贫血病毒粒子 ,进一步证明p8.2具有感染性 ,笔者获得了马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株的感染性分子克隆 ,为进一步在分子水平上阐明我国EIAV疫苗株的减毒机理和免疫保护机制奠定了基础 相似文献
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RNA是由核糖核苷酸经磷酯键缩合而成的长链状分子。RNA与DNA、蛋白质、多糖等物质普遍存在于细胞中。常用的总RNA提取的方法是Trizol法,该方法可同时分离一个样品的RNA、DNA和蛋白质,但由于植物材料中多糖多酚的存在及操作环境的影响,RNA产量偏低。QIAGEN RNeasy Plant Mini试剂盒法(胍盐法)是通过裂解液(不含苯酚、氯仿)裂解细胞,使RNA和DNA同时通过柱子,再将其分离的总RNA提取法。该方法既克服了Trizol在多糖多酚存在的情况下不能成功分离RNA与DNA的弊端,又保证在提取过程中不使用苯酚氯仿等有毒试剂,并且能在一定程度上提高RNA的产量和纯度。 相似文献
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CRSPR/Cas9系统是基于RNA的适应性免疫系统,广泛存在于细菌和古细菌中。其特点在于单个蛋白质Cas9与两个短RNA序列结合后,可作为位点特异性核酸内切酶在体内或体外发挥作用。与传统的由核酸酶介导的DNA编辑技术不同,CRISPR/Cas9对DNA的识别不是由蛋白质指定的,而是由20-nt向导RNA(guide RNA)序列指定的。CRISPR/Cas9系统由于其设计过程和使用过程简单高效而被广泛应用。总结CRSPR/Cas9系统作用机理、导入方法及其在节肢动物中不同类群及不同基因的应用进展,以期为重要农业及经济节肢动物的功能基因研究与遗传育种研究提供有价值的参考。 相似文献
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为研究江苏多鳞四指马鲅Eleutheronema rhadinum和台湾四指马鲅Eleutheronema tetradactylum的遗传多样性及种群遗传结构,对两个群体的细胞色素b(Cytb)和16S r RNA序列进行了克隆分析。结果表明:在30个江苏多鳞四指马鲅样本中,检出Cytb单倍型3个,变异位点2个,16S r RNA单倍型1个,变异位点0个;在台湾四指马鲅的30个样本中,检出Cytb单倍型1个,变异位点0个,16S r RNA单倍型1个,变异位点0个;多鳞四指马鲅的Cytb单倍型多样性(H)与核苷酸多样性(Pi)水平均高于四指马鲅,且Tajima'SD、Fu'S Fs中性检验结果皆为负值(P0.1),说明江苏多鳞四指马鲅未经历种群扩张现象。研究表明,尽管多鳞四指马鲅与四指马鲅这两个群体的Cytb和16S r RNA基因存在较低的遗传多样性,但各自的基因型之间存在明显差异,适于作为这两个种类的鉴别标记。 相似文献
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采取共提取法提取土壤微生物总RNA后,经过去DNA、过柱纯化等手段,利用Poly(A)聚合酶在纯化RNA末端添加Poly(A)尾,将产物逆转录成c DNA第一链,用细菌16S r DNA引物和nos Z(氧化亚氮还原酶基因)引物扩增目的片段。结果表明:利用此方法能够获得带有Poly(A)尾的土壤原核微生物核糖体RNA和m RNA,产物经过一次转录后,可用于扩增土壤微生物目的基因。此方法相对于利用目的基因特异下游引物来作为逆转录引物获得c DNA更加方便,用于研究土壤原核微生物多个基因的表达特征时,此方法十分实用。 相似文献
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[目的]筛选出适合于c DNA文库构建的猪苓菌核及菌丝体总RNA的提取方法。[方法]采用Trizol改良法和EASY Spin植物快速提取试剂盒法(简称试剂盒法)对猪苓菌丝及菌核的总RNA进行提取。[结果]经紫外分光光度计对所得总RNA的均一性及1%琼脂糖凝胶电泳对所得总RNA的完整性检测后发现,2种方法均可提出完整的总RNA,试剂盒法相较于Trizol改良法其所提取的总RNA质量和纯度都较好,但Trizol改良法所提取的总RNA产率比较高。[结论]LD-PCR成功合成了猪苓菌核和菌丝体的c DNA产物,呈弥散状分布在1 0005 000 bp和7502 500 bp,满足c DNA建库的要求。 相似文献
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半边旗抗肿瘤有效成分6F对HL-60细胞的 DNA、RNA及蛋白质生物合成的抑制作用 总被引：2，自引：0，他引：2
目的：从DNA、RNA及蛋白质生物合成的角度探讨半边旗有效成分6F抗肿瘤的作用机理。方法：用台盼蓝拒染法测定细胞成活率；[^3H]—TdR，[^3H]—UTP和[^3H]—Leu参入法分别测定细胞DNA、RNA及蛋白质生物合成的水平。结果：6F对HL—60细胞生长有强烈的抑制作用，且具明显的时间和剂量效应关系。6F明显抑制HL—60细胞DNA、RNA及蛋白质生物合成，呈剂量依赖关系。6F对蛋白质合成的抑制作用最强。结论：6F对HL—60细胞生长有强烈的抑制作用，抑制细胞DNA、RNA，特别是蛋白质的生物合成是6F抗肿瘤作用的可能机制之一。 相似文献
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RNAi(RNA interference)是指外源性双链RNA(dsRNA)能抑制细胞内与其序列同源的基因的表达。在进化上,这可能是生物调控基因表达及抵御病毒侵染或转座子诱导DNA突变的一种共有的生理机制。本文对RNAi技术进行介绍。 相似文献
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用非放射性的Digoxigenin标记的DNA探针检出马立克病病毒DNA 总被引：1，自引：0，他引：1
用非放射性的Digoxigenin标记的Ⅰ型马立克病病毒特异性DNA探针,杂交反应可有效地检出通过Southern blot及Dot blot固定到硝酸纤维膜上的同型病毒的DNA,其特性及敏感性均不低于放射性~(32)p标记的相同DNA探针。 相似文献
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鲤鱼白肌中RNA/DNA值与其生长的关系 总被引：7，自引：0，他引：7
鲤鱼白肌中核糖核酸与脱氧核糖核酸的比值(RNA/DNA)可作为种群生长的生理指标,并用此指标预测和评价生态环境、饲养条件的优劣对其生长可能产生的影响。鱼体白肌中RNA/DAN值与其生长率呈正相关(r=0.8994);鱼体增重率和RNA/DNA值的季节变动规律基本一致,都是在9-10月最高,4月次之,11-12月最低。鲤鱼生长良好时,RNA/DNA值大于2.0;反之,低于2.0;Hg~(2+)浓度达到0.005mg/l时,才对鲤鱼的生长产生显著影响,并在RNA/DNA值上显示出来。用RNA/DNA值评价鱼的生产快慢、环境优劣是可信的 相似文献
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用石蜡切片法确定温州蜜柑花芽形态分化集中在3月初到4月中旬.同时分析了8年生和2年生温州蜜柑树体秋春季叶片核酸含量,结果表明:结果树叶片RNA含量较高,在核酸总量中所占比重较大.花原基分化初期,RNA含量和核酸总量均达到峰值,随后下降.花芽形成期DNA含量较低,形态分化期下降.束结果树叶片DNA含量高于成年树,且在核酸总量中所占比重较大.花原基分化初期,结果树叶片RNA/DNA比值出现峰值,未结果树叶片RNA/DNA比值有相似变化,但峰值较小.核酸总量(包括RNA含量)及RNA/DNA比值结果树大于未结果树. 相似文献
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鲤鱼白肌中RNA／DNA值与其生长的关系 总被引：1，自引：0，他引：1
鲤鱼白肌中核糖核酸与脱氧核糖核酸的比值(RNA／DNA)可作为种群生长的生理指标，并用此指标预测和评价生态环境、饲养条件的优劣对其生长可能产生的影响。鱼体白肌中RNA／DAN值与其生长率呈正相关(r=0．8994)；鱼体增重率和RNA／DNA值的季节变动规律基本一致，都是在9-10月最高，4月次之，11-12月最低。鲤鱼生长良好时，RNA／DNA值大于2．0；反之，低于2．0；Hg^2 浓度达到0．005mg／1时，才对鲤鱼的生长产生显著影响，并在RNA／DNA值上显示出来。用RNA／DNA值评价鱼的生产快慢、环境优劣是可信的。 相似文献
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鲤鱼白肌中核糖核酸与脱氧核糖核酸的比值(RNA／DNA)可作为种群生长的生理指标，并用此指标预测和评价生态环境、饲养条件的优劣对其生长可能产生的影响。鱼体白肌中RNA／DAN值与其生长率呈正相关(r=0．8994)；鱼体增重率和RNA／DNA值的季节变动规律基本一致，都是在9-10月最高，4月次之，11-12月最低。鲤鱼生长良好时，RNA／DNA值大于2．0；反之，低于2．0；Hg^2 浓度达到0．005mg／1时，才对鲤鱼的生长产生显著影响，并在RNA／DNA值上显示出来。用RNA／DNA值评价鱼的生产快慢、环境优劣是可信的。 相似文献
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为了探明环境pH对褐环粘盖牛肝菌(Suillus luteus(L.:Fr.)Gray)生长代谢的影响机理,研究不同pH条件下液体培养褐环粘盖牛肝菌菌丝中蛋白质和核酸的含量变化,结果显示:该菌在pH 3.0～6.0范围内,随着pH的增加,蛋白质及核酸的含量逐渐增加,并在pH 6.0时达到最高值;在pH 6.0～8.0范围内,蛋白质及核酸的含量迅速降低。蛋白质的含量和RNA、DNA的含量之间极显著相关,相关系数分别达0.923和0.977,DNA和RNA的含量之间也极显著相关,相关系数达0.927。该研究可为进一步探索褐环粘盖牛肝菌适应与调节环境pH机理方面提供依据。 相似文献
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饲料蛋白对翘嘴鲌蛋白质合成能力的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
试验Ⅰ:以鱼粉为蛋白源,配制5个蛋白水平的等能、等必需氨基酸(EAA)平衡关联度的半精制饲料, 探讨饲料蛋白水平对翘嘴鲌蛋白质合成能力的影响.结果表明,饲料蛋白水平为40.89%时翘嘴鲌特定生长率(SGR)显著高于31.04%、35.51%组(P<0.05),但与46.62%、50.33%组之间差异不显著.翘嘴鲌白肌RNA和RNA/DNA随饲料蛋白质水平的提高而升高,40.89%组的白肌RNA/DNA显著高于31.04%和35.51%蛋白组(P<0.05),但与46.62%、50.33%蛋白组间差异不显著.白肌RNA/DNA、RNA/Prot(蛋白质)分别与饲料蛋白水平和SGR显著正相关(P<0.05).试验Ⅱ:用大豆蛋白分别替代0.0%、13.5%、27.0%、40.5%、54.0%的鱼粉蛋白,配制5个EAA平衡关联度的等蛋白、等能的半精制饲料,探讨饲料中大豆蛋白替代鱼粉蛋白对翘嘴鲌蛋白质合成能力的影响.结果表明:当饲料中大豆蛋白替代量为54.0%时,翘嘴鲌的SGR极显著低于对照组(P<0.01);当替代量达40.5%时,白肌RNA、RNA/DNA和RNA/Prot都显著低于对照组(P<0.05).白肌RNA/DNA、RNA、RNA/Prot分别与大豆蛋白替代鱼粉蛋白的量呈显著负相关(P<0.05),与SGR显著正相关(P<0.05). 相似文献