香菇漆酶同工酶的部分酶学性质的研究     

王方忠  朱启忠  董学卫  林金飞  曲悦文  顾文辉 《北方园艺》2008,(7)

通过丙酮分级沉淀、DEAE-纤维素离子柱层析和Sephadex G100柱层析得到两种香菇漆酶同工酶,分别命名为lac1和lac2,并对其理化性质进行了研究.考察了香菇漆酶同工酶最适反应温度和pH值、热稳定性和pH值稳定性、反应动力学常数以及金属离子对酶活的影响.试验结果表明:Lac1、lac2最适作用温度都为30℃,在不高于40℃的条件下保存30 min,lac1残余酶活在60%以上,lac2在不高于60℃有较高热稳定性,残余酶活在80%以上.最适pH值,lac1为3.6,lac2为4.0.pH值3.0～4.8,lac1有较强稳定性,在pH值4.0～4.6,lac2有较强的稳定性.以邻联甲苯胺为底物lac1和lac2的Km分别为0.964 mmol/L和1.38 mmol/L.金属离子Cl-对lacl有激活作用,Ag 、Mn2 对lac1有抑制作用.金属离子Ba2 和Cu2 对lac2有激活作用,Fe3 、Cl-、Ca2 、Zn2 、Ag 、Mn2 对lac2有抑制作用.  相似文献   

香菇漆酶的纯化及部分性质研究   总被引：2，自引：1，他引：1  

王方忠  朱启忠  董学卫  林金飞  曲悦文  徐国英 《北方园艺》2008,(6)

对香菇漆酶进行了丙酮分级沉降、半透膜透析、DEAE一纤维素及Sephadex G100柱层析纯化,并研究了漆酶的产酶曲线及酶作用最适条件.,结果表明:在该培养条件下,香菇第10天达产酶高峰,峰值酶活为216 U/mL,酶作用的最适pH值为3.6,在pH值3.6～4.6有较强的稳定性.最适酶解温度为30℃,Ba2 、Cu2 对香菇漆酶有激活作用,而Ag 、Fe3 则能明显抑制漆酶活性,其它离子影响相对较小.以邻联甲苯胺为底物的表观Km值为1.68 mmol/L.  相似文献   

锦橙叶片POD动力学研究   总被引：5，自引：2，他引：3  

谢永红  甘霖  吴正琴 《果树学报》2001,18(2):72-74

以锦橙成熟春梢叶片提取过氧化物酶 (POD) ,分别测定了该酶的最适pH、最适温度及酶促动力学参数Km值和Vmax值 ,比较分析了常见几种POD抑制剂的作用程度。结果表明 :以邻甲氧基酚为底物 ,叶片POD的最适pH为 5 .0 ,最适温度为 32℃ ,Km值为 2 8.0 4mmol/L ,Vmax值为 147.83unit/s·gFW。在所测的 6种抑制剂 (K+、Pb2 +、CN-、Vc、硫脲及L 半胱氨酸 )中 ,CN-,Pb2 +,硫脲和L 半胱氨酸对POD表现出较强的抑制作用 ,K+对POD活性起促进作用。在一定浓度范围内 ,各种抑制剂的作用程度与其浓度具有极显著的相关性  相似文献   

草莓果实成熟过程中Ca~(2+)-ATPase活性变化及酶学特性   总被引：8，自引：1，他引：8  

樊秀彩  关军锋  刘崇怀  张继澍 《果树学报》2003,20(2):99-102

以不同成熟度的草莓果实为试材,研究了草莓果实成熟过程中Ca2+-ATPase活性变化规律、最适pH值、动力学参数Km值和Vmax值。研究结果表明,草莓果实从开始成熟时(绿熟期)Ca2+-ATPase活性不断升高,果实完全成熟时(粉红期)达到最大值,随着成熟后的不断衰老,其活性逐渐降低;该酶的最适pH值为7.0;不同成熟阶段果实Ca2+-ATPase反应所需的Ca2+浓度有所不同,EGTA对各成熟阶段草莓果实的Ca2+-ATPase活性的抑制作用存在明显的差异。经对Ca2+-ATPase的动力学分析表明,不同成熟度果实Ca2+-ATPase的Km值和Vmax值不同,从果实开始成熟Km值逐渐降低,衰老时又逐渐上升,变化趋势与酶活性变化趋势相反;Vmax值变化趋势与酶活性变化趋势相同。2+  相似文献   

香菇中γ-谷氨酰转肽酶的分离纯化及其酶学性质研究     

尹洁  朱军莉  傅玲琳  励建荣 《食用菌学报》2009,16(2)

通过(NH4)2SO4沉淀、Phenyl Sepharose FF疏水层析分离纯化香菇中的γ-谷氨酰转肽酶(γ-Glutamyltranspeptidase,GGT),纯化后的GGT的比活力到达了19.59 U/mg.SDS-PAGE分析表明,GGT由分子量分别为28 kDa和60 kDa的两个亚基组成.酶学性质试验结果表明,GGT反应的最适温度为37 ℃,最适pH 值为7.6;金属离子Na+、K+和Ca2+对酶有激活作用,而Ag+、Cu2+、Zn2+和Fe3+则有抑制作用;试验范围内,GGT水解γ-glutamyl-p-nitroanilide的米氏动力学参数Km 值为2.601 μmol/mL,Vmax值为0.0287 μmol/min;组成的氨基酸中,Glu和Asp含量较高,Met和Cys含量较低.  相似文献   

丝瓜过氧化氢酶(Catalase,CAT)酶学特性的研究     

《中国园艺文摘》2017,(9)

为研究丝瓜过氧化氢酶(Catalase,CAT)酶学特性,本研究应用分光光度计开展温度、pH、酶体积、反应底物浓度等对酶反应的影响,为丝瓜酶促褐变的研究提供基础。结果表明,CAT最适反应体系:以H_2O_2为底物,最适底物浓度为0.33 mol/L H_2O_2,Km值为0.1818 mol/L,最适温度为40℃,最适pH值为7.8,最适酶液体积为0.1 ml。  相似文献   

蜜柚多酚氧化酶的酶学特性与活性测定研究     

纪淑娟  尹竞男  李家政 《北方园艺》2010,(17):171-174

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法在420nm处测定蜜柚多酚氧化酶(PPO)的活性,研究底物浓度、pH、温度及酶液浓度对PPO活性的影响,并建立了酶促褐变反应动力学方程。结果表明:蜜柚多酚氧化酶的酶促反应符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,以邻苯二酚为底物的最大反应速度为:Vmax=22.452U/min,Km=128.2mmol/L。蜜柚多酚氧化酶作用的最适pH6.4,最适温度为10℃。不同时间的蜜柚多酚氧化酶的平均活性呈逐渐下降的趋势。  相似文献   

杏鲍菇漆酶的生物学特性   总被引：12，自引：2，他引：12  

兰瑞芳  林少琴  林玉满  冯珊 《食用菌学报》2002,9(2):14-16

从杏鲍菇、双孢蘑菇、美味侧耳、茶薪菇、凤尾菇和香菇子实体中提取漆酶，用分光光度法测定酶活，发现杏鲍菇漆酶酶活最高，实验结果表明，杏鲍菇漆酶是一种较稳定的高温酶，其最适PH为3．0，最适温度60℃；Pb^2＋,K^ 对酶活有较大的激活使用，而Fe^3 ,Fe^2 则对酶活有较强的抑制作用。  相似文献   

双孢蘑菇POD酶学特性及其与褐变的关系     

吕蔷  朱继英  王相友 《园艺学报》2016,43(3):595-602

为了研究POD在双孢蘑菇褐变过程中的作用,对POD酶学特性进行了测定,并对不同贮藏条件下双孢蘑菇中POD活性变化与褐变的关系进行了分析。结果表明：以愈创木酚为底物时,双孢蘑菇中POD的米氏常数（Km）为5.704 mmol ? L-1,最适反应pH为5.0,最适反应温度为45 ℃;低温可以显著抑制POD的活性,20 ℃和10 ℃时其相对酶活性分别为68%和55%,2 ~10 ℃范围内的酶活性差异不显著;20 ℃贮藏1 d和2 d时POD酶活分别是10 ℃贮藏的4.8倍和10.9倍。7种化合物对POD活性的抑制作用由强到弱依次为：DTT > AsA > L-Cys > SDS > 无水亚硫酸钠 > 柠檬酸 > NaCl。贮藏过程中,虽然POD抑制剂处理双孢蘑菇的褐变程度和气调处理没有显著性差异,但其POD活性显著高于气调处理,说明POD活性高不是引起双孢蘑菇组织褐变的主要因素。  相似文献   

糙皮侧耳以果皮为基质固态发酵产漆酶及其酶学性质的研究     

李梅  吴小波  李萌  吕聪  董旭杰  曹福祥 《食用菌学报》2018,(1)

以漆酶活性为指标,利用不同果皮为基质对糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)固态发酵产漆酶的条件进行优化并对所产漆酶进行纯化,研究纯化后漆酶的酶学性质。结果表明:以柚皮为培养基质(5g柚皮、25mL水、20μL吐温-80),30℃固态发酵10d,糙皮侧耳产漆酶的活性最高,比活力为21800U/g;在该条件下将糙皮侧耳所产漆酶的粗酶液用硫酸铵沉淀、透析、浓缩、DEAE-纤维离子交换柱层析得到漆酶蛋白单一条带,SDS-PAGE检测蛋白相对分子质量约66000;该漆酶命名为Lac h2,其最适反应温度为60℃,最适反应pH值为4.5;在30～50℃,pH 4.5～6.0范围内稳定;金属离子Zn~(2+)、Mn~(2+)、Cu~(2+)和Mg~(2+)对纯化的漆酶Lac h2的酶活力有促进作用而Ca~(2+)、Ag~+和Fe~(2+)对Lac h2的酶活力有抑制作用。  相似文献