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1.
苎麻悬浮细胞原生质体培养再生植株 总被引：5，自引：0，他引：5
苎麻品种浏阳大叶绿的子叶在含有２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ、ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳＢ固体培养基上，形成愈伤组织。愈伤组织经３￣４次继代培养后作液体振荡培养，产生悬浮细胞系。从悬浮系分离的原生质体，只有以海藻酸钠包埋方式培养在ＫＭ８Ｐ培养基中，５０天左右才能形成肉眼可见的小愈伤组织。该愈伤组织在附加２，４－Ｄ０．２ｍｇ／Ｌ、６－ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳＢ生长培养基上增殖，然后转入附加６－ＢＡ２．０ｍｇ 相似文献
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甘薯和Ipomoea lacunosa的种间体细胞杂种植株再生及鉴定 总被引：10，自引：0，他引：10
用ＰＥＧ融合法融合甘薯品种高系１４号和近缘野生种Ｉｐｏｍｏｅａ ｌａｃｕｎｏｓａ的原生质体，将融合原生质体培养在含有０．０５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ ＫＴ的ＭＳ培养基上，愈伤组织迅速增殖。将其中的７０个愈伤组织培养在添加３．０ｍｇ／Ｌ ＢＡＰ的ＭＳ培养基上，并进一步培养在ＭＳ基本培养基上，获得９株再生植株。过氧化物酶同工酶、酯酶同工酶和ＲＡＰＤ分析表明，其中２株再生植株（ＫＬ１和ＫＬ３） 相似文献
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【目的】自流产奶牛粪便及血液中分离得到的非细胞病变型牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV),为了解分离毒株的特性,进行回归动物试验;【方法】将此分离毒回归2月龄健康犊牛,接毒25天后扑杀剖检,观察临床症状及病理变化。自犊牛体内采取脾、骨髓、肠淋巴结及血液接种MDBK细胞进行培养,分离病毒,进行细胞传代,将此细胞毒进行RT-PCR检测;【结果】犊牛表现为典型的急性病毒性腹泻症状和病变。自病料分离病毒经MDBK细胞盲传至第9代,均未出现细胞病变。将此细胞毒进行RT-PCR检测,扩增出相应的665bp的片段;【结论】将分离株接种易感犊牛以复制出BVD-MD病症,并从试验牛体内分离得到BVDV,从而进一步确证分离到的毒株属BVDV。 相似文献
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5.
传染性囊病变异株病毒BK912的培育及鉴定 总被引：1，自引：1，他引：0
用由国外引进的ＩＢＤ变异株鸡胚适应毒经ＣＥＦ传代适应后所获得的ＢＫ９１２Ｆ。毒液进行了病毒理化特性试验和形态学观察,并与标准Ｉ型毒ＣＪ８０１ＢＫＦ株进行了抗原相关性检测。实验证明,ＢＫ９１具有ＩＢＤＶ的基本特性且与标准１型毒ＣＪ８０１ＢＫＦ株处于不同血清亚型,以２０００ＴＣＩＤ５０／０．２ｍｌ的ＢＫ９１２冻干活疫苗免疫ＳＰＦ鸡后能完全抵抗美国标准弯异株强毒１０８４Ａ的攻击,一系列试验有ＢＫ９１２仍 相似文献
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掌叶半夏细胞悬浮培养及单细胞培养再生植株 总被引：6，自引：0，他引：6
掌叶半夏成熟胚在含２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ，ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上可诱导形成颗粒状胚性愈伤组织。用附加２，４－Ｄ ２．０ｍｇ／Ｌ，ＢＡ０．１ ｍｇ／Ｌ，ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ的ＭＳ液体培养基对胚性愈伤组织进行悬浮振荡培养，经３￣４次继代培养即可得到悬浮的单细胞，其细胞多为圆形或椭圆形，具有较强的分裂能力。经测定，悬浮培养过程中细胞生长曲线呈“Ｓ”型，培养２０天时细胞数量和鲜重达到最大值；随着 相似文献
7.
本文对狂犬病固定毒株适应Vero细胞生产株3aG—V的生物学特性进行了研究,包括毒株的形态、抗原结构、培养条件、致病性、免疫原性、纯毒试验及其在中枢神经系统是否形成尼氏小体检查。结果表明狂犬病病毒3aG—V株具有抗原性好,培养产毒量高,保持有aG固定株弱毒性、传代稳定、无变异,可作为替代地鼠肾细胞狂犬病疫苗aG毒株,用于Vero细胞培养病毒生产出毒液毒力高,灭活后效力高,安全性好的纯化Vero细胞狂犬病疫苗的生产用疫苗株。 相似文献
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鹿茸角软骨细胞体外培养方法的建立及生长特性分析 总被引：4，自引：0，他引：4
【研究目的】建立梅花鹿鹿茸软骨细胞体外分离培养和扩增方法，观察鹿茸软骨细胞在体外培养的生物学特性，为鹿茸再生机理的研究奠定基础；【方法】体外分离培养鹿茸软骨细胞，采用组织学、MTT比色法、免疫组化等多种手段动态检测细胞生长增殖情况；【结果】核心部分，约150字鹿茸软骨细胞贴壁生长，原代细胞比传代生长速度快，原代及传代4代内的鹿茸软骨细胞均有活跃的增殖能力，软骨细胞呈三角形，多边形等多种形态，II型胶原免疫组化，甲苯胺蓝染色为阳性；【结论】体外分离培养鹿茸软骨细胞具有较强的增殖能力，传代培养4代内细胞生长旺盛并维持其生物学特性, 可满足后续实验研究要求。 相似文献
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鸡传染性法氏囊病病毒的分离鉴定与培养特性研究 总被引：1，自引：1，他引：0
为研究鸡传染性法氏囊病病毒在不同宿主上的培养特性,从河南省某疑似感染鸡传染性法氏囊病病毒的鸡场采集病料,通过琼脂免疫扩散试验初步筛选出IBDV毒株,并将毒株回归易感鸡,在SPF鸡胚及DF1细胞上培养。结果显示：培养出的病毒作为抗原与标准阳性血清之间均出现阳性沉淀线;回归SPF鸡试验显示发病率达100%,死亡达60%,病死鸡只出现法氏囊肿大、出血甚至出现紫葡萄样;该毒株能引起鸡胚CAM增厚、胚体出血,引起DF1细胞变圆脱落;ELD50与TCID50分别为10-4.6/0.1 mL、10-5.5/0.1 mL。试验证实IBDV分离株,属于超强毒株,该毒株可以在鸡胚和DF1细胞上适应增殖,将其命名为HN12号分离株。 相似文献
10.
利用荧光定量PCR方法研究猪繁殖与呼吸综合征病毒在Marc-145细胞的增殖规律 总被引：2，自引：1，他引：1
摘要:猪繁殖与呼吸综合征病毒可以在原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)、CL2621细胞系及Marc-145细胞系上生长繁殖,但对于其增殖规律不甚了解。试验利用实时荧光定量PCR技术,研究猪繁殖与呼吸综合征病毒在Marc-145细胞中的增殖规律;结果发现:病毒在接种后12 h开始大量增殖,在18-36 h增殖最为迅速,在36-48 h病毒增殖达到最高峰;研究还发现在18 h 时Marc-145细胞开始释放病毒,48 h达最高峰。该结果为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病机理及利用细胞毒生产疫苗提供试验基础。 相似文献
11.
D. Barloy C. Etienne J. Lemoine Y. Saint Ouen J. Jahier P.M. Banks M. Trottet 《Euphytica》2003,129(3):361-369
Barley yellow dwarf virus (BYDV) is one of the most important plant viruses in the world. Two sources of resistance to BYDV
derived from Thinopyrum intermedium were compared in wheat backgrounds. A source of resistance was confirmed in the partial amphiploid TAF46, the group 7 addition
line L1, and translocation TC14. The other source of resistance derives from the partial amphiploid Zhong 5 and is present
in the group 2 addition line Z6. Six ditelosomic addition lines have been derived from Z6. The resistance of genotypes derived
from Zhong 5 is more effective at reducing virus multiplication throughout plant growth than that of genotypes derived from
TAF46. The translocation line TC14, derived from TAF46 showed 30% plants escaping virus infection whereas all plants derived
from Zhong 5 were infected. This suggests that the two sources of resistance are associated with differing mechanisms of resistance.
Methods to better understand the genetic control and the
mechanisms of these two resistances are suggested. The pyramiding of different sources of resistance to construct durable
resistance is discussed.
This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date. 相似文献
12.
一种新的鸭病（暂名鸭出血性坏死性肝炎）病原学研究初报 总被引：6，自引：0，他引：6
从临床表现为肝脏不同程度点/斑块状出血和坏死为主要病变的病死雏番鸭、雏半番鸭和雏麻鸭肝脾组织中分离到8株病毒。分离毒能致死番鸭胚和鸡胚,胚体充出血、胚肝肿大出血坏死;人工感染1-2日龄雏番鸭、雏半番鸭均能复制出与临床自然发病鸭相同的临床症状和病理变化,并能回收到病毒;分离毒能在MDEF中增殖并产生细胞病变,经电镜观察,病毒在细胞浆中增殖,呈大量散在、成堆和晶格状排列,病毒粒子呈球形、二十面体对称、无囊膜、双层衣壳、直径70nm左右;分离毒不能凝集鸡和鸽红细胞,对乙醚、氯仿、FUDR不敏感;病毒核酸为dsRNA,在SDS-PAGE中具有禽呼肠孤病毒10个RNA片段的特征(L1-3、M1-3 和 S1-4);应用MDRV特异性引物不能从分离毒中扩增出任何条带;鉴于分离毒的上述特性,暂将此分离毒归属于呼肠孤病毒科正呼肠孤病毒属新型鸭呼肠孤病毒。 相似文献
13.
摘要：以患病牙鲆的囊肿组织为实验材料,冰裕匀浆后采用低速离心的方法提取淋巴囊肿病毒,用粗提的病毒液感染牙鲆鳃细胞系FG-9307,同时应用以抗淋巴囊肿病毒单克隆抗体为第一抗体的间接免疫荧光抗体技术检测淋巴囊肿病毒是否感染了牙鲆鳃细胞并在其中增殖。结果发现生长旺盛的单层牙鲆鳃细胞接种淋巴囊肿病毒2天后出现明显的细胞病变效应,形成空斑,应用间接免疫荧光抗体方法检测结果为抗淋巴囊肿病毒单抗与未接种淋巴囊肿病毒的牙鲆鳃细胞呈阴性反应,而接种病毒的牙鲆鳃细胞在接种后,细胞质中有明显的特异性荧光,该结果说明牙鲆鳃细胞系是淋巴囊肿病毒的敏感细胞系。 相似文献
14.
Ashutosh Kushwah Dharminder Bhatia Upasana Rani Inderjit Singh Yadav Inderjit Singh C Bharadwaj Sarvjeet Singh 《Breeding Science》2021,71(2):229
Ascochyta blight (AB) and botrytis grey mould (BGM) are the most devastating fungal diseases of chickpea worldwide. The wild relative of chickpea, C. reticulatum acc. ILWC 292 was found resistant to BGM whereas, GPF2 (Cicer arietinum L.) is resistant to AB. A total of 187 F8 Recombinant Inbred Lines (RILs) developed from an inter-specific cross of GPF2 × C. reticulatum acc. ILWC 292 were used to identify quantitative trait loci (QTLs) responsible for resistance to AB and BGM. RILs along with parents were evaluated under artificial epiphytotic field/laboratory conditions for two years. Highly significant differences (P < 0.001) were observed for reaction to both pathogens in both years. Parents and RILs were genotyped-by-sequencing to identify genome wide single nucleotide polymorphism (SNPs). A total of 1365 filtered and parental polymorphic SNPs were used for linkage map construction, of which, 673 SNPs were arranged on eight linkage groups. Composite interval mapping revealed three QTLs for AB and four QTLs for BGM resistance. Out of which, two QTLs for AB and three QTLs for BGM were consistent in both years. These QTLs can be targeted for further fine mapping for deployment of resistance to AB and BGM in elite chickpea cultivars using marker-assisted-selection. 相似文献
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产蛋异常蛋鸭H9N2亚型禽流感病毒的分离鉴定 总被引：3，自引：0，他引：3
从表现产蛋异常的蛋鸭中分离到1 株病毒, 经血凝抑制试验（HI）和聚合酶链反应（PCR）方法鉴定为H9N2亚型禽流感病毒。在GenBank中,BLAST分析扩增的该病毒3个基因片段表明,该株病毒与96年我国山东鸡H9N2亚型禽流感病毒(A/chicken/Shandong/6/96(H9N2))各相应的基因片段同源性最高,均为99%,所扩增的3个片段均为禽源H9N2亚型禽流感病毒的相应基因片段。对HA基因的遗传进化分析表明,该病毒与参考毒株（A/CK/BJ/94）处于同一进化分支上。 相似文献
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Summary Chickpea (Cicer arietinum L.) line ICC 1069 was selected as resistant parent after screening for resistance to grey mould (Botrytis cinerea Pers.) under artificial inoculation conditions. It was crossed with four high yielding susceptible varieties of chickpea. Crosses ICC 1069 × BGM 413 and ICC 1069 × BG 256 showed monogenic dominant resistance in ratio of 3R (resistant): 1S (susceptible). However, in crosses, ICC 1069 × BGM 419 and ICC 1069 × BGM 408, a ratio of 13S (susceptible) : 3R (resistant) was obtained indicating the presence of epistatic interaction. The results pointed towards the presence of a type of major gene resistance to grey mould in chickpea. 相似文献
17.
【研究目的】为了研究猪圆环病毒的分子生物学特征及其发病机理和致病机制,【研究方法】将疑似猪圆环病毒2型的猪脾脏、淋巴结用胰蛋白酶消化处理后接种PK-15细胞,盲传6代后,病毒已经适应PK-15细胞,【研究结果】然后设计一对特异性引物利用PCR技术扩增出ORF2片段中540 bp的基因。第6代细胞病毒液经间接免疫荧光检测表明,在荧光显微镜下可见PCV特征的荧光斑,表明毒株具有感染性。【结论】将病毒纯化后进行电镜观察,病毒粒子直径约17nm,圆形,无囊膜,研究结果表明分离的病毒为猪圆环病毒。 相似文献
18.
根据喉、痘病毒易在上皮细胞中增殖这一共同特点,分别进行鸡传染性喉气管炎、鸡痘弱毒适应鸡胚皮肤细胞(CES)和对CES致细胞病变效应(CPE)试验.掌握其规律之后,选择病变快、含毒量高的第三代喉气管炎细胞毒(LTVCES_3)及第三代鸡痘细胞毒(APVCES_3)以1:1的比例同时接种CES细胞,并分别用鸡胚和细胞对喉、痘鸡胚毒、CES细胞毒及混合细胞毒进行毒价测定.喉、痘细胞毒的毒价平均高于同株鸡胚毒0.7—1个滴度,混合细胞毒毒价平均低于同株细胞毒0.25—0.3个滴度而高于鸡胚毒0.5—0.7个滴度,从而达到在同一细胞上同时增殖喉、痘病毒之目的,为研制喉、痘二联苗探索了新途径. 相似文献
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为制备敏感性好、亲和力高、特异性强的抗沙拉沙星(Sarafloxacin,SARA)单克隆抗体,采用碳二亚胺法合成SARA人工抗原,通过免疫BALB/c小鼠,选择血清效价高且敏感性好的小鼠,采用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,筛选分泌抗SARA单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备SARA mAb,通过间接ELISA和间接竞争ELISA对SARA mAb的免疫学特性进行鉴定。结果表明:小鼠经免疫原免疫后,小鼠多抗血清效价均达到1∶128 000。选择敏感性较好的2号小鼠进行细胞融合,经多次亚克隆后,筛选出1G3、3H3两株杂交瘤细胞株,其中1G3所产SARA mAb效价较高,为1∶512 000,IC_(50)为6.34 ng/mL,亲和常数为8.55×10~8L/mol,与诺氟沙星的交叉反应率为1.06%,与其他药物交叉反应率均低于0.50%。 相似文献
20.
Catherine Dogimont Angelica Bussemakers Jérôme Martin Sofiane Slama Hervé Lecoq Michel Pitrat 《Euphytica》1997,96(3):391-395
The genetic control of resistance to cucurbit aphid-borne yellows luteovirus (CABYV) in Cucumis melo L. was studied in three
progenies obtained from the cross between a resistant Indian line, PI 124112, and a susceptible cultivar of Charentais type,
Védrantais. An F2 progeny and recombinant inbred lines were screened respectively in 1993 and 1995 under natural infection
conditions in open field at Montfavet, France whereas the back cross (PI 124112 × F1) was inoculated by viruliferous Myzus
persicae in controlled conditions. ELISA was used for assessing degree of virus multiplication in the plants resistance. In
the three trials performed, segregation analysis were consistent with the hypothesis that the resistance to CABYV in PI 124112
is conferred by two independent complementary recessive genes, for which the symbols cab-1 and cab-2T are proposed.
This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date. 相似文献